資源描述：
《月見草花提取物對免疫抑制小鼠細胞免疫功能的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、月見草花提取物對免疫抑制小鼠細胞免疫功能的影響：鄧麗，王琦，趙建寧，王寧萍，周婭【摘要】目的探討月見草花兩種提取物對免疫抑制小鼠細胞免疫功能的影響。方法小鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺(Cyclophosphamide，Cy)50mg/kg建立免疫抑制模型，然后將月見草花兩種提取物分別以高、中、低三個劑量(低劑量437.5mg/kg、中劑量875mg/kg和高劑量1750mg/kg)每天1次灌胃，觀察對小鼠脾臟T淋巴細胞增殖能力、腫瘤壞死因子-α(TumorNecrosisFactorα，TNF-α)和干擾素-γ(Interferonγ，IFN-
2、γ)分泌水平的影響。結果月見草花的兩種中劑量提取物均可增加免疫抑制小鼠脾臟T淋巴細胞刀豆蛋白A(concanavalinA，ConA)刺激指數(shù)(SI值P<0.05)，促進免疫抑制小鼠細胞因子TNF-α的分泌(P<0.05)，中劑量的月見草花乙酸乙酯提取物還可以增加細胞因子IFN-γ的分泌水平(P<0.05);月見草花乙酸乙酯提取物對免疫抑制小鼠細胞免疫功能的促進作用顯著強于水提取物(P<0.05)。結論月見草花乙酸乙酯提取物和水提取物均可明顯增強環(huán)磷酰胺免疫抑制小鼠的細胞免疫功能，其中乙酸乙酯提取物的作用優(yōu)于水
3、提取物。【關鍵詞】月見草花;小鼠;細胞免疫月見草(OenotherabiennisL)，又名夜來香，為柳葉菜科月見草屬植物。我國自1936年引種后，在黑龍江、吉林、遼寧、江蘇、江西和寧夏等分布廣泛，做為油藥植物大面積栽培[1]。月見草的食藥兩用性以及美容效果在國際中已有廣泛共識，現(xiàn)代醫(yī)學證明，月見草有卓越的抗炎，抗氧化，抗血栓，降血脂，抗腫瘤，保護神經(jīng)細胞[2]，緩解經(jīng)前癥候群[3]，減肥及抗衰老等作用[4]。本文旨在觀察月見草花兩種提取物對環(huán)磷酰胺免疫抑制小鼠細胞免疫的影響?！ ?材料與方法 1.1材料 1.1.1實驗動物ICR
4、小鼠，8周齡，體重18～22g，雌雄各半，由寧夏醫(yī)科大學實驗動物中心提供?！ ?.1.2實驗試劑和儀器月見草花為寧夏產(chǎn)月見草的干花(購于寧夏榮康月見草種植基地)，乙酸乙酯(Ethylacetate，EAc)提取物是經(jīng)乙醇提取后再用乙酸乙酯提取的浸膏，每克浸膏生藥含量為148g;水提取物采用煎煮法制備浸膏，每克浸膏生藥含量為23g。環(huán)磷酰胺(Cyclophosphamide，Cy)為江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司產(chǎn)品。綿羊紅細胞、豚鼠血清(寧夏醫(yī)科大學實驗動物中心提供)，小鼠TNF-α、IFN-γ檢測試劑盒(武漢博士德生物工程有限公司提供)，
5、ConA、MTT、RPMI-1640培養(yǎng)基(Sigma公司產(chǎn)品)。 1.2方法 1.2.1實驗動物分組及給藥方法ICR小鼠80只，隨機分為8組，每組10只，雌雄各半。第1組為正常對照組：每日用生理鹽水20mL/kg灌胃1次，共8d;第2組為模型組：每日用生理鹽水灌胃1次，于第5天腹腔注射Cy50mg/kg;第3、4、5組為月見草花乙酸乙酯提取物組：分別按低劑量437.5mg/kg、中劑量875mg/kg和高劑量1750mg/kg每天灌胃1次，持續(xù)8d，并于第5天腹腔注射Cy50mg/kg;第6、7、8組為月見草花水提取物組：分別按
6、低劑量437.5mg/kg、中劑量875mg/kg和高劑量1750mg/kg每天灌胃1次，持續(xù)8d，并于第5天腹腔注射Cy50mg/kg。第9天測定各項免疫學指標。 1.2.2脾臟T淋巴細胞增殖能力的測定[5]無菌取脾，置于盛有Hank's液的平皿中研磨過濾，除去結締組織、裂解紅細胞，經(jīng)培養(yǎng)液重懸后進行計數(shù)。將脾細胞濃度配成5×106/mL，加有絲分裂原ConA于96孔培養(yǎng)板進行培養(yǎng)，同時設不加ConA的對照孔，孵育68h。每孔加入10μLMTT作用4h，加細胞裂解液，在490nm波長處用酶標儀測定光密度OD值。增殖反應以ConA刺
7、激指數(shù)SI表示，按下式計算：SI=實驗組平均OD值/對照組平均OD值。 1.2.3細胞因子的分泌水平測定小鼠眼眶放血于Eppendorf管，將所取的小鼠血液于室溫靜置一段時間，分離血清后離心，-20℃保存待測。小鼠TNF-α、IFN-γ的檢測按照試劑盒的說明進行操作，通過測定450nm波長處的OD值經(jīng)標準濃度曲線計算出細胞因子濃度。 1.3統(tǒng)計學方法 采用SPSS12.0軟件，實驗數(shù)據(jù)以(±s)表示，采用單因素方差分析進行組間差異的比較?！ ?結果 2.1小鼠免疫抑制模型制備 與正常對照組比較，模型組小鼠脾淋巴細胞ConA刺
8、激指數(shù)SI值和細胞因子TNF-α、IFN-γ的分泌水平均明顯降低(P<0.05)，表明小鼠免疫抑制模型制備成功，見表1?！ ?.2月見草花提取物對免疫抑制小鼠脾淋巴細胞增殖能力的影響 與模型組比較，月見草花乙酸乙
