黑大蒜提取物對小鼠細胞免疫功能的影響

黑大蒜提取物對小鼠細胞免疫功能的影響

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1、一、摘要中文論著摘要???????”英文論著摘要???????·二、英文縮略語????????三、論文前言???????????????材料與方法???????????????????????????·10實驗結(jié)果????????????????????????????15討論????????????????????????????????????????18結(jié)論????????????????????????????????????????19四、本研究創(chuàng)新性的自我評價?????????????????????21五、參考文獻?

2、???????????????????????????22六、附錄綜述????????????????????????????????????????23在校期間科研成績????????????????????????·37致謝????????????????????????????????????????38個人簡介????????????????????????????·39其它的一些生理功能紊亂,人們在實驗中還發(fā)現(xiàn)其具有降血脂、降血壓、降血糖、抗腫瘤、抗菌、抗氧化和免疫調(diào)節(jié)等功效。大蒜來源的有機硫化合物對一些人類腫瘤,如前列

3、腺癌,胸腺癌,結(jié)腸癌,肺癌,膀胱癌等有很好的抑制作用。大蒜的化學(xué)組成十分復(fù)雜,其中有生物活性的成分超過100種。其中最重要和最獨特的是有機硫化合物的含量非常高,是其他含有高硫的蔬菜如洋蔥、椰菜的4倍多。近年來日本學(xué)者發(fā)現(xiàn)在控制濕度和溫度的情況下,普通的白大蒜可以經(jīng)過處理轉(zhuǎn)化為黑大蒜。黑大蒜去除了大蒜的異味,帶有甜味,口感好,無需再經(jīng)處理即可直接食用。已有研究報道黑大蒜較白大蒜含有更多的氨基酸、有機硫和S.烯丙基.L.半胱氨酸,因此與白大蒜相比,更具有應(yīng)用前景。然而目前有關(guān)黑大蒜對機體免疫功能影響國內(nèi)外尚未見報道。為此,本實驗應(yīng)用自

4、制的黑大蒜提取物溶液,腹腔注射給小鼠,觀察了黑大蒜提取物作為免疫調(diào)節(jié)劑的作用,為黑大蒜的實際應(yīng)用進一步提供理論和實驗依據(jù)。實驗材料一、主要試劑黑大蒜提取物(干粉,由日本弘前大學(xué)佐佐木甚一教授惠贈),RPMI1640培養(yǎng)基,小牛血清,O.0lMPBS緩沖液,紅細胞裂解液,LDH底物液,Griess試劑,IL.2、玎附吖、IL.4、TNF.a(chǎn)ELISA試劑盒。二、實驗動物BALB/e小鼠,6.8周齡,SPF級,購自中科院上海實驗動物中心。黑大蒜提射后的1—7天,從第1組開始,每天處死一組小鼠,第8組小鼠于第7天處死。二、樣品的采集與檢

5、測1、脾細胞分離及其懸液的制備頸椎脫位處死小鼠,常規(guī)制備脾細胞懸液,調(diào)整細胞濃度至1x107/ml。2、ELISA法檢測脾細胞培養(yǎng)上清中Thl細胞因子IL.2、TNF.0【、IFN-),以及Th2細胞因子IL.4的水平3、LDH釋放法檢測NK細胞的殺傷活性4、Griess法檢測脾細胞培養(yǎng)上清中NO水平5、RT.PCR半定量技術(shù)檢測脾細胞FasLmRNA的表達水平三、統(tǒng)計學(xué)處理實驗數(shù)據(jù)經(jīng)SPSSl6.0統(tǒng)計分析軟件應(yīng)用t檢驗進行統(tǒng)計處理,P<0.05有顯著性差異。結(jié)果1、NK細胞殺傷活性的檢測結(jié)果在連續(xù)5天給予BALB/c小鼠注射黑

6、大蒜提取物后,比較實驗組和對照組小鼠的NK細胞殺傷活性,結(jié)果表明:與對照組(5.824-1.38%)相比,黑大蒜提取物處理4-6天后,實驗組小鼠的NK細胞殺傷活性顯著性升高,并在第5天達到峰值(11.214-1.17%),隨后下降。2、脾細胞培養(yǎng)上清中細胞因子水平的檢測結(jié)果本實驗中我們檢測了Thl型細胞因子IL.2、IFN-7和TNF.僅和Th2細胞因子IL-4的分泌水平。我們發(fā)現(xiàn)在給予小鼠連續(xù)注射5天黑大蒜提取物后,IL.2的分2從黑大蒜提取物處理后的第3天到第7天,實驗組小鼠N02。始終處于較高的水平,與對照組相比(11.58

7、+0.86州),均具有顯著性差異(尸<0.001)。4、脾細胞FasLmRNA表達水平的檢測結(jié)果通過半定量RT.PCR技術(shù)檢測了小鼠脾細胞FasLmRNA的表達水平。處理結(jié)束后的第l天至第7天,各天脾細胞FasLmRNA的表達水平與對照組相比均未見顯著性差異(尸>0.05)。結(jié)論1、黑大蒜提取物可以增強NK細胞的殺傷活性。2、FasLmRNA的表達水平并未增高,提示黑大蒜提取物未誘導(dǎo)殺傷細胞通1過Fas/FasL途徑發(fā)揮效應(yīng)。3、黑大蒜提取物可使脾細胞NO的分泌水平明顯增高,提示黑大蒜提取物可能有增強固有免疫細胞巨噬細胞活性的作用

8、。4、黑大蒜提取物能增強IL.2、IFN-q,、耵盯.僅的產(chǎn)生水平,提示黑大蒜提取物能夠促進Thl型免疫應(yīng)答。關(guān)鍵詞黑大蒜;FasLNK細胞;Thl/Th2細胞因子;NO3泌的在組3(照但pressureandbloodsugar,anti-can

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