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《淮山藥多糖的免疫調(diào)節(jié)作用研究論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、淮山藥多糖的免疫調(diào)節(jié)作用研究論文徐增萊，汪瓊，趙猛，徐琴，賈成森，史云云【摘要】目的探討淮山藥粗多糖對小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用。方法小鼠灌胃給予不同劑量（200，400和800mg/kg）的淮山藥多糖，1次/d.freelmunologicenhancementofDioscoreaoppositaThunb.polysaccharide.MethodsDioscoreaoppositaThunb.polysaccharideindifferentdosages(200,400,800mg/kg)phcellstransf
2、ormationofConAinducingmethod(MTTmethod),hemolytictestofbloodserumandhemchromeandmousecarbontest.ResultsTheresultsshoiceLymphocytetransformationtest；HC50raisedinallthreeconcentrations;ratioofmonocyte-macrophagecarbongraineliminationhassignificantchangestothecont
3、rol.ConclusionDioscoredoppositaThunb.polysaccharidepossessesapotentialeffectofimmuneregulation.Keymunitymoderation山藥屬常用中藥，味甘、性平，具有補脾養(yǎng)胃、生津益肺、補腎澀精等作用。山藥多糖DioscoreaoppositaThunb.polysaccharide是從山藥中分離提純的水溶性多糖成分，具有免疫調(diào)節(jié)作用。以往有關(guān)山藥的藥理研究多針對河南省出產(chǎn)的鐵棍山藥和太谷山藥等懷山藥品種。而山藥在全國大部分
4、地區(qū)均有栽培，淮山藥為其在淮河中下游地區(qū)（江蘇、安徽兩省北部）傳統(tǒng)栽培品種。以食用為主，兼作藥用。對淮山藥等山藥地方品種的藥理作用至今仍缺乏研究。為了充分利用淮山藥資源，本實驗研究了江蘇產(chǎn)淮山藥粗多糖對小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用。1材料1.1樣品淮山藥DisoscoreaoppostitaThunb.淮山藥采自江蘇省灌南縣花苑鄉(xiāng)。將淮山藥削皮切片，曬干后粉碎，干燥后稱取粗粉（60目）900.0g，加入適量蒸餾水在水浴中浸提，其間不斷攪拌，靜置冷卻后離心（3000r/min，5min）除去不溶物，收集上清液，減壓濃縮。在冷卻后
5、的上清液中加入95%乙醇至醇含量在80%以上，不斷攪拌，有大量沉淀生成，離心，收集沉淀，分別用無水甲醇和乙醚洗滌，以除去水分和雜質(zhì)，得到灰白色粉末狀粗多糖38.88g(1g粉末相當于生藥23.14g)。粗多糖得率可以達到4.32%，該粗多糖中含有18.43%的山藥多糖。1.2動物和細胞ICR種小鼠18～22g，雄性，中國科學院上海克萊斯實驗動物中心，合格證號：SCXK（滬）2003-2004。豚鼠，由江寧青龍動物養(yǎng)殖場提供，動物使用許可證號：（蘇）2002-0057。所有實驗動物均食用全價顆粒飼料，自由攝食飲水。YA
6、C-1細胞，由南京中醫(yī)藥大學海洋中心藥理毒理室提供。1.3綿羊紅細胞（SRBC）與補體制備健康綿羊頸脈取血，將羊血放入有玻璃珠的滅菌錐形瓶中朝一個方向搖動，以脫纖維，用阿氏液保存于4℃冰箱保存?zhèn)溆谩Ｓ脮r生理鹽水2000r/min離心10min洗滌3遍。采集豚鼠血，分離出血清（至少5只豚鼠的混合血清），前將1ml壓積SRBC加入到5ml豚鼠血清中，放4℃冰箱30min，經(jīng)常振蕩，離心取上清，分裝小瓶，-70℃保存。用時以生理鹽水按1∶10稀釋。2方法小鼠隨機分為對照組（給予蒸餾水）及山藥多糖200，400，800mg/
7、kg［1］3個劑量組，每組10只。灌胃體積0.1ml/10g體重，1次/d，連續(xù)8d。2.1ConA誘導的小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗1640培養(yǎng)液用微孔濾膜過濾除菌，加入10%小牛血清、1%谷氨酰胺（200mg/ml）、青霉素（100mg/ml）、鏈霉素（100mg/ml）及2-巰基乙醇（5μmol/ml），用無菌HC1（1mol/L）或無菌NaOH（1mol/L）調(diào)pH至7.0～7.2，制成完全培養(yǎng)液；用7.2～7.4的PBS緩沖液作溶劑，現(xiàn)用現(xiàn)配MTT溶液（5mg/ml）；以3.5%的無菌NaHCO3將無菌Hansks
8、液pH調(diào)至7.2～7.4；用雙蒸水配制成100μg/ml的ConA液，過濾除菌后，-20℃保存；在96ml異丙醇中加入4mlHCl（1mol/L）制成酸性異丙醇溶液。各組動物連續(xù)灌胃至第8天，每鼠頸椎脫臼處死，無菌取脾，于盛有適量無菌Hanks液的小平皿中，用攝子輕輕將脾撕碎，制成單個細胞懸液，200目過濾，用Hanks液多次洗滌、離心后懸浮于
