云南不同產(chǎn)地茯苓中多糖的含量測定

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1、萬方數(shù)據(jù)第32卷第4期云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報V01．32No．42009年8月JournalofYunnanUni、一ersityofTradilionalChineseMedicine8．2009云南不同產(chǎn)地茯苓中多糖的含量測定+衛(wèi)華，趙聲蘭，趙榮華，馮德強(qiáng)△(云南中醫(yī)學(xué)院中藥學(xué)院，云南昆明650500)摘要：分別用水和稀堿為溶劑提取茯苓多糖，用硫酸一苯酚法測定云南9個不同產(chǎn)地茯苓樣品的水溶性多糖和堿溶性多糖的含量。結(jié)果表明：云南不同產(chǎn)地的茯苓中水溶性多糖最高達(dá)7．03％，最低為3．27％，堿溶性多糖最高達(dá)92．72％，最低為65．85％．云南不同產(chǎn)地的茯苓中多糖含量有明顯差別。研究結(jié)果為評價

2、云南茯苓藥材的質(zhì)量及種植奠定基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞：茯苓；多糖；含量測定中圖分類號：R284．2文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1000--2723(2009)04—0025珈3茯苓為多孔菌科真菌茯苓PoriaCOCOS(Schw．)Wolf的干燥菌核。主產(chǎn)于云南、安徽、湖北、河南、四川等地。產(chǎn)云南者稱“云茯”，質(zhì)較優(yōu)。茯苓主要含p一茯苓聚糖，占干重約93％．其味甘而淡，性平，具有利水滲濕，益心脾而寧心安神之功效¨]。茯苓多糖或經(jīng)改造的茯苓異多糖具有促進(jìn)細(xì)胞分裂、補(bǔ)體激活、抗腫瘤、抗癌等生物活性[2]。茯苓多糖主要存在于茯苓細(xì)胞壁中，按照溶解度的不同又分為水溶性茯苓多糖和堿溶性多糖【3J。本文分別以水和稀堿

3、為溶劑，提取茯苓中的多糖，用文獻(xiàn)【41硫酸一苯酚法測定云南9個不同產(chǎn)地茯苓樣品的水溶性多糖和堿溶性多糖的含量，為茯苓藥材的質(zhì)量評價和開發(fā)利用提供依據(jù)。1儀器、試劑及實驗材料1．1儀器賽多利斯BS系列電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)，XYJ一802離心機(jī)(江蘇醫(yī)療儀器廠)，752N紫外可見分光光度計(上海第三分析儀器廠)。1．2材料及試劑茯苓藥材為茯苓PoriaCOCOS(Schw．)Wolf的干燥菌核，由普洱市民族傳統(tǒng)醫(yī)藥研究所提供，共有9個產(chǎn)地9個樣品。濃硫酸，石油醚(60—90℃)，95％乙醇，無水葡萄糖，氫氧化鈉，苯酚均為國產(chǎn)分析純。5％苯酚溶液：稱取分析純苯酚309加熱蒸餾

4、，收集182。C的餾分，吸取此餾分10mL，加蒸餾水200mL使之溶解，置棕色瓶內(nèi)，放冰箱備用。2方法與結(jié)果2．1樣品的預(yù)處理樣品粉碎過60目篩網(wǎng)，置于索氏提取器中用石油醚回流處理3h，再用80％乙醇提取4～5h，過濾，于60℃干燥5h(至恒重)后置于干燥器中備用。2．2水分含量的測定按文獻(xiàn)【5]水分測定法(附錄ⅨH第一法)測定。云南不同產(chǎn)地茯苓藥材中的含水量(表1)。表1云南不同產(chǎn)地茯苓藥材中的含水量產(chǎn)地含量(％)產(chǎn)地含水量％2．3葡萄糖對照品溶液[6-s]精密稱取105。C干燥至恒重的無水葡萄糖·基金項目：云南省2004科技攻關(guān)項目(No．2004NG05一17)收稿日期：2009—0

5、5—24修回日期：2007—07一17作者簡介：衛(wèi)華(1965一)，女，云南石屏人，高級講師，從事有機(jī)化學(xué)教學(xué)和研究工作?！魍ㄓ嵶髡撸厚T德強(qiáng)，Tel：0871-5849622；E—mail：fdq590522@qq．com25萬方數(shù)據(jù)2009鉅云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報第32卷100mg，用水溶解并定容于100mL容量瓶中，搖勻。精密量取10mL上述溶液，置于100mL容量瓶中，用水定容，搖勻。即配制得0．1mg／mL的葡萄糖對照品溶液。2．4供試品溶液2．4．1水溶性茯苓多糖精密稱取經(jīng)過預(yù)處理的茯苓樣品1g，加水40mL，回流提取2h，趁熱過濾，重復(fù)提取2次，用少量水洗滌濾渣，合并濾液，轉(zhuǎn)移至10

6、0mL容量瓶內(nèi)，加水稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。2．4．2堿溶性茯苓多糖曲1精密稱取預(yù)處理的茯苓樣品0．49，加1mol／L的NaOH溶液100mL，4℃浸漬過夜，過濾，棄去初濾液，精密吸取濾液1．5mL于50mL的容量瓶，加水稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。2．5最大吸收波長的確定精密吸取對照品溶液和同一供試品溶液0．5mL，分別置于具塞刻度比色管中，各補(bǔ)加蒸餾水至1．0mL，再各加苯酚試液1．OmL，搖勻，迅速滴加濃硫酸5．0mL，搖勻后放置5min，沸水浴25rain，取出冷卻至室溫，用試劑空白調(diào)零，在300nm～600nm波長范圍連續(xù)測定吸光度。結(jié)果表明，對照品溶液和供試品

7、溶液均在490nm有最大吸收，故確定490nm為測定波長。2．6標(biāo)準(zhǔn)曲線【n8】精密吸取葡萄糖對照品溶液0，0．1，0．3，0．5，O．7，0．9，1．0mL，分別置于具塞刻度比色管中，SHJtl蒸餾水至1．0mL，按2．5項方法操作，于490nm波長測定吸光度，以吸光度A為縱坐標(biāo)。葡萄糖量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，求得回歸方程為：A=0．8163C+0．0005，r=0．9994(n=6)。結(jié)果表明葡萄糖進(jìn)樣量在0．01