仙靈骨葆對(duì)兔膝骨性關(guān)節(jié)炎治療作用的研究

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1、仙靈骨葆對(duì)兔膝骨性關(guān)節(jié)炎治療作用的研究：程潭，張柳，李震，李強(qiáng)，穆樹林，田發(fā)明，劉永強(qiáng)【摘要】[目的]研究仙靈骨葆(xianlinggubao,XLGB)對(duì)兔骨性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨及軟骨下骨的保護(hù)作用。[方法]30只3個(gè)月齡雄性日本大耳白兔，隨機(jī)分為對(duì)照組(Sham)、鹽水組(ACLT+NS)和仙靈骨葆組(ACLT+XLGB)，每組各10只。鹽水組和仙靈骨葆組行右膝關(guān)節(jié)前交叉韌帶切斷術(shù)(anteriorcruciateligamenttransaction,ACLT)造成膝骨性關(guān)節(jié)炎模型。術(shù)后仙靈骨葆組125mg/(kg·d)灌胃;鹽水組則給予等劑量生理鹽水。6周后處死動(dòng)

2、物，取股骨測(cè)量骨密度，之后脫鈣制片，行HE染色、Mankin評(píng)分及BMP-2、MMP-13免疫組化染色;取右膝脛骨近端包埋，制成硬組織切片，用于骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)測(cè)量。[結(jié)果](1)Mankin評(píng)分：仙靈骨葆組顯著低于鹽水組。(2)股骨遠(yuǎn)端骨密度及脛骨近端軟骨下骨骨量：仙靈骨葆組均顯著高于鹽水組。(3)免疫組化：仙靈骨葆組MMP-13的表達(dá)顯著低于鹽水組，BMP-2的表達(dá)顯著高于鹽水組。[結(jié)論]仙靈骨葆125mg/(kg·d)灌胃能夠部分阻止骨關(guān)節(jié)炎兔關(guān)節(jié)軟骨的退變，其作用機(jī)制可能與下調(diào)MMP-13的表達(dá)，上調(diào)BMP-2的表達(dá)，同時(shí)增加軟骨下骨骨量，改善其微觀結(jié)構(gòu)有關(guān)。

3、【關(guān)鍵詞】仙靈骨葆;骨性關(guān)節(jié)炎;軟骨細(xì)胞;軟骨下骨;BMP-2;MMP-13　　Abstract:[Objective]ToassesstheprotectiveeffectsofXianlinggubaoonarticularcartilageandsubchondralboneinexperimentalosteoarthritisinducedbyanteriorcruciateligamenttransaction(ACLT)inrabbits.[Methods]ThirtyhealthyJapaneselyintothreegroups:shamgroup,

4、ACLT+XLGBgroupandACLT+NSgroup.RabbitsinACLT+XLGBgroupandACLT+NSgroupreceivedanteriorcruciateligamenttransection(ACLT)ontherightknee.Rabbitsinshamgroupreceiveduntreatmentascontrol.ACLT+XLGBgroupreceivedadailyadministrationofXLGBatadoseof125mg/kgofbodyedose.Allrabbitsoraoved,measuredforbo

5、nemineraldensity(BMD),andthenacro-pathologicchangesmunostaining.Thesubchondralboneofrighttibialplateaueasurementofbonehistomorphometry.[Results](1)TheMankin’sscoreinACLT+XLGBgrouporaandsubchondralbonemassofproximaltibiainACLT+XLGBgroupinistrationofXLGBatadoseof125ug/kg/dfor6provingthest

6、ructureofsubchondralboneandreducingthedegradationofcartilagematrix.　　Key)、鹽水組(ACLT+NS)和仙靈骨葆組(ACLT+XLGB)。鹽水組和仙靈骨葆組行右膝關(guān)節(jié)前交叉韌帶切斷術(shù)(anteriorcruciateligamenttransaction,ACLT)。造模術(shù)后，ACLT+XLGB組行每日1次仙靈骨葆(貴州同濟(jì)堂公司)灌胃125mg/(kg·d)，ACLT+NS組給予等量生理鹽水灌胃。Sham組只打開右膝關(guān)節(jié)，不行前交叉韌帶切斷術(shù),縫合膝關(guān)節(jié)。　　1.2標(biāo)本采集和處理　　三組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物于

7、6周后處死并取材。將脛骨近端固定于70%酒精，冠狀面鋸開脛骨，脫水固定，經(jīng)甲基丙烯酸甲脂包埋，作5μm切片，Giemsa染色。采用骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)方法測(cè)量軟骨下骨骨小梁。股骨遠(yuǎn)端測(cè)量骨密度，股骨髁置于4%多聚甲醛中固定，15%EDTA-2Na溶液脫鈣，石蠟包埋，作4μm連續(xù)切片。行HE染色、BMP-2和MMP-13免疫組化染色?！　?.3免疫組織化學(xué)(SABC法)　　4μm連續(xù)切片，平鋪于涂有多聚賴氨酸的載玻片上，烤片4h，脫蠟至水。3%過氧化氫沖洗10min，PBS沖洗3次×5min，復(fù)合酶37℃修復(fù)10min。滴加抗兔BMP-2和MMP-13多克