血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙及發(fā)病機(jī)制

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1、中國(guó)農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)必須有商業(yè)保險(xiǎn)公司進(jìn)入，才能形成完整的醫(yī)療保障體系。面對(duì)巨大的農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)市場(chǎng)，保險(xiǎn)公司卻駐足不前，究其原因主要是缺乏政府政策支持，現(xiàn)有農(nóng)村醫(yī)療衛(wèi)生環(huán)境及其衛(wèi)生管理體制與商業(yè)健康保險(xiǎn)配套需求差距較大，風(fēng)險(xiǎn)較高。針對(duì)農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)市場(chǎng)，保險(xiǎn)公司應(yīng)積極主動(dòng)地爭(zhēng)取改善外部環(huán)境，同時(shí)應(yīng)及早地制定公司進(jìn)入戰(zhàn)略，以獲取新的保險(xiǎn)業(yè)務(wù)增長(zhǎng)點(diǎn)中國(guó)農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)必須有商業(yè)保險(xiǎn)公司進(jìn)入，才能形成完整的醫(yī)療保障體系。面對(duì)巨大的農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)市場(chǎng)，保險(xiǎn)公司卻駐足不前，究其原因主要是缺乏政府政策支持，現(xiàn)有農(nóng)村醫(yī)療衛(wèi)生環(huán)境及其衛(wèi)生管理體制與商業(yè)健康保險(xiǎn)配套需求差距較大，風(fēng)險(xiǎn)

2、較高。針對(duì)農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)市場(chǎng)，保險(xiǎn)公司應(yīng)積極主動(dòng)地爭(zhēng)取改善外部環(huán)境，同時(shí)應(yīng)及早地制定公司進(jìn)入戰(zhàn)略，以獲取新的保險(xiǎn)業(yè)務(wù)增長(zhǎng)點(diǎn)中國(guó)農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)必須有商業(yè)保險(xiǎn)公司進(jìn)入，才能形成完整的醫(yī)療保障體系。面對(duì)巨大的農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)市場(chǎng)，保險(xiǎn)公司卻駐足不前，究其原因主要是缺乏政府政策支持，現(xiàn)有農(nóng)村醫(yī)療衛(wèi)生環(huán)境及其衛(wèi)生管理體制與商業(yè)健康保險(xiǎn)配套需求差距較大，風(fēng)險(xiǎn)較高。針對(duì)農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)市場(chǎng)，保險(xiǎn)公司應(yīng)積極主動(dòng)地爭(zhēng)取改善外部環(huán)境，同時(shí)應(yīng)及早地制定公司進(jìn)入戰(zhàn)略，以獲取新的保險(xiǎn)業(yè)務(wù)增長(zhǎng)點(diǎn)中國(guó)農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)必須有商業(yè)保險(xiǎn)公司進(jìn)入，才能形成完整的醫(yī)療保障體系。面對(duì)巨大的農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)市場(chǎng)，保險(xiǎn)

3、公司卻駐足不前，究其原因主要是缺乏政府政策支持，現(xiàn)有農(nóng)村醫(yī)療衛(wèi)生環(huán)境及其衛(wèi)生管理體制與商業(yè)健康保險(xiǎn)配套需求差距較大，風(fēng)險(xiǎn)較高。針對(duì)農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)市場(chǎng)，保險(xiǎn)公司應(yīng)積極主動(dòng)地爭(zhēng)取改善外部環(huán)境，同時(shí)應(yīng)及早地制定公司進(jìn)入戰(zhàn)略，以獲取新的保險(xiǎn)業(yè)務(wù)增長(zhǎng)點(diǎn)文章來(lái)源畢業(yè)論文網(wǎng)www.biyelunwen.com.cn血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙及發(fā)病機(jī)制文章來(lái)源畢業(yè)論文網(wǎng)www.biyelunwen.com.cn【摘要】 目的研究血管性癡呆(VD)大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙及發(fā)病機(jī)制。方法4血管阻斷法制作模型，Morris水迷宮法檢測(cè)學(xué)習(xí)記憶能力，免疫組化法觀察Bcl2和

