多巴胺d1受體在帕金森腦黑質(zhì)紋狀體的表達(dá)

《多巴胺d1受體在帕金森腦黑質(zhì)紋狀體的表達(dá)》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。

1、多巴胺D1受體在帕金森腦黑質(zhì)紋狀體的表達(dá)作者：樊平石葛明康云霄郭巍巍王磊【摘要】　　目的觀察帕金森（PD）病人腦黑質(zhì)紋狀體多巴胺D1受體的表達(dá)變化。方法采用免疫放射自顯影法觀察PD標(biāo)本(PD組)中黑質(zhì)紋狀體多巴胺D1受體的含量改變，并與非神經(jīng)系統(tǒng)疾病腦標(biāo)本(對(duì)照組)進(jìn)行對(duì)照研究。結(jié)果PD組多巴胺D1受體標(biāo)記信號(hào)在殼及尾狀核比對(duì)照組減弱，黑質(zhì)多巴胺D1受體的標(biāo)記信號(hào)比對(duì)照組增強(qiáng)；灰度值分析顯示，殼及尾狀核的灰度值比對(duì)照組分別增加了11.35%和10.52%，而黑質(zhì)比對(duì)照組減了48.89%（P<0.01）。結(jié)

2、論多巴胺D1受體在PD人腦標(biāo)本殼及尾狀核的表達(dá)降低、黑質(zhì)表達(dá)增加?！娟P(guān)鍵詞】帕金森病；多巴胺D1受體；紋狀體；黑質(zhì)　　研究表明，帕金森?。≒arkinson′sdisease，PD）是由中腦黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元退行性變導(dǎo)致紋狀體相應(yīng)神經(jīng)支配減少所致的神經(jīng)退行性疾病，目前左旋多巴（LDOPA）替代療法仍是PD的主要治療手段〔1〕，在疾病的初期會(huì)起到很好的治療效果，但隨之出現(xiàn)的藥效減退及異動(dòng)癥等副作用影響了PD的治療〔2〕。L8DOPA引起的副作用的機(jī)制目前尚不十分清楚，推測(cè)與多巴胺受體的表達(dá)改變、進(jìn)而導(dǎo)致基底神

3、經(jīng)節(jié)傳出活動(dòng)障礙有關(guān)。研究表明，多巴胺D1受體主要分布于基底神經(jīng)節(jié)傳出通路直接通路上的中型有棘GABA能神經(jīng)元〔3〕，在運(yùn)動(dòng)調(diào)控中起著重要的作用〔4〕，多巴胺D1受體的表達(dá)變化明顯改變基底神經(jīng)節(jié)的傳出活動(dòng)。有關(guān)PD時(shí)多巴胺D1受體在基底神經(jīng)節(jié)表達(dá)改變的研究結(jié)論不一〔5，6〕。本研究利用免疫放射自顯影技術(shù)觀察PD患者腦黑質(zhì)紋狀體多巴胺D1受體表達(dá)的變化，探討LDOPA產(chǎn)生副作用的機(jī)制?！　?材料與方法　　1.1材料　　人腦標(biāo)本8例，4例死亡前診斷為PD（PD組），死亡后病理檢查確診，在治療期間均有LDOPA服

4、藥史；另4例為死于非中樞神經(jīng)疾病患者（對(duì)照組）?！　?.2方法　　尸檢腦標(biāo)本切成3～5mm，經(jīng)10%甲醛固定、石蠟包埋。石蠟塊行常規(guī)切片，片厚8μm。裱片、脫蠟入水后分別進(jìn)行0.01mol/L枸櫞酸緩沖液（pH6.0）抗原修復(fù)、0.2%TritonX100、8%正常羊血清預(yù)處理（4℃，1h）、1∶250大鼠單克隆抗多巴胺D1受體抗體孵育（4℃，48h）、小鼠抗大鼠IgG（1∶100）室溫孵育28h、125I標(biāo)記的羊抗小鼠IgG（1μCi/ml）室溫孵育1h，每步間以TBS洗片3次。125I標(biāo)記的切片經(jīng)洗片、

5、風(fēng)干，將載片置于放射自顯影盒內(nèi)，載片上覆以KodakBiomaxMS膠片，曝光7d，行顯影、定影。對(duì)照組省去一抗，余者相同。　　1.3圖像分析　　將膠片掃描，分辨率為300dpi，以TIFF格式儲(chǔ)存。利用ImageJ軟件測(cè)量有關(guān)腦區(qū)的灰度值。　　1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析　　所得數(shù)據(jù)用x±s表示，采用t檢驗(yàn)。　　2結(jié)果　　2.1殼、尾狀核及黑質(zhì)多巴胺D1受體免疫反應(yīng)8　　對(duì)照組多巴胺D1受體標(biāo)記信號(hào)主要分布于新紋狀體的殼及尾狀核；舊紋狀體的外側(cè)蒼白球、內(nèi)側(cè)蒼白球僅見(jiàn)微弱的標(biāo)記；邊緣紋狀體的伏核也可見(jiàn)較弱的標(biāo)記信號(hào)。中腦黑

6、質(zhì)可見(jiàn)較強(qiáng)的多巴胺D1受體標(biāo)記信號(hào)。PD組多巴胺D1受體標(biāo)記信號(hào)在殼及尾狀核明顯減弱；黑質(zhì)多巴胺D1受體的標(biāo)記信號(hào)明顯增強(qiáng)，見(jiàn)圖1?！　?.2PD黑質(zhì)紋狀體多巴胺D1受體表達(dá)的灰度值變化　　殼及尾狀核的灰度值比對(duì)照組分別增加了11.35%和10.52%，而黑質(zhì)則比對(duì)照組減少了48.89%（P<0.01）。見(jiàn)表1。表1PD黑質(zhì)紋狀體多巴胺D1受體表達(dá)的灰度值變化(略)　　3討論　　以往研究表明，多巴胺D1受體主要存在于參與基底神經(jīng)節(jié)中紋狀體傳出聯(lián)系“直接通路”的殼及尾狀核，直接投射到內(nèi)側(cè)蒼白球和黑質(zhì)網(wǎng)狀部的

7、GABA能投射神經(jīng)元〔3〕，激活多巴胺D1受體能夠提高腺苷酸環(huán)化酶的活性，從而抑制“直接通路”內(nèi)側(cè)蒼白球和黑質(zhì)網(wǎng)狀部的GABA能傳出神經(jīng)元，進(jìn)而興奮丘腦皮質(zhì)投射神經(jīng)元，增強(qiáng)丘腦皮質(zhì)通路的活動(dòng)；殼及尾狀核多巴胺D1受體表達(dá)的降低最終將導(dǎo)致丘腦皮質(zhì)通路活動(dòng)的減弱。本研究顯示，殼及尾狀核多巴胺D1受體的表達(dá)減少，黑質(zhì)多巴胺D1受體的表達(dá)增加。PD患者腦殼及尾狀核多巴胺D1受體表達(dá)的減少一方面可能與黑質(zhì)多巴胺神經(jīng)元退性變后投射到這些腦區(qū)多巴胺的減少〔7〕，導(dǎo)致多巴胺D1受體表達(dá)減少有關(guān)；另一方面也可能是在疾病治療過(guò)程中

8、L8DOPA的使用改變了多巴胺D1受體的表達(dá)所致。黑質(zhì)多巴胺D1受體表達(dá)的增加可能與黑質(zhì)致密部多巴胺能神經(jīng)元退性變后星形膠質(zhì)細(xì)胞增生有關(guān)；細(xì)胞培養(yǎng)的研究證實(shí)，星形膠質(zhì)細(xì)胞能夠表達(dá)