海洋酵母菌發(fā)酵產(chǎn)鐵載體的研究

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1、海洋酵母菌發(fā)酵產(chǎn)鐵載體的研究分類號(hào)—————————————————————————————————密級(jí)UDC本科畢業(yè)論文海洋酵母菌發(fā)酵產(chǎn)鐵載體的研究學(xué)生姓名畢海洋學(xué)號(hào)040012008003指導(dǎo)教師池振明教授院、系、中心海洋生命學(xué)院專業(yè)年級(jí)2008級(jí)生命基地班論文答辯日期2012年6月8日中國海洋大學(xué)20海洋酵母菌發(fā)酵產(chǎn)鐵載體的研究海洋酵母菌發(fā)酵產(chǎn)鐵載體的研究完成日期：2012年6月6日指導(dǎo)教師簽字：答辯小組成員簽字：20海洋酵母菌發(fā)酵產(chǎn)鐵載體的研究海洋酵母菌發(fā)酵產(chǎn)鐵載體的研究摘要鐵載體在人類疾病的治療、魚病的控制及環(huán)境修復(fù)等方面

2、有著巨大的應(yīng)用前景。本次實(shí)驗(yàn)使用已知的高產(chǎn)鐵載體的海洋普魯蘭類酵母HN6.2及其改造菌株菌株。將這兩個(gè)菌株采用一系列不同的常用培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，測(cè)量其在不同培養(yǎng)基中鐵載體的產(chǎn)量。然后選取鐵載體產(chǎn)量最高的培養(yǎng)基在2L發(fā)酵罐中進(jìn)行擴(kuò)大化培養(yǎng)。通過間隔連續(xù)取樣，對(duì)菌株的生長情況、還原糖含量和鐵載體產(chǎn)量進(jìn)行檢測(cè)，從而獲得最佳的培養(yǎng)時(shí)間，從而為以后的實(shí)驗(yàn)提供參考。最終得到的最佳培養(yǎng)基為加入了鳥苷酸的產(chǎn)鐵載體培養(yǎng)基，最佳的培養(yǎng)時(shí)間為108h,鐵載體產(chǎn)量可達(dá)0.511g/L.關(guān)鍵詞：普魯蘭酵母、鐵載體、培養(yǎng)基、擴(kuò)大化培養(yǎng)、培養(yǎng)時(shí)間20海洋酵母菌發(fā)酵

3、產(chǎn)鐵載體的研究ThestudiesonsiderophoreproductionbythemarineyeastAbstractSiderophorehasagreatprospectforthetreatmentofhumandisease,fishdiseasecontrolandenvironmentalrestoration.High-yieldsiderophorestrainAureobasidiumpullulansHN6.2andItsstrainofgeneknock-outareusedinthisexperim

4、ent.Thesetwostrainsareculturedwitharangeofdifferentcommonlyusedculturemedia.Measuringtheproductionofsiderophoreinthesemedia,thenselectthemediumwhoseproductionofSiderophoreisthehighestforenlargecultureina2Lfermenter.Bysamplingevery12hours,thegrowthofthestrains,reducings

5、ugarcontentandsiderophoreproductionweredetected,Thenthebestculturetimecanbegotwhichcanprovideareferenceforfurtherexperiments.Keywords:AureobasidiumpullulansHN6.2,siderophore,medium,enlargeculture,Incubationtime20海洋酵母菌發(fā)酵產(chǎn)鐵載體的研究目錄1前言11.1鐵載體的定義11.3真菌鐵載體的生物合成31.4鐵載體的檢測(cè)51.4

6、.1化學(xué)法51.4.2生物法61.5鐵載體的應(yīng)用72不同培養(yǎng)基中海洋普魯蘭類酵母（Aureobasidiumpullulans）HN6.2的鐵載體產(chǎn)量72.1實(shí)驗(yàn)材料與試劑82.1.1菌種82.1.2試劑82.1.3培養(yǎng)基82.2培養(yǎng)條件82.2.1平板培養(yǎng)82.2.2液體培養(yǎng)82.3鐵載體濃度測(cè)量（Csaky試驗(yàn)法）92.4實(shí)驗(yàn)過程92.5實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論93菌株的擴(kuò)大化培養(yǎng)133.1實(shí)驗(yàn)材料與試劑133.1.1菌株133.1.2試劑133.1.3培養(yǎng)基143.2培養(yǎng)條件143.2.1平板培養(yǎng)143.2.2液體培養(yǎng)143.3鐵載體濃

7、度測(cè)量（Csaky試驗(yàn)法）143.4蛋白濃度測(cè)量（考馬斯亮藍(lán)染色法）143.4.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制153.4.2蛋白濃度測(cè)量153.5還原糖濃度測(cè)量（Somogyi-Nelson比色法）153.5.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制153.5.2還原糖濃度測(cè)量153.6實(shí)驗(yàn)過程153.7實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論1620海洋酵母菌發(fā)酵產(chǎn)鐵載體的研究參考文獻(xiàn)16致謝1620海洋酵母菌發(fā)酵產(chǎn)鐵載體的研究1前言幾乎對(duì)于所有的生物來說，鐵都是一種必需的元素。作為一種過渡元素，鐵可以再氧化與還原態(tài)之間進(jìn)行可逆的轉(zhuǎn)換。因此在許多不同的輔助因子當(dāng)中都含有鐵元素，比如血紅素基和鐵

8、硫簇。這使得鐵元素在包括脫氧核糖核酸合成，氧化磷酸化和電子運(yùn)輸在內(nèi)的很多關(guān)鍵的代謝過程中都是不可或缺的。同時(shí)，鐵元素也可以促進(jìn)有害生物分子氧化。因此，通過控制鐵元素的吸收和胞內(nèi)儲(chǔ)存，生物體體液內(nèi)的鐵元素濃度被牢牢的控制著。鐵在地殼中的