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1、北京雷根生物技術(shù)有限公司過碘酸雪夫AB-PAS染色試劑盒產(chǎn)品簡介:糖原染色是病理學中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年最先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色液不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)。阿爾辛藍和PAS技術(shù)聯(lián)合使用可鑒別同一組織切片中的中性黏蛋白和酸性黏蛋白。這種技術(shù)也常用作廣泛檢測黏蛋白的手段。該技術(shù)染色陰性,可明確斷定該物質(zhì)不是黏蛋白。在大多數(shù)方法中,切片先經(jīng)標準的阿爾辛藍(pH值為2.5)染色,再使用PAS技術(shù)。阿爾辛藍可將唾液黏蛋白、硫黏蛋白和蛋白多糖染成藍色。PAS技術(shù)可將中性黏蛋
2、白染成深紅/紅紫色,同時將既含中性黏蛋白又含酸性黏蛋白的組織和細胞染成深淺不同的紫色,這是由于阿爾辛藍與Schiff試劑結(jié)合并反應(yīng)。上述染色??沙霈F(xiàn)在含有中性黏蛋白和唾液黏蛋白的小腸杯狀細胞中。阿爾辛藍是類銅鈦花青染料,這種陽離子染料與酸性基團結(jié)合,也即阿爾辛藍與組織內(nèi)含有的陰離子基團如羧基和硫酸根形成不溶性復合物。分子中帶正電荷的鹽鍵與酸性黏多糖物質(zhì)中帶負電荷的酸性基團結(jié)合形成不溶性的復合物而呈藍色,再與PAS進行復合染色,就能顯示三種不同黏液物質(zhì)成分。產(chǎn)品組成:編號DG0007DG0007Storage名稱6×50ml6×100ml試劑(A):阿利新藍溶液50
3、ml100ml4℃避光試劑(B):過碘酸溶液50ml100ml4℃避光試劑(C):SchiffReagent50ml100ml4℃避光試劑(D):LillieMayer蘇木素染色液50ml100mlRT避光試劑(E):酸性乙醇分化液50ml100mlRT試劑(G):氨水溶液50ml100mlRT使用說明書1份主要成分:試劑(A):主要有阿利新藍、弱酸等組成。試劑(B):主要由過碘酸組成。試劑(C):主要由堿性品紅、偏重亞硫酸鈉等組成。試劑(D):主要由蘇木素、乙醇等組成。試劑(E):主要由酸、乙醇等組成。北京雷根生物技術(shù)有限公司試劑(F):主要由氨水、蒸餾水組成。
4、自備材料:1、蒸餾水或去離子水2、95%乙醇3、無水乙醇4、染色缸操作步驟(僅供參考):1、脫蠟至水洗。2、蒸餾水洗2min。3、用阿利新藍溶液染色10~20min。4、蒸餾水洗3次,每次1~2min。5、放人過碘酸溶液中進行氧化5min。6、用LeageneSchiffReagent浸染10~20min。7、傾去SchiffReagent,流水沖洗10min。8、用LillieMayer蘇木素染色液染核1~2min。9、用酸性乙醇分化液分化。10、水洗。11、用氨水溶液進行返藍。12、水洗3min。13、逐級常規(guī)乙醇脫水。14、二甲苯透明。15、中性樹膠封固。染
5、色結(jié)果:糖原、中性黏蛋白、各種糖蛋白紅紫色酸性黏蛋白(硫黏蛋白和唾液黏蛋白)藍色蛋白多糖和透明質(zhì)酸藍色備注:含有中性黏蛋白和酸性黏蛋白的細胞或組織可染成不同程度的藍紫色至紫色。北京雷根生物技術(shù)有限公司注意事項:1、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈,否則影響染色效果。2、過碘酸氧化時間不宜過久,氧化時的溫度以18-22℃最佳。3、試劑(A)、試劑(B)、試劑(C)應(yīng)置于4℃密閉保存,使用時避免接觸過多的陽光和空氣。使用前,最好提前30min取出恢復到在室溫后,避光暗處使用。4、酸性乙醇分化液應(yīng)經(jīng)常更換新液,其分化時間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織的類別和酸性乙醇分化液的新舊而定,另外分化
6、后自來水沖洗時間應(yīng)該足夠。5、切片在過碘酸和SchiffReagent中作用時間非常重要,該依據(jù)切片厚薄、組織的類別等決定。6、如復染核,細胞核一定要淡染,以免影響陽性物質(zhì)觀察,如AB-PAS合染最好不復染細胞核,因為會影響AB的觀察。7、研究表明,阿爾辛藍-PAS聯(lián)合技術(shù)的染色順序可影響最終結(jié)果。PAS技術(shù)在阿爾辛藍染色之前時,中性黏蛋白和糖原可染成紫色。與此相反,阿爾辛藍染色在PAS技術(shù)之前時,則可將這些物質(zhì)染成預(yù)期的紅紫色。PAS染色后,中性碳水化合物獲得親阿爾辛藍能力的原因不明。然而,有人認為過碘酸氧化后形成的醛基可能與Schiff試劑中的亞硫酸鹽反應(yīng)形成
7、一個陰離子,再與隨后的阿爾辛藍結(jié)合。8、蘇木素淡染非常重要,目的是防止胞漿或黏蛋白著色而掩蓋阿爾辛藍的顏色。9、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。有效期:6個月有效。相關(guān)產(chǎn)品:產(chǎn)品編號產(chǎn)品名稱DA0082巴氏染色試劑盒(PapanicolaouEA50)DC0032Masson三色染色試劑盒DG0004Schiff試劑(雪夫/希夫試劑)北京雷根生物技術(shù)有限公司DE0001堿性磷酸酶染色試劑盒(ALP/AKP,改良Gomori鈣鈷法)DG0005糖原PAS過碘酸雪夫染色試劑盒DG0009糖原PAS染色試劑盒(淀粉酶消化法)DG0022淀粉樣物質(zhì)染色試
8、劑盒(Hi