4、Bax表達(dá)，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡率，亞甲藍(lán)比色法檢測(cè)血清中H2S含量。結(jié)果模型組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力明顯減退。Bcl2/Bax在缺血再灌注(I/R)開(kāi)始時(shí)升高，隨后開(kāi)始下降。模型組大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡率明顯增加。模型組大鼠血清中H2S含量明顯減少。血清H2S含量與海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡率間呈明顯負(fù)相關(guān)。結(jié)論VD可導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶障礙，海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡和血清中H2S含量減少;海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡程度可能與內(nèi)源性H2S生成減少有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】 血管性癡呆;學(xué)習(xí)記憶;免疫組化;流式細(xì)胞術(shù);硫化氫血管性癡呆(VD)是老年期癡呆的主要類型之一，它是由一系列腦血

5、管因素(缺血、出血、急慢性缺氧性腦血管病等)導(dǎo)致腦組織損害引起的以認(rèn)知功能障礙為特征的癡呆綜合征〔1〕，不僅給病人帶來(lái)長(zhǎng)期痛苦，嚴(yán)重影響其生活質(zhì)量，而且給家庭、社會(huì)造成沉重負(fù)擔(dān)，因此研究VD的發(fā)病機(jī)制以指導(dǎo)其防治具有很高的社會(huì)價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義。H2S是第三類氣體信號(hào)分子，廣泛參與機(jī)體的多種生理和病理過(guò)程，為進(jìn)一步了解其在VD發(fā)病中的作用，本研究觀察大腦缺血/再灌注(I/R)不同時(shí)間對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響、血清中H2S含量改變及海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況，從行為學(xué)、細(xì)胞凋亡及內(nèi)源性H2S表達(dá)量及其相互關(guān)系等方面，探討VD的發(fā)病機(jī)制，為其防治提供理論依據(jù)。

6、　　1材料與方法　　1.1動(dòng)物與分組健康Wistar雄性大鼠64只，體重300～350g(由河北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)，隨機(jī)分為8組，正常組，假手術(shù)組和VD模型組，VD模型組又分為大腦I/R2，8，24，72，168和720h組，每組8只動(dòng)物。　　1.2動(dòng)物模型制備4血管阻斷法(4VO法)〔2〕建立VD大鼠模型。假手術(shù)組麻醉及手術(shù)過(guò)程與VD模型組相同，但不電凝雙側(cè)椎動(dòng)脈，不阻斷雙側(cè)頸總動(dòng)脈。術(shù)后按再灌注的不同時(shí)間分別將動(dòng)物處死,經(jīng)主動(dòng)脈依次灌注生理鹽水100ml和4%多聚甲醛500ml，取出腦組織，石蠟包埋切片，用于免疫組化顯示Bcl2、Bax及蘇木素

7、伊紅(HE)染色?！　?.3學(xué)習(xí)記憶能力的測(cè)定Morris水迷宮檢測(cè)〔3〕：實(shí)驗(yàn)開(kāi)始于VD術(shù)后4w，預(yù)先將迷宮任意分為4個(gè)象限。平臺(tái)放入上述4個(gè)象限中隨機(jī)選擇的1個(gè)象限中，在大鼠游泳池邊標(biāo)記4點(diǎn)作為大鼠的入水點(diǎn)，記錄120s內(nèi)大鼠從入水到爬上平臺(tái)所需的時(shí)間，即逃避潛伏期。記錄各組大鼠的逃避潛伏期，作為學(xué)習(xí)記憶能力檢測(cè)指標(biāo)。　　1.4取材大鼠10%水合氯醛(3ml/kg體重)腹腔注射麻醉后，快速開(kāi)胸暴露心臟，心尖取血4～5ml，分離血清，用于血清H2S含量測(cè)定;然后斷頭處死，并立即在冰臺(tái)上開(kāi)顱，迅速分離大鼠海馬，用70%酒精固定，4℃冰箱保存過(guò)夜，用于流

8、式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)?！　?.5HE染色切片常規(guī)脫蠟至水→1%鹽酸酒精分化&r