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1、頭花蓼總黃酮提取工藝研究論文趙新超，白虹，王元書，劉愛芹，李國慶【摘要】目的探討頭花蓼總黃酮最佳提取工藝。方法采用正交實驗方法進行優(yōu)選，紫外分光光度法測定總黃酮含量。結(jié)果乙醇濃度對總黃酮的提取有顯著影響。結(jié)論結(jié)合正交實驗結(jié)果和方差分析，確定12倍量55%乙醇提取3次，1h/次為最佳工藝?！娟P(guān)鍵詞】頭花蓼；總黃酮；提取工藝；正交實驗Abstract：ObjectiveTooptimizetheconditionsfortheextractionofthetotalflavonoidsofPolygonumcapitatum.MethodsTheoptimumextractionpro
2、cessofthetotalflavonoidsent.ThecontentoftotalflavonoidsinedbyUV-spectrophotometry.ResultsSignificanteffectofalcoholconcentrationisdiscovered.ConclusionTheoptimumextractionprocessisasfollocapitatumes,onehourpertime,.freele12timesamount.Keycapitatum;Totalflavonoids;Extractionprocess;Orthogonalex
3、periment頭花蓼.freelcapitatumBuch.-Ham.exD.Don的干燥全草或地上部分，主產(chǎn)于貴州、云南、四川、西藏、廣西等省區(qū)，具有清熱利濕、解毒止痛、和血散瘀、利尿通淋等功效。頭花蓼長期以來為民間常用草藥，國內(nèi)外對其化學成分、藥理作用研究較少，經(jīng)文獻檢索，其主要成分為黃酮類化合物［1，2］，還包括苯甲醛、乙酸、沒食子酸、β-谷甾醇等［3］，具有抗菌、降溫、利尿等藥理活性，臨床上主要用于治療泌尿生殖系統(tǒng)感染和排石［4～9］。關(guān)于頭花蓼總黃酮的提取工藝研究未見文獻報道，我們以總黃酮得率為指標，通過正交實驗考察了乙醇濃度、乙醇體積、提取時間和提取次數(shù)4個對提取因素
4、的影響，確定了頭花蓼總黃酮的最佳提取工藝。1材料與儀器1.1材料與試劑頭花蓼，產(chǎn)地貴州，由本所天然藥物化學研究室鑒定為蓼科蓼屬植物頭花蓼PolygonumcapitatumBuch.-Ham.exD.Don的干燥全草，蘆丁對照品，由本所天然藥物化學研究室杜成林博士提供，實驗所用試劑均為AR。1.2儀器梅特勒萬分之一電子天平（梅特勒-托利多儀器有限公司），U-3000紫外分光光度計（日立有限公司)。2方法與結(jié)果2.1總黃酮含量測定方法2.1.1標準曲線的制備精密稱取120℃干燥至恒重的蘆丁對照品6.5mg，置25ml量瓶中，加60%乙醇適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取6.0ml
5、至25ml量瓶中，60%乙醇稀釋至刻度，得對照品溶液。精密吸取對照品溶液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml分別置10ml量瓶中，各加0.1mol/ml三氯化鋁溶液2ml，1mol/ml醋酸鉀溶液3ml，60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，放置30min，以相應的溶液作空白，在420nm處測定吸收度，以濃度對吸收度作標準曲線，得線性回歸方程為：A=33.307C+0.0004，r=0.9998，線性范圍：0.0030864～0.030864mg/ml。2.1.2供試品溶液的制備及測定稱取一定量頭花蓼原藥材，石油醚索氏提取8h，取出藥材晾干，得脫脂頭花蓼。精密稱取脫脂頭花蓼5g
6、，共9份，按正交實驗設計（見表2）回流提取，過濾，合并濾液，濃縮，用60%乙醇轉(zhuǎn)移至50ml容量瓶并稀釋至刻度，再精密量取1ml至25ml容量瓶中，用60%乙醇稀釋至刻度，濾過，作為樣品溶液。精密吸取1ml不同提取條件下的樣品溶液至10ml容量瓶中，按“2.1.1”項測定，并用回歸方程計算總黃酮含量。2.1.3回收率實驗精密吸取一定量的已知黃酮含量的頭花蓼提取液，分別加入一定量的蘆丁對照品溶液，按上述方法測定總黃酮的含量，平均回收率為98.1%（n=6），RSD為1.07%。2.2正交實驗設計以總黃酮得率為考察指標，選擇溶媒（乙醇）濃度、溶媒用量、提取時間和提取次數(shù)為考察因素，每個
7、因素取3個水平，進行L9(34)正交實驗，因素水平見表1。結(jié)果見表2。表1頭花蓼總黃酮提取因素水平（略）表2L9(34)正交實驗結(jié)果分析（略）根據(jù)以上正交分析結(jié)果可知，各考察因素的極差關(guān)系為：RA＞RD＞RB＞RC，理論最佳提取工藝為：A1B3C1D3，對于提取效率影響最小者為C項，即提取時間因素影響最小，把C作為空列，作為誤差項處理，進行方差分析。結(jié)果見表3。表3影響頭花蓼總黃酮提取因素方差分析表（略）3討論由正交實驗結(jié)果的極差分析可以直觀的看出，頭花蓼總黃酮的最佳
