超高壓滅活流感病毒的免疫原性研究

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1、中國(guó)農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)必須有商業(yè)保險(xiǎn)公司進(jìn)入，才能形成完整的醫(yī)療保障體系。面對(duì)巨大的農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)市場(chǎng)，保險(xiǎn)公司卻駐足不前，究其原因主要是缺乏政府政策支持，現(xiàn)有農(nóng)村醫(yī)療衛(wèi)生環(huán)境及其衛(wèi)生管理體制與商業(yè)健康保險(xiǎn)配套需求差距較大，風(fēng)險(xiǎn)較高。針對(duì)農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)市場(chǎng)，保險(xiǎn)公司應(yīng)積極主動(dòng)地爭(zhēng)取改善外部環(huán)境，同時(shí)應(yīng)及早地制定公司進(jìn)入戰(zhàn)略，以獲取新的保險(xiǎn)業(yè)務(wù)增長(zhǎng)點(diǎn)中國(guó)農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)必須有商業(yè)保險(xiǎn)公司進(jìn)入，才能形成完整的醫(yī)療保障體系。面對(duì)巨大的農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)市場(chǎng)，保險(xiǎn)公司卻駐足不前，究其原因主要是缺乏政府政策支持，現(xiàn)有農(nóng)村醫(yī)療衛(wèi)生環(huán)境及其衛(wèi)生管理體制與商業(yè)健康保險(xiǎn)配套需求差距較大，風(fēng)險(xiǎn)較高。針對(duì)農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)

2、市場(chǎng)，保險(xiǎn)公司應(yīng)積極主動(dòng)地爭(zhēng)取改善外部環(huán)境，同時(shí)應(yīng)及早地制定公司進(jìn)入戰(zhàn)略，以獲取新的保險(xiǎn)業(yè)務(wù)增長(zhǎng)點(diǎn)中國(guó)農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)必須有商業(yè)保險(xiǎn)公司進(jìn)入，才能形成完整的醫(yī)療保障體系。面對(duì)巨大的農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)市場(chǎng)，保險(xiǎn)公司卻駐足不前，究其原因主要是缺乏政府政策支持，現(xiàn)有農(nóng)村醫(yī)療衛(wèi)生環(huán)境及其衛(wèi)生管理體制與商業(yè)健康保險(xiǎn)配套需求差距較大，風(fēng)險(xiǎn)較高。針對(duì)農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)市場(chǎng)，保險(xiǎn)公司應(yīng)積極主動(dòng)地爭(zhēng)取改善外部環(huán)境，同時(shí)應(yīng)及早地制定公司進(jìn)入戰(zhàn)略，以獲取新的保險(xiǎn)業(yè)務(wù)增長(zhǎng)點(diǎn)中國(guó)農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)必須有商業(yè)保險(xiǎn)公司進(jìn)入，才能形成完整的醫(yī)療保障體系。面對(duì)巨大的農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)市場(chǎng)，保險(xiǎn)公司卻駐足不前，究其原因主要是缺乏政府政策支

3、持，現(xiàn)有農(nóng)村醫(yī)療衛(wèi)生環(huán)境及其衛(wèi)生管理體制與商業(yè)健康保險(xiǎn)配套需求差距較大，風(fēng)險(xiǎn)較高。針對(duì)農(nóng)村醫(yī)療保險(xiǎn)市場(chǎng)，保險(xiǎn)公司應(yīng)積極主動(dòng)地爭(zhēng)取改善外部環(huán)境，同時(shí)應(yīng)及早地制定公司進(jìn)入戰(zhàn)略，以獲取新的保險(xiǎn)業(yè)務(wù)增長(zhǎng)點(diǎn)文章來(lái)源畢業(yè)論文網(wǎng)www.biyelunwen.com.cn超高壓滅活流感病毒的免疫原性研究文章來(lái)源畢業(yè)論文網(wǎng)www.biyelunwen.com.cn【摘要】 目的檢測(cè)超高壓滅活的流感病毒FM1株的免疫原性。方法采用超高壓技術(shù)(300mPa，2.5h)滅活甲型流感病毒FM1株。取ICR小鼠60只，用于病毒免疫性實(shí)驗(yàn)及免疫保護(hù)試驗(yàn)各30只。分別進(jìn)行抗體檢測(cè)、T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試

