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《保護劑在豬精液冷凍保存中的應(yīng)用》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、保護劑在豬精液冷凍保存中的應(yīng)用李益得基金項目：湘中丘陵區(qū)生豬產(chǎn)業(yè)區(qū)域試驗站和婁底職業(yè)技術(shù)學院科研課題（2011ZK007）資助。*作者：李益得（1985～），男，講師，碩士；主要從事野生動物保護及特種經(jīng)濟動物養(yǎng)殖；E-mail：liyide198523@163.com李繼仁（婁底職業(yè)技術(shù)學院湖南婁底417000）摘要：為了延長豬精液冷凍保存的時間，提高豬人工授精的受精率，本文綜述了豬精液冷凍保存技術(shù)的發(fā)展簡史，簡要闡述了保護劑的作用機理，并著重介紹了常用的保護劑及其應(yīng)用，以期為豬精液冷凍保存技術(shù)的后續(xù)研究提供參考。關(guān)鍵詞：豬；精液；冷凍保存；保護劑Applica
2、tionofprotectiveagentinthecryopreservationofpigsemenLIYi-de*，LIJi-renLoudiVocationalandTechnicalCollege，Loudi,Hunan417000Abstract：Inordertoextendthetimeofcryopreservationofpigsemenandraisethefertilizationofpigartificialinseminationrate.Thepaperreviewedabriefhistoryofpigsemencryoprese
3、rvationtechniquesanddescribedbrieflythemechanismoftheprotectiveagent,andfocusesoncommonlyprotectiveagentanditsapplicationinordertoprovidereferenceforfurtherstudy.Keywords:Pig;Semen;Cryopreservation;Protectiveagent冷凍保護劑是豬精液冷凍能否成功的最重要因素之一，冷凍保護劑的發(fā)展方向是用無毒性、高效的冷凍保護劑完全取代甘油。但近些年來，有關(guān)新冷凍保護劑的研
4、究一直沒有重大進展，甘油等有一定毒性作用的冷凍保護劑，在相當長的時間仍可能是精液冷凍中最常用的保護劑[1-2]。盡管甘油在冷凍過程中對精子有良好的保護作用，但對精子細胞的毒性作用及對受孕的抑制作用也日益引起人們的關(guān)注[3-6]。近些年來，關(guān)于冷凍保護劑的研究一直是精液冷凍領(lǐng)域中的一個熱點[7-9]。本文著重介紹了常用的保護劑及其應(yīng)用，以此加強對豬精液冷凍保護劑的深入研究，為今后在精液冷凍保存技術(shù)提供指導(dǎo)與理論依據(jù)。1豬精液的冷凍保存研究Ivanov在1926到1927年首次進行豬冷凍精液保存技術(shù)研究及凍精人工授精，Milovanov等在1930～1936年進行同
5、樣試驗，并最早成功地配制了豬精液冷凍的稀釋液(葡萄糖-硫酸鹽和葡萄糖-酒石酸鹽)。早期的豬精液冷凍試驗結(jié)果表明，冷凍后的精液中精子的存活率低，因為溫度下降對豬精子質(zhì)膜、超微結(jié)構(gòu)和生化組成造成損傷[10]。1949年，甘油對精子的抗凍保護作用被發(fā)現(xiàn)，推動了豬精液冷凍保存技術(shù)發(fā)展。1956年，Polges成功得到凍精人工授精出生的仔豬[11]。1975年，Pursel發(fā)明簡便的豬精液冷凍和解凍方法，并在同年對23頭青年母豬進行顆粒狀冷凍精液解凍后的人工授精，但受胎率和產(chǎn)仔數(shù)都明顯低于本交，直到2000年，全世界凍精的應(yīng)用還不到豬人工授精總量的1％。雖然豬精液冷凍保存
6、技術(shù)發(fā)展緩慢，但國內(nèi)外有關(guān)專家始終在不懈探索，隨著各種新的檢測手段的建立，可檢測到精子細胞質(zhì)膜化學組成變化、通透性改變、表面基因的不同以及各種冷凍損傷，為分析各種因素的影響提供了確鑿的科學依據(jù)。2002年，Thurston等分析了質(zhì)膜表面基因限制性片段多態(tài)性，發(fā)現(xiàn)其中16個片段對冷凍結(jié)果影響較大。從而可看出個體差異對冷凍效果的影響。2006年，Ricker等用傅氏轉(zhuǎn)換紅外光譜儀(FTIR)和掃描電鏡(SEM)檢測到在低溫下質(zhì)膜膜相的變化，由于膜相變化，引起了膜通透性改變、活力下降、信號通路改變，直至引起細胞死亡。Brouwer等監(jiān)測和定位了脂質(zhì)過氧化物的代謝；F
7、raser等用改良的中性彗星實驗評價DNA的損傷，DNA的完整對于自然受精和人工授精的受精率、胚胎的正常發(fā)育、胎兒和后代的生長至關(guān)重要[12-18]。2保護劑的作用原理2.1滲透性冷凍保護劑滲透性冷凍保護劑主要有甘油(Glycerol)、二甲基亞砜(Dimethylsulphoxide，DMSO)、丙二醇(Propyleneglycol，PROH)、乙二醇(EthyleneglycolEG)、木糖醇、乙酰胺、阿東糖醇等。這類抗凍劑多屬于低分子中性物質(zhì)，在溶液中易結(jié)合水分子，發(fā)生水合作用，使溶液的粘性增加，從而弱化水的結(jié)晶過程，達到保護的目的，在豬精液冷凍稀釋液中
8、添加抗氧化劑(如SOD、
