用甲酸水解制備重組牛乳鐵蛋白肽lfcinb(17-41)

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1、用甲酸水解制備重組牛乳鐵蛋白肽LfcinB(17-41)動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展.201l,32(4):28—31ProgressinVeterinaryMedicine用甲酸水解制備重組牛乳鐵蛋白肽LfcinB(17—41)沈克飛,王孝友,曹蘭,(1.重慶市畜牧科學(xué)院,重慶402460;2.袁樹(shù)楷,陳靜,彭帥.,張素輝,易強(qiáng)西南大學(xué),重慶402460;3吉林農(nóng)業(yè)大學(xué),吉林長(zhǎng)春t30118)摘要:lLt據(jù)大腸埃希菌密碼子偏嗜性合成了LfeinB(17—41)的基因序列,將該序列亞克隆到pGEX-4T-1載體中,在大腸埃希茵B(yǎng)L21茵株中用IPT

2、G誘導(dǎo)表達(dá).LfcinB與GST融合,兩者之間加入了甲酸裂解位點(diǎn).BL21在3O℃下培養(yǎng)融合蛋白GST-LfcinB可溶性表達(dá)較好.純化的GST—LfcinB用甲酸水解釋放P-LfcinB.抑茵試驗(yàn)顯示P-LfeinB對(duì)兔源致病性大腸埃希菌有抗菌活性.關(guān)鍵詞:牛乳鐵蛋白肽;融合蛋白;甲酸;水解位點(diǎn)中圖分類(lèi)號(hào):Q786文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A牛乳鐵蛋白肽(Bovinelactoferricin,LfeinB)是牛乳鐵蛋白(Laetoferrin)經(jīng)胃蛋白酶消化產(chǎn)生的具有廣譜抗微生物活性的多肽引,完整的LfcinB具文章編號(hào):1007—5O38(

3、20l1)O4—0028-04有25個(gè)氨基酸殘基,其作用機(jī)制主要是通過(guò)與細(xì)菌細(xì)胞膜相互作用增加其通透性.收稿日期:2010-10-18基金項(xiàng)目:重慶市畜牧科學(xué)院基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)基礎(chǔ)研究項(xiàng)目(09613;10615)作者簡(jiǎn)介:沈克飛(198O一),男,安徽六安人,碩士,主要從事動(dòng)物傳染病防治工作.1'13]1-143[153myxovirusresistancegenewithdifferentaminoacidsatposi—tion631[J].PoultSci,2010,89:2259—2264.張桂紅,白志忠,張子群,等.雞干擾

4、素生產(chǎn)條件的比較研究[刀.畜禽業(yè),2000(4):18—20.StaeheliP,GrobR,MeierE,eta1.Influenzavirus-suscepti—blemicecarryMxgenewithalargedeletionoranonsensemutation[J].MolCellBiol,1988,8:4518.TumpeyTM,SzretterKJ,HoevenNV,eta1.TheMxlgeneprotectsmiceagainstthepandemic1918andhighlyle一[1631'17]thai

5、humanH5N1influenzaviruses[J].JVirol,2007,81(19):10818—10821.SalomonR,StaeheliP,KochsG,eta1.MxlgeneprotectsmiceagainstthehighlylethalhumanH5N1influenzavirus[盯.CellCycle,2007,6(19):2417—2421.KingMC,RaposoG,LemmonMA.Inhibitionofnuclearimportandcellcycleprogressionbymutate

6、dformsofthedy-namin-likeGTPaseMxB[J].ProcNatlAcadSciUSA,2004,101:8957—8962.CloningandTissueExpression0fMx1GeneinICRMouseXIAoZhi-guang,LIUXiao—min,WANGLi,LIWei,WANGWei,HUWei—jie,WANGJian-chao,MENGQing-wen(NationalKeyLaboratoryofVeterinaryBiotechnology/HarbinVeterinaryRe

7、searchInstitute,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Harbin,HeilongJiang,150001,China)Abstract:ThisstudywascarriedouttoobtainandanalyzesequenceofICRmouseMxlgene,andtoinves—tigatethegeneexpressionpatternsofmultipletissues.Full—lengthsequenceofICRmouseMxlgenewasamplified

8、byRT—PCRfromthetotalRNAextractedfrommouseperitonealmaerophagesinducedbypoly(I)/(C)anditsexpressionindifferenttissuesw

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