不同產(chǎn)地白英中多糖含量的測定

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1、不同產(chǎn)地白英中多糖含量的測定作者：王林江，雷倩，馬雙良，汪曉敏，徐順【摘要】　　目的測定不同產(chǎn)地白英多糖的含量，為白英的質(zhì)量評價提供理論依據(jù)。方法利用水提醇沉法從白英中提取得到多糖，采用苯酚-硫酸法測定3個產(chǎn)地白英的多糖含量。結(jié)果不同產(chǎn)地白英多糖含量分別為:安徽1.66%，浙江1.84%，江蘇1.62%。結(jié)論苯酚-硫酸法簡便、快速、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，適合測定白英中多糖含量，不同產(chǎn)地白英多糖的含量差異不大,為白英的質(zhì)量評價提供理論參考?！娟P(guān)鍵詞】白英；多糖；苯酚-硫酸法　　白英SolanumlyratumThunb.系茄科植物，全草作為傳統(tǒng)中藥已

2、有二千多年的歷史，最早見于《本經(jīng)》記載，多產(chǎn)于浙江、江蘇、安徽，性味苦、辛、微寒。常與他藥伍用治療肺癌、胃癌、肝癌等多種癌癥，此外還用于治療感冒發(fā)熱、黃疸性肝炎、膽囊炎、水腫等。白英的化學(xué)成分研究表明白英中含有黃酮類、多酚類、有機酸類、多糖類、倍半萜類、甾醇類、香豆素類等多種化合物［1］。8　　多糖是構(gòu)成生命的基本物質(zhì)之一，廣泛存在于動物細胞膜、植物和微生物細胞壁中，是一類天然高分子化合物。隨著對多糖結(jié)構(gòu)的逐步深入了解，多糖化合物的生物活性研究得以迅速發(fā)展。多糖在抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗衰老、降血糖及降血脂等方面顯示出良好的應(yīng)用前景［2，3］。白

3、英中的多糖具有多種生物活性［4，5］，不僅可以作為廣譜免疫促進劑具有調(diào)節(jié)免疫功能，還可以抗感染、抗輻射、抗凝血、降血糖、預(yù)防和治療腫瘤等。植物多糖的含量可以在一定程度上體現(xiàn)該藥材免疫作用的強弱。白英多糖是其主要成分之一［6，7］，但目前有關(guān)白英多糖的研究報道較少，不同產(chǎn)地白英多糖的含量比較也未見報道。本實驗利用水提醇沉法從白英中提取得到多糖，采用苯酚-硫酸法［8，9］顯色測定了3個不同產(chǎn)地白英中多糖的含量，為選取優(yōu)良藥用白英產(chǎn)地提供依據(jù)，為白英質(zhì)量評價做出補充，也為其藥理作用的進一步研究提供基礎(chǔ)?！　?藥材、試劑與儀器　　1.1藥材安徽產(chǎn)白英

4、購于北京同仁堂，浙江和江蘇產(chǎn)地的白英購于鄭州市醫(yī)藥公司。經(jīng)鑒定均為茄屬植物白英?！　?.2試劑無水葡萄糖（對照品）天津化學(xué)試劑三廠生產(chǎn)，其它試劑均為分析純?！　?.3儀器紫外可見分光光度計JascoV-550型，V-550工作站（日本島津科技公司）,石英吸收池；RE-52-99型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠），SHZ-D8循環(huán)水式真空泵（鄭州市上街區(qū)長虹儀器儀表廠），DGB/20-002臺式干燥箱（重慶試驗設(shè)備廠），電子天平FA1004A（上海精密科學(xué)儀器有限公司）。　　2方法與結(jié)果　　2.1白英中多糖的提取精確稱取安徽白英藥材粉末(過60

5、目篩)5.0g置于索氏提取器中，以石油醚回流除去脂類，藥渣揮去溶劑后，用80%的乙醇提取以除去單糖、低聚糖等干擾成分，最后用水提取多糖。提取液在50℃經(jīng)減壓濃縮至原體積的1/3左右,濃縮液中加入3～5倍量的95%的乙醇,靜置，抽濾，沉淀依次用無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌多次，60℃烘干至恒重，得白英多糖。　　2.2供試品溶液的制備精確稱取安徽白英藥材粉末3.0g，置圓底燒瓶中，石油醚回流脫脂，藥渣揮去溶劑后，加80%乙醇100ml，回流提取，趁熱過濾，殘渣用80%熱乙醇洗滌3次，10ml/次。殘渣揮干乙醇，加蒸餾水60ml，沸水浸提，趁熱過濾，殘

6、渣用熱水洗滌3次，10ml/次。洗液并入濾液中，放冷后，移置100ml的容量瓶中，蒸餾水稀釋至刻度，精確量取上述溶液1ml于10ml容量瓶中，按“2.3.3”方法顯色，稀釋至刻度，即得供試品溶液。　　2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制8　　2.3.1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備精確稱取105℃干燥至恒重的葡萄糖對照品10mg，蒸餾水溶解定容于100ml容量瓶中，配成濃度0.1mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液備用。　　2.3.26%苯酚溶液的制備稱取苯酚100g，加鋁片0.1g和碳酸氫鈉0.05g，蒸餾收集182℃餾分。稱取6.67g餾分水溶解后，置于100ml棕色容量瓶

7、中,用水稀釋至刻度?！　?.3.3測定波長的選擇精密移取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0.60ml置于10ml容量瓶中，加水補足2ml，加入苯酚溶液1.4ml，并迅速加入6.0ml濃硫酸，搖勻后,放置5min，置沸水浴中加熱15min，取出冷水浴10min并稀釋至刻度；另取2ml蒸餾水，加苯酚與濃硫酸同上步驟作為參比，從370～520nm每隔5nm測定1次吸光度，以吸光度的最大值選擇測定波長為490nm?！　?.3.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密移取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0.50，0.70，0.90，1.10，1.30，1.50，1.70ml，分別置于10ml容量瓶中，加水補

8、足2ml,用“2.3.3”方法顯色后,于490nm處測吸光度，以吸光度A對溶液濃度C(mg/ml)進行回歸分析，得標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程：　　A=54.5536C-0.0