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1、桔皮中總黃酮的微波超聲輔助協(xié)同提取工藝研究作者：張麗珍，周之榮，王群，章淑媛【摘要】目的對微波-超聲輔助提取桔皮中總黃酮的工藝條件及參數(shù)進行優(yōu)化。方法在單因素實驗的基礎(chǔ)上,采用L9(34)正交設(shè)計，以桔皮總黃酮提取率為指標，探討料液比、提取溫度、提取時間、乙醇濃度對提取率的影響。結(jié)果最佳提取工藝參數(shù)為:提取溫度80℃、提取時間60min、乙醇濃度φ=60%、料液比1∶40。結(jié)論采用微波-超聲輔助協(xié)同提取桔皮中總黃酮工藝簡單可行，是提取桔皮中總黃酮的有效工藝之一。用于提取桔皮中的總黃酮，結(jié)果滿意
2、，回收率為98.6%～102.3%,RSD為1.6%?！娟P(guān)鍵詞】桔皮；總黃酮；微波-超聲輔助協(xié)同提??；正交實驗 柑桔為蕓香科柑桔屬植物，其干燥果皮為藥材陳皮，具有理氣健脾、燥濕化痰作用。近年來研究表明，桔皮含有豐富的黃酮類物質(zhì)，黃酮類化合物是自然界中廣泛存在的一類天然產(chǎn)物，藥理學(xué)研究表明其具有抗炎［1］、抗氧化［2，3］、抗過敏作用［4］以及降低血液和肝臟中膽固醇的作用［5］?！ √崛〗燮ぶ锌傸S酮的方法有：酶輔助提取法［6］，超聲波輔助提取法［7］，微波輔助提取法［8］，有機溶劑提取法［9］。
3、但迄今對桔皮中總黃酮的微波-超聲輔助協(xié)同提取工藝未見報道。微波-超聲協(xié)同萃取是近年發(fā)展起來的一種新方法，具有簡單、快速、高效的特點，已被用于天然產(chǎn)物有效成分的提取，尤其在黃酮類、萜類、多糖等有效成分的提取上效果更好。本文研究了采用該技術(shù)提取桔皮中總黃酮的最佳工藝條件。 1器材 1.1材料蘆丁對照品(中國藥品生物制品檢定所)；桔皮(廣州致信中藥飲片有限公司)，購自廣東藥學(xué)院附屬門診部藥房：將桔皮粉碎，用折疊成筒狀的濾紙裝好，加入100ml石油醚冷浸24h，然后將其置于80℃水浴中，使其微沸回流
4、反復(fù)提取，直至提取液澄清為止，取出冷卻至室溫。抽濾，濾渣用石油醚充分洗滌后，風(fēng)干至石油醚全部揮發(fā)，得到去除色素和油脂的桔皮粉末?！ 嶒炗盟疄殡p蒸水；所用試劑均分析純?！ ?.2儀器Cl量瓶中，加乙醇70ml，置于水浴上微熱使溶解，冷卻至室溫，加乙醇至刻度，搖勻。精密吸取10ml，置于100ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得0.2mg/ml蘆丁對照品溶液。精密量取對照品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0，7.0ml，分別置25ml量瓶中，加乙醇至6ml，加ρ(NaNO2)
5、=5%亞硝酸鈉溶液1.0ml，混勻，放置6min，加ρ［Al(NO3)3］=10%硝酸鋁溶液1.0ml，搖勻，放置6min，加ρ(NaOH)=5%氫氧化鈉試液10.0ml，再加水至刻度，搖勻，放置15min。以乙醇為參比，用1cm比色皿，于U3010紫外可見分光光度計上，在400～600nm波長處進行掃描。結(jié)果表明，對照品溶液在510nm處有最大吸收，因此選擇510nm作為測定波長。在510nm波長處測定體系的吸收度，以吸收度(A)為縱坐標、濃度ρ蘆丁(μg/ml)為橫坐標，繪制標準曲線，得回歸
6、方程Ａ=0.01152ρ蘆丁+0.0068(r=0.9994)。結(jié)果表明，蘆丁對照品在所試濃度0.00～56.00μg/ml范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系?！ ?.2提取溶劑的選擇 2.2.1水提取稱取去除色素和油脂的桔皮粉末1.0000g于超聲-微波協(xié)同萃取儀中，加水40ml，混勻，在超聲裝置開啟、提取溫度為80℃時，提取60min。趁熱過濾至100ml容量瓶中，藥渣用少量水洗滌3次，每次過濾。并入濾液，冷卻，用水定容后備用。 2.2.2乙醇提取稱取去除色素和油脂的桔皮粉末1.0000ｇ在超聲-微
7、波協(xié)同萃取儀中，加φ=60%乙醇40ml，混勻，在超聲裝置開啟、提取溫度為80℃時，提取60min。趁熱過濾至100ml容量瓶中。藥渣用少量乙醇洗滌3次，每次過濾。并入濾液，冷卻，用乙醇定容后備用?！ ?.2.3樣品溶液總黃酮含量測定移取樣品液1.00ml于25ml容量瓶中，按標準曲線制備方法進行操作、顯色，測定吸光度，由標準曲線得到樣品中總黃酮含量。結(jié)果見表1。表1提取溶劑與總黃酮產(chǎn)率的關(guān)系（略） 由表1可知，以乙醇作溶劑的提取法優(yōu)于以水為溶劑的提取法。用水做溶劑提取黃酮雖然存在生產(chǎn)成本低，
8、無溶劑殘留的優(yōu)點，但存在提取率較低，提取液存放易腐敗變質(zhì)，后續(xù)的過濾、濃縮操作困難且費時等不足，因此本實驗選擇乙醇作為提取溶劑?！ ?.2.4超聲開與超聲關(guān)對總黃酮提取率的影響在料液比1∶40，溫度為80℃，提取時間為60min的情況下，超聲裝置開啟與超聲裝置關(guān)閉時總黃酮的提取率結(jié)果見表2。表2超聲裝置開啟與關(guān)閉對總黃酮提取率的影響（略） 由表2可以看出，超聲裝置開啟的總黃酮提取率為5.48%，比超聲裝置關(guān)閉的時候高0.90%，因為在超聲提取條件下，超聲波能產(chǎn)生高頻振蕩，強化傳質(zhì)，同時對植物的
