溪黃草多糖含量測定與活性研究論文

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1、溪黃草多糖含量測定與活性研究論文【摘要】目的研究溪黃草多糖含量及其對羥自由基的清除作用和抑菌作用。方法從溪黃草中提取精制多糖，測定出溪黃草多糖對葡萄糖的換算因子，用蒽酮硫酸法比色測定計(jì)算多糖的含量；采用Fenton反應(yīng)體系為模型，研究多糖對羥自由基的抑制作用；采用濾紙片法研究多糖的體外抑菌作用。結(jié)果溪黃草多糖含量為4.18%，重現(xiàn)性、穩(wěn)定性和回收率較好；活性測試結(jié)果表明溪黃草多糖對羥自由基有較好的清除作用，對金黃色葡萄球菌和枯草桿菌有一定的抑菌效果。結(jié)論溪黃草多糖含量測定方法簡單可行，具有一定清除自由基和抑菌活性。【關(guān)鍵詞】溪黃草；多糖；含量測定；羥自

2、由基；抑菌作用Abstract：ObjectiveTostudythecontentofpolysaccharidefromRabdosiaserra(Maxim.)Haraanditseffectonhydroxylfreeradicalandantibacteriostaticeffect.MethodsPolysaccharideRabdosiaserra(Maxim.)Hara,anditscontenteasuredbyasamodel.Itsantibacteriostaticeffect.)Harareached4.18%.Ithadi

3、nhibitoryeffectonhydroxylfreeradical，staphylococcusaureusandB.subtili.ConclusionThemethodofmeasuringpolysaccharidecontentissimpleandreliable.Thepolysaccharidehassomeactivities.Key.)Hara；Polysaccharide；Contentdetermination;Hydroxylfreeradical；Antibacteriostaticeffect溪黃草Rabdosiase

4、rra(Maxim.)Hara為唇形科香茶菜屬植物.freell，回流脫脂。濾渣揮干溶劑后，加入80%乙醇回流提取2次（1.5h/次）。將濾渣揮干溶劑后加蒸餾水400ml，回流提取1h。取濾液，濾渣再加蒸餾水300ml提1次，將兩次所得濾液合并，減壓濃縮至一定體積。加入氯仿正丁醇液（4∶1）輕搖，靜置取多次，除去蛋白質(zhì)。水溶液中加入適量活性碳60℃保溫30min，過濾，濾液冷卻后加入乙醇，使乙醇濃度達(dá)85%，放置4℃冰箱中過夜。抽濾，沉淀依次用95%乙醇、丙醇、乙醚各洗3次，真空干燥至恒重，即得精制溪黃草多糖，密封保存?zhèn)溆谩?.2樣品中溪黃草多糖含量測

5、定2.2.1標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制精密稱取105℃干燥至恒重的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品0.2000g，置100ml容量瓶中，加蒸餾水溶解并稀釋至刻度；搖勻，制成2.000mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后分別移取0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ml標(biāo)準(zhǔn)溶液。置于10ml容量瓶中，以蒸餾水定容至刻度，搖勻、配成系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。2.2.2蒽酮硫酸試液的配制稱取0.2000g蒽酮和1.000g硫脲，加入100ml濃硫酸，置于棕色瓶中，混合搖勻至暗處備用（現(xiàn)配現(xiàn)用）。2.2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制分別準(zhǔn)確移取系列標(biāo)準(zhǔn)溶液1ml于具塞試管中（各平行3份），以1ml蒸餾水作空白，各加入5ml蒽

6、酮試劑（立即搖勻，置冰水浴中），加完后一起沸水浴8min，取出流水冷卻，室溫靜置10min，于620nm處測定吸光值，以吸光值（A）對葡萄糖濃度（C）作回歸處理，得回歸方程：A=3.359C－0.01119，r=0.9998。2.2.4換算因子的測定精密稱取2.1項(xiàng)下所得精制多糖10mg，置100ml容量瓶中，加蒸餾水溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密吸取此液1.0ml置10ml容量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度搖勻作貯備液。精密吸取貯備液2.0ml，用標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)的方法測吸光值，從回歸方程中求出多糖供試液中葡萄糖濃度，按下式計(jì)算，測得換算因子F＝5.364。換算因子

7、F=g），c為多糖稀釋液中葡萄糖濃度mg/ml，d為多糖的稀釋因素］2.2.5樣品溶液的制備精密稱取溪黃草粉末0.5g（過60目篩、平行3份）置三角瓶中，加80%乙醇30ml，回流提取1h，趁熱過濾，殘?jiān)脽嵋掖枷礈欤?ml×3次）。殘?jiān)B同濾紙置三角瓶中，加入40ml蒸餾水回流提取1h，趁熱過濾，殘?jiān)脽崴礈欤?ml×3次），洗液并入濾液中，置冷后定容于100ml容量瓶中，搖勻備用。2.2.6樣品中溪黃草多糖含量測定精密吸取樣品溶液2.0ml同2.2.3項(xiàng)方法操作，測定供試液中葡萄糖含量。按下式計(jì)算樣品中多糖的含量：多糖含量（%）＝C.D.F/g/m

8、l），D為供試液的稀釋因素，F(xiàn)為換算因子，g）］。其結(jié)果見表1。表1溪黃草中多糖