桔皮中總黃酮的微波超聲輔助協(xié)同提取工藝研究

桔皮中總黃酮的微波超聲輔助協(xié)同提取工藝研究

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1、桔皮中總黃酮的微波超聲輔助協(xié)同提取工藝研究作者:張麗珍,周之榮,王群,章淑媛【摘要】目的對微波-超聲輔助提取桔皮中總黃酮的工藝條件及參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化。方法在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用L9(34)正交設(shè)計(jì),以桔皮總黃酮提取率為指標(biāo),探討料液比、提取溫度、提取時(shí)間、乙醇濃度對提取率的影響。結(jié)果最佳提取工藝參數(shù)為:提取溫度80℃、提取時(shí)間60min、乙醇濃度φ=60%、料液比1∶40。結(jié)論采用微波-超聲輔助協(xié)同提取桔皮中總黃酮工藝簡單可行,是提取桔皮中總黃酮的有效工藝之一。用于提取桔皮中的總黃酮,結(jié)果滿意

2、,回收率為98.6%~102.3%,RSD為1.6%?!娟P(guān)鍵詞】桔皮;總黃酮;微波-超聲輔助協(xié)同提取;正交實(shí)驗(yàn)  柑桔為蕓香科柑桔屬植物,其干燥果皮為藥材陳皮,具有理氣健脾、燥濕化痰作用。近年來研究表明,桔皮含有豐富的黃酮類物質(zhì),黃酮類化合物是自然界中廣泛存在的一類天然產(chǎn)物,藥理學(xué)研究表明其具有抗炎[1]、抗氧化[2,3]、抗過敏作用[4]以及降低血液和肝臟中膽固醇的作用[5]?! √崛〗燮ぶ锌傸S酮的方法有:酶輔助提取法[6],超聲波輔助提取法[7],微波輔助提取法[8],有機(jī)溶劑提取法[9]。

3、但迄今對桔皮中總黃酮的微波-超聲輔助協(xié)同提取工藝未見報(bào)道。微波-超聲協(xié)同萃取是近年發(fā)展起來的一種新方法,具有簡單、快速、高效的特點(diǎn),已被用于天然產(chǎn)物有效成分的提取,尤其在黃酮類、萜類、多糖等有效成分的提取上效果更好。本文研究了采用該技術(shù)提取桔皮中總黃酮的最佳工藝條件?! ?器材  1.1材料蘆丁對照品(中國藥品生物制品檢定所);桔皮(廣州致信中藥飲片有限公司),購自廣東藥學(xué)院附屬門診部藥房:將桔皮粉碎,用折疊成筒狀的濾紙裝好,加入100ml石油醚冷浸24h,然后將其置于80℃水浴中,使其微沸回流

4、反復(fù)提取,直至提取液澄清為止,取出冷卻至室溫。抽濾,濾渣用石油醚充分洗滌后,風(fēng)干至石油醚全部揮發(fā),得到去除色素和油脂的桔皮粉末?! ?shí)驗(yàn)用水為雙蒸水;所用試劑均分析純?! ?.2儀器Cl量瓶中,加乙醇70ml,置于水浴上微熱使溶解,冷卻至室溫,加乙醇至刻度,搖勻。精密吸取10ml,置于100ml量瓶中,加水至刻度,搖勻,即得0.2mg/ml蘆丁對照品溶液。精密量取對照品溶液0.0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,7.0ml,分別置25ml量瓶中,加乙醇至6ml,加ρ(NaNO2)

5、=5%亞硝酸鈉溶液1.0ml,混勻,放置6min,加ρ[Al(NO3)3]=10%硝酸鋁溶液1.0ml,搖勻,放置6min,加ρ(NaOH)=5%氫氧化鈉試液10.0ml,再加水至刻度,搖勻,放置15min。以乙醇為參比,用1cm比色皿,于U3010紫外可見分光光度計(jì)上,在400~600nm波長處進(jìn)行掃描。結(jié)果表明,對照品溶液在510nm處有最大吸收,因此選擇510nm作為測定波長。在510nm波長處測定體系的吸收度,以吸收度(A)為縱坐標(biāo)、濃度ρ蘆丁(μg/ml)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸

6、方程A=0.01152ρ蘆丁+0.0068(r=0.9994)。結(jié)果表明,蘆丁對照品在所試濃度0.00~56.00μg/ml范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系?! ?.2提取溶劑的選擇  2.2.1水提取稱取去除色素和油脂的桔皮粉末1.0000g于超聲-微波協(xié)同萃取儀中,加水40ml,混勻,在超聲裝置開啟、提取溫度為80℃時(shí),提取60min。趁熱過濾至100ml容量瓶中,藥渣用少量水洗滌3次,每次過濾。并入濾液,冷卻,用水定容后備用?! ?.2.2乙醇提取稱取去除色素和油脂的桔皮粉末1.0000g在超聲-微

7、波協(xié)同萃取儀中,加φ=60%乙醇40ml,混勻,在超聲裝置開啟、提取溫度為80℃時(shí),提取60min。趁熱過濾至100ml容量瓶中。藥渣用少量乙醇洗滌3次,每次過濾。并入濾液,冷卻,用乙醇定容后備用?! ?.2.3樣品溶液總黃酮含量測定移取樣品液1.00ml于25ml容量瓶中,按標(biāo)準(zhǔn)曲線制備方法進(jìn)行操作、顯色,測定吸光度,由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣品中總黃酮含量。結(jié)果見表1。表1提取溶劑與總黃酮產(chǎn)率的關(guān)系(略)  由表1可知,以乙醇作溶劑的提取法優(yōu)于以水為溶劑的提取法。用水做溶劑提取黃酮雖然存在生產(chǎn)成本低,

8、無溶劑殘留的優(yōu)點(diǎn),但存在提取率較低,提取液存放易腐敗變質(zhì),后續(xù)的過濾、濃縮操作困難且費(fèi)時(shí)等不足,因此本實(shí)驗(yàn)選擇乙醇作為提取溶劑?! ?.2.4超聲開與超聲關(guān)對總黃酮提取率的影響在料液比1∶40,溫度為80℃,提取時(shí)間為60min的情況下,超聲裝置開啟與超聲裝置關(guān)閉時(shí)總黃酮的提取率結(jié)果見表2。表2超聲裝置開啟與關(guān)閉對總黃酮提取率的影響(略)  由表2可以看出,超聲裝置開啟的總黃酮提取率為5.48%,比超聲裝置關(guān)閉的時(shí)候高0.90%,因?yàn)樵诔曁崛l件下,超聲波能產(chǎn)生高頻振蕩,強(qiáng)化傳質(zhì),同時(shí)對植物的

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