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1、HBsAgHBeAg含量及前S1抗原與乙肝病毒DNA間關系探討 作者:錢瑛,胡志剛,喬偉振,陳國千【關鍵詞】HBsAg;HBeAg;前S1抗原;乙肝病毒DNA我國在世界上屬于乙型肝炎病毒(HBV)感染的高發(fā)區(qū),乙肝表面抗原(HBsAg)的攜帶者已超過10%。隨著新型的時間分辨熒光免疫法(TRFIA)的應用,使HBV免疫檢測趨于超微量化。為了解HBsAg、HBeAg含量以及前S1抗原與乙肝病毒DNA之間的關系,本文對乙肝患者和乙肝病毒攜帶者共97例進行了HBsAg和HBeAg含量、乙肝病毒DNA及前S
2、1抗原的檢測,現(xiàn)將結果報告如下?! ?材料與方法 1.1對象 2005年7月至11月在我院門診和病房就診的急、慢性乙肝患者和乙肝病毒攜帶者97例,其中男65例,女32例,年齡15歲~68歲。健康對照22例,男15例,女7例,年齡23歲~52歲。留取清晨空腹靜脈血5ml,分離血清,-20℃凍存待檢。6 1.2檢測方法 1.2.1HBsAg、HBeAg定量 Wallac公司生產的AutoDELFIA1235時間分辨熒光免疫分析儀,上海新波公司配套試劑盒,HBsAg陽性界值10ng/ml,HBeAg陽性界值0
3、.03Ncu/ml?! ?.2.2乙肝病毒DNA Roche公司生產的Lightcycler熒光定量PCR儀,上海復星醫(yī)藥集團提供熒光定量試劑盒,>103copy/ml為陽性?! ?.2.3前S1抗原 雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),上海阿爾法生物技術有限公司配套試劑盒?! ?.3統(tǒng)計學分析 采用兩組獨立樣本的t檢驗,相關性分析,配對分類資料χ2檢驗,所有數(shù)據(jù)用EXCEL2003軟件自帶的統(tǒng)計功能處理。6 2結果 2.1不同HBsAg、HBeAg含量與HBVDNA關系 HBVDNA陽
4、性組HBsAg、HBeAg含量大于陰性組,差異均有顯著性,結果見表1。HBVDNA陽性組HBsAg、HBeAg含量與HBVDNA含量成正相關,相關系數(shù)(r)分別為0.328,P<0.01;0.484,P<0.01。表1HBsAg、HBeAg含量與HBVDNA關系(略)注:*HBsAg含量與陰性組比較P<0.01;**HBeAg含量與陰性組比較P<0.01?! ?.2HBVDNA與HBeAg、PreS1間的關系 結果見表2。HBVDNA陽性率70.1%(68/97),HBeAg
5、陽性率39.2%(38/97),PreS1陽性率64.9%(63/97),經配對資料χ2檢驗,HBVDNA陽性率大于HBeAg陽性率,差異有顯著性,HBVDNA與PreS1陽性率差異無顯著性。表2HBVDNA與HBeAg、PreS1間的關系(略)注:HBVDNA與HBeAg相比χ2=23.36,P<0.05;HBVDNA與PreS1相比χ2=1.23,P>0.05。 3討論6乙肝病毒復制是一個相當復雜的過程,目前還存在許多未解之迷。HBsAg作為HBV感染的特異標志,是由S基因編碼
6、的蛋白,本文結果顯示雖然其含量與HBVDNA含量成正相關,但關系不夠密切。這可能是因為部分慢性乙肝患者中,HBsAg低表達或S區(qū)基因變異使常規(guī)檢測試劑無法檢出,但此時仍有病毒復制。而在無病毒復制者中,仍可能存在的小球形顆粒的包膜蛋白幾乎全部是S蛋白[1,2],表現(xiàn)出HBsAg含量較高。HBVDNA是反映病毒復制活動最直接、可靠的指標[3]。一般認為HBeAg陽性和含量與乙肝病毒的復制情況及傳染性的強弱成正相關[4]。本實驗結果:HBeAg含量與HBVDNA含量成正相關,相關程度中等(r=0.484),也驗證
7、了這一理論。HBVDNA陽性率(70.1%)大于HBeAg陽性率(39.2%),P<0.05,說明HBVDNA比HBeAg更敏感。在HBVDNA陽性患者中,有48.5%(33/68)的患者HBeAg為陰性,可能是由于與HBeAg表達有關的前C區(qū)或(和)C區(qū)發(fā)生啟動子/終止密碼突變,從而表現(xiàn)為HBeAg陰性,這些乙肝病毒異變株與重肝發(fā)生或慢性肝炎惡化有關[5]。因此單一的HBeAg作為判斷乙肝病毒復制活躍與否的指標是不夠的。同樣作為病毒復制的指標,PreS1與HBVDNA相比,HBVDNA陽性率(
8、70.1%)與PreS1抗原陽性率(64.9%)比較差異無顯著性(P>0.05),說明Pre6S1與乙肝病毒復制密切相關。有研究[1]證明:小球形顆粒的包膜蛋白組成隨病毒是否復制而異,在肝內病毒非復制期,大蛋白(由S、PreS1及PreS2基因區(qū)所編碼)在血清中很低和無,大量滯留在肝細胞中,因此可以根據(jù)檢測血液中大蛋白的有無,來判斷病毒攜帶者體內的HBV病毒