4、驗(yàn)，并計(jì)算感染后小鼠的肺指數(shù)和肺指數(shù)抑制率。結(jié)果壓力滅活組和病毒對(duì)照組小鼠抗體產(chǎn)生量、T淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)均顯著高于正常對(duì)照組(P<0.01);壓力滅活組小鼠肺指數(shù)顯著低于病毒對(duì)照組(P<0.01)。結(jié)論超高壓技術(shù)滅活的流感病毒FM1株保留了很好的免疫原性?！娟P(guān)鍵詞】 超高壓;流感病毒;免疫原性疫苗接種是當(dāng)今防止流感發(fā)生和流行最有效的一種手段〔1〕。在我國(guó)目前使用的流感疫苗為第一代疫苗，其中全病毒滅活疫苗雖然免疫效果好，但因?yàn)榘l(fā)生副反應(yīng)的幾率高，且存在制備過(guò)程復(fù)雜和安全性等問(wèn)題不適宜兒童和老年人接種。超高壓(HighHydrostaticPressure，

5、HHP)是指超過(guò)100mPa的壓力，作為一種有效的滅菌消毒的物理手段已成功地應(yīng)用于生物工程的多個(gè)領(lǐng)域〔2～4〕，采用超高壓技術(shù)滅活病毒可以提供一個(gè)完整的病毒顆粒，這種病毒顆粒不僅喪失了原來(lái)的感染性且很好的保持了病毒的免疫原性，制備過(guò)程簡(jiǎn)單，不添加化學(xué)制劑，在一定程度上降低了副反應(yīng)的發(fā)生。國(guó)外已用該技術(shù)開(kāi)展了動(dòng)物疫苗的研制工作〔4，5〕，但用于流感疫苗的研究尚未見(jiàn)報(bào)道?！　”菊n題組已經(jīng)采用超高壓技術(shù)滅活了流感病毒FM1株，并已確定了其滅活的適宜條件〔6〕。本研究采用超高壓滅活的流感病毒免疫小鼠，檢測(cè)其免疫效果，從而為進(jìn)一步探討用超高壓方法制備流感疫苗的可行性提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)?！　?

6、材料與方法　　1.1動(dòng)物ICR小鼠共60只，雄性，4w齡，18～22g,購(gòu)自吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。分別用于病毒免疫性實(shí)驗(yàn)(30只)和免疫保護(hù)試驗(yàn)(30只)，均在相同條件下飼養(yǎng)?！　?.2主要試劑及儀器細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)液(IMDM)、小牛血清、胰蛋白酶、二甲基亞砜(DMSO)、MTT、ConA、弗氏完全佐劑和HRP羊抗鼠IgG均為美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品。EDTA和ELISA用試劑為鼎國(guó)生物制品公司產(chǎn)品。OLYMPUSCKX41倒置顯微鏡，蘇泰集團(tuán)BHC1300ⅡA/B3生物安全柜，日本三洋MCO17AICCO2培養(yǎng)箱和MDFU4086S型超低溫冰箱。TECANA5

7、082酶標(biāo)檢測(cè)儀，上海超高壓儀器廠(chǎng)7000.55×1.5型靜壓機(jī)。　　1.3細(xì)胞株及病毒株流感病毒鼠肺適應(yīng)株FM1和MDCK細(xì)胞株由吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)教研室分子病毒研究室保存。經(jīng)MDCK細(xì)胞擴(kuò)增后，病毒裝入無(wú)菌塑料袋，放入用于超高壓的靜壓機(jī)，在300mPa，保壓2.5h進(jìn)行病毒的滅活，滅活的流感病毒分裝后，放入-70℃保存，待用?！　?.4病毒免疫性實(shí)驗(yàn)30只ICR小鼠隨機(jī)分為壓力滅活組、病毒對(duì)照組和正常對(duì)照組，每組10只，超高壓滅活病毒組每只皮下注射經(jīng)超高壓滅活的病毒0.2ml