慢性乙型肝炎患者e抗原-前s1抗原及hbv-dna檢測及相關(guān)性研究

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1、慢性乙型肝炎患者e抗原前S1抗原及HBV-DNA檢測及相關(guān)性研究【摘要】目的分析慢性乙型肝炎患者的e抗原、前S1抗原與HBV-DNA含量在反映乙肝病毒復(fù)制方面的相關(guān)性及臨床意義。方法對598例慢性乙肝（e抗原為陰性的小三陽）患者的血清采用ELISA方法檢測前S1抗原和乙肝五項(xiàng)指標(biāo)，聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）方法定量檢測HBV-DNA。結(jié)果598例患者血清,小三陽組Pre-S1Ag陽性率為77.1%（191/248）,HBVDNA平均含量為5.26±1.32（106copies/ml）、陽性率為70.7%（175/248），均分別高于1、4陽性組和1、5陽性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

2、（P0.05）。結(jié)論HbeAg陰性也不能排除乙肝病毒的復(fù)制，檢測HBV-DNA和Pre-S1Ag可判斷慢性乙型肝炎患者是否存在病毒復(fù)制，且兩者相關(guān)性較好，對于乙肝患者（特別是e抗原為陰性的慢性患者）在常規(guī)乙肝五項(xiàng)檢測的基礎(chǔ)上對加做Pre-S1Ag和HBV-DNA檢測有助于乙肝的臨床診療及預(yù)后判斷，有重要臨床意義?！娟P(guān)鍵詞】乙型肝炎病毒；e抗原;陰性HBV-DNA;乙肝；HBV-DNA；前S1抗原；乙肝五項(xiàng)；小三陽7我國是乙型肝炎病毒高流行地區(qū)，在乙型肝炎的診斷中,習(xí)慣用以HBeAg是否陽性來判斷乙型肝炎患者體內(nèi)乙型肝炎病毒［1］，但由于HBeAg變異株的出現(xiàn),僅僅依靠檢測乙

3、肝五項(xiàng)標(biāo)志物中的HbeAg來判斷HBV）的復(fù)制及傳染性的強(qiáng)弱顯然是不可靠的，HBV-DNA是被認(rèn)為診斷乙肝病毒是否復(fù)制和有無傳染性的“金標(biāo)準(zhǔn)”［2］，HBV前S1抗原（Pre-S1）也是近年來公認(rèn)的HBV感染、復(fù)制和乙肝患者診斷、治療和預(yù)后的一個(gè)重要標(biāo)志［3］，為此，本文觀察分析了慢性乙型患者的e抗原、前S1抗原與HBV-DNA含量在反映乙肝病毒復(fù)制方面的相關(guān)性及臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。1資料與方法1.1標(biāo)本來源598份血清標(biāo)本均來自我院內(nèi)科門診和病房e抗原為陰性的慢性乙型肝炎患者,其中男328例，年齡28～71歲，平均年齡（52.5±10.2）歲；女270例，年齡26～77

4、歲，平均年齡（56.5±12.5）歲。所選患者均有肝病史5年以上，符合慢性肝病的診斷標(biāo)準(zhǔn)。1.2儀器與試劑乙肝五項(xiàng)檢測試劑盒有上?？迫A生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，Pre-S1Ag試劑盒由上海阿爾法生物技術(shù)有限公司提供，兩種試劑酶標(biāo)儀器均為芬蘭MultiskanMK3酶標(biāo)檢測儀；HBV-DNA檢測儀器為SLAN熒光定量PCR儀，試驗(yàn)盒由上海申友生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供。所用試劑盒均通過衛(wèi)生部批檢，并貼有防偽標(biāo)簽，均在有效期內(nèi)，加樣所用移液器均為上海求精生化試劑儀器有限公司生產(chǎn)，均經(jīng)過市計(jì)量局校正。71.3方法1.3.1檢測方法早晨抽取患者空腹靜脈血3～5ml加入無抗凝劑的干燥試管或

5、含促凝分離膠真空管，放置37℃水浴箱，待凝固后離心分離血清，1～2h內(nèi)開始檢測。血清乙肝五項(xiàng)和前S1抗原檢測應(yīng)用ELISA方法，HBV-DNA采用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）方法定量檢測，上述檢測均嚴(yán)格按照試劑盒和儀器操作說明書進(jìn)行加樣、洗板以及比色，乙肝五項(xiàng)和前S1抗原按酶標(biāo)儀結(jié)果判讀陰陽性，HBV-DNA以大于106copies/ml為陽性。1.3.2分組分析按照乙肝五項(xiàng)常見模式分組，將e抗原為陰性的慢性乙型肝炎患者分為3組：小三陽組248例（“HBsAg+，抗-HBe+，抗-HBc+”），1、4陽性組（HBsAg+、抗-HBe+組）220例；1、5陽性組（HBsAg+、抗-

6、HBc+組）130例，將以上3組血清Pre-S1、HBV-DNA陽性率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)并比較分析。1.3.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對檢測結(jié)果進(jìn)行分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，計(jì)數(shù)資料采用χ2>/sup>檢驗(yàn)，P0.05），結(jié)果見表1。表1慢性乙肝Pre-S1陽性率、HBV-DNA平均含量、陽性率的比較3討論7乙型肝炎病毒（HBV）附著于肝細(xì)胞上，最重要的介導(dǎo)部位是前S1蛋白的氨基酸（AA）21-47片段，變異的病毒只要在這一區(qū)段完好就有傳染性，因此，前S1蛋白（抗原）在病毒侵入肝細(xì)胞過程中起重要作用，近年來越來越多的研究［4～5］表明，前S1抗原作

7、為HBV血清學(xué)新的標(biāo)志物能夠充分反應(yīng)機(jī)體的體液免疫狀況,對乙肝病毒感染的早期診斷和判斷預(yù)后顯現(xiàn)出了較高的臨床應(yīng)用價(jià)值，HBV-DNA檢測是判斷病毒復(fù)制活躍和具有傳染性的直接可靠依據(jù)，能夠直接檢測患者血清中病毒的拷貝數(shù)量，從而反映患者機(jī)體內(nèi)病毒血癥的水平。本文檢測結(jié)果和分組統(tǒng)計(jì)顯示，無論是小三陽組還是其他兩組，Pre-S1Ag的陽性率和HBVDNA陽性率有很好的正相關(guān)性，也進(jìn)一步表明Pre-S1Ag是判斷病毒復(fù)制活躍和具有傳染性的一項(xiàng)重要指標(biāo)。乙肝五項(xiàng)指標(biāo)做為乙肝病毒血清標(biāo)志物在臨床應(yīng)用已經(jīng)有二十多年，其臨床意義已經(jīng)