鯽源遲緩愛德華氏菌的分離鑒定及其毒力基因的檢測

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1、微生物學通報Oct.20,2017,44(10):2380?2390MicrobiologyChinahttp://journals.im.ac.cn/wswxtbcntongbao@im.ac.cnDOI:10.13344/j.microbiol.china.170044研究報告鯽源遲緩愛德華氏菌的分離鑒定及其毒力基因的檢測1111,21*程俊茗萬明月周晉揚賈丹胡鯤(1.上海海洋大學水產(chǎn)與生命學院上海201306)(2.中國水產(chǎn)科學院黃海水產(chǎn)研究所山東青島266071)摘要:【目的】探明上海某養(yǎng)殖場的異育銀鯽(Carassiusauratusgibel

2、io)發(fā)生死亡的病因,研究致病菌分類地位和毒力基因攜帶情況。【方法】通過病原菌的篩查和回感試驗,確定發(fā)病原因,對16SrRNA基因、gyrB和rpoB管家基因測序,建立病原菌系統(tǒng)進化樹,結(jié)合API-32E細菌鑒定系統(tǒng)對菌株的生理生化進行鑒定,綜合判定致病菌的種類及其分類地位;根據(jù)已報道的7個毒力基因fimA、citC、gadB、mukF、katB、esrB和sodB序列,設(shè)計引物進行PCR擴增,研究病原菌毒力基因攜帶情況?!窘Y(jié)果】致病菌GY15是導致異育銀鯽發(fā)病的原因,GY15的16SrRNA、gyrB和rpoB基因與已報道的遲緩愛德華氏菌(Edward

3、siellatarda)相似性在99%以上,構(gòu)建系統(tǒng)進化樹和API鑒定確定該菌株為E.tarda,腹腔注射回感可導致異育銀鯽死亡,5半致死濃度(LD50)為4.26×10CFU/mL;已報道的7種毒力基因在該致病菌中均能被檢測到;藥敏試驗結(jié)果顯示,該菌對恩諾沙星、氟苯尼考和氧氟沙星等15種藥物敏感,對新霉素、四環(huán)素和復方新諾明等18種藥物表現(xiàn)為耐藥?!窘Y(jié)論】首次報道E.tarda可感染異育銀鯽,它對異育銀鯽的養(yǎng)殖造成威脅。關(guān)鍵詞:異育銀鯽,遲緩愛德華氏菌,鑒定,毒力基因Foundationitem:SpecialFundforAgro-scientifi

4、cResearchinthePublicInterest(No.201203085);NationalNaturalResourcesPlatformofChina;ShanghaiOceanUniversityKnowledgeServicePlatform*Correspondingauthor:Tel:86-21-61900453;E-mail:khu@shou.edu.cnReceived:January16,2017;Accepted:May04,2017;Publishedonline(www.cnki.net):August08,2017基

5、金項目:公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項項目(No.201203085);國家水產(chǎn)種質(zhì)資源平臺項目;上海海洋大學知識服務(wù)平臺項目*通訊作者:Tel:86-21-61900453;E-mail:khu@shou.edu.cn收稿日期:2017-01-16;接受日期:2017-05-04;優(yōu)先數(shù)字出版日期(www.cnki.net):2017-08-08程俊茗等:鯽源遲緩愛德華氏菌的分離鑒定及其毒力基因的檢測2381IdentificationandvirulencegenesdetectionofEdwardsiellatardaisolatedfromCara

6、ssiusauratusgibelio1111,21*CHENGJun-MingWANMing-YueZHOUJin-YangJIADanHUKun(1.CollegeofFisheriesandLifeScience,ShanghaiOceanUniversity,Shanghai201306,China)(2.YellowSeaFisheriesResearchInstitute,ChineseAcademyofFisherySciences,Qingdao,Shandong266071,China)Abstract:[Objective]Tocon

7、firmthepathogenythatcausesCarassiusauratusgibeliodeathinsomefishfarmsinShanghai,andcharacterizethevirulencegenesofthepathogenicbacteria.[Methods]Thepathogenicbacteriawereconfirmedbasedonthepathogensscreeningandartificialchallengeexperiment,andidentifiedaccordingto16SrRNA,gyrBandr

8、poBgenessequenceandbiochemicalcharacteri

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