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1、牡丹葉總黃酮抑菌活性研究論文唐浩國，單方方，魏曉霞，李葉，劉嚴，向進樂，徐寶成【摘要】目的分別測定了牡丹葉總黃酮提取液、經(jīng)大孔吸附樹脂（D-101、HPD600）和超濾分離后的濃縮液對幾種常見微生物的抑菌活性。方法以抑菌圈直徑和最低抑菌濃度為指標。結(jié)果乙醇提取液對3種細菌的最低抑菌濃度(MIC)分別為：大腸桿菌5.08mg/ml，枯草芽胞桿菌2.54mg/ml.freelg/ml；HPD600大孔吸附樹脂分離濃縮液對3種細菌的MIC值分別為：大腸桿菌4.92mg/ml，枯草芽胞桿菌2.46mg/ml和沙門氏菌1.23mg/ml；D
2、-101大孔吸附樹脂分離濃縮液對3種細菌的MIC值分別為：大腸桿菌3.13mg/ml，枯草芽胞桿菌3.13mg/ml和沙門氏菌0.39mg/ml；超濾工藝分離濃縮液對3種細菌的MIC值分別為：大腸桿菌4.048mg/ml，枯草芽胞桿菌4.048mg/ml和沙門氏菌1.012mg/ml。結(jié)論牡丹葉總黃酮對3種細菌均有一定的抑制作用，其中對沙門氏菌的抑制作用最為顯著?！娟P(guān)鍵詞】牡丹葉總黃酮抑菌活性大孔吸附樹脂超濾Abstract：ObjectiveTostudytheantibacterialactivityoftheextracti
3、onsolutionandconcentratedliquidoftotalflavonoidsafterseparationofthemacroporousresin(D-101,HPD600)andultrafiltrationfromtheleavesofpeony.MethodsAntimicrobialcirclediameterandminimuminhibitoryconcentrationg/ml,Bacillussubtilis2.46mg/ml,Salmonella1.23mg/ml;theMICofthese
4、parationoftheHPD600concentratedliquidtothethreekindsofbacteriag/ml,Bacillussubtilis3.13mg/ml,Salmonella0.39mg/ml;TheMICoftheseparationoftheD-101concentratedliquidtothethreekindsofbacteriag/ml,Bacillussubtilis4.048mg/ml,Salmonella1.012mg/ml;TheMICoftheseparationoftheUF
5、concentratedliquidtothethreekindsofbacteriag/ml,Bacillussubtilis2.46mg/ml,Salmonella0.39mg/ml.ConclusionThetotalflavonoidsfromleavesofpeonyhaveacertaineffectonthethreekindsofbacteria,buttheeffectofSalmonellaisthemostnotablerespectively.Keyl圓底燒瓶中，精密加入25倍量60%的乙醇，在80℃條件下
6、加熱回流提取提取3h，過濾，離心分離，用相應濃度的乙醇定容到100ml，備用。黃酮純度為5.27%。1.1.3大孔吸附樹脂分離純化牡丹葉總黃酮粗提液將牡丹葉干粉于60%的乙醇、80℃、料液比1∶25的條件下浸提3h，抽濾，濾液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中50℃下減壓濃縮至無醇味，回收乙醇。濃縮液用蒸餾水溶解，定容，測定吸光度，計算總黃酮含量，最后取一定量濃縮液再用蒸餾水定容，使其濃度為0.250mg/ml左右，得稀釋液。分別稱取預處理好的大孔吸附樹脂各8.0g于250ml具塞三角瓶中，加入樣品溶液240ml，室溫下放置8h，過濾，濾去樹脂，用蒸
7、餾水洗脫，洗至無醇味，再用160ml的70%的乙醇水溶液進行洗脫6h，過濾，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮洗脫液，得樣液，備用。HPD600得到的黃酮的純度為15.11%，D-101樹脂得到的黃酮純度為17.60%。1.1.4牡丹葉黃酮的超濾分離用切割分子量為10000Da，膜面積為50cm2的超濾設備進行分離。黃酮純度為40.58%。1.2培養(yǎng)基的配制普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：蛋白胨10g，牛肉膏5g，氯化鈉5g，瓊脂20g，蒸餾水1000ml。lkgf.cm-2滅菌15min。1.3菌懸液的制備把大腸桿菌(Escherichiacoli)、枯草芽孢桿
8、菌(Bacillussubtilis)和沙門氏菌（Salmonella）原菌種接種于普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面上，37℃培養(yǎng)20～22h，用l0ml滅菌生理鹽水洗下菌苔備用。把上述菌懸液分別用滅菌的生理鹽水配制成含菌數(shù)106cfu.ml-1的菌懸液。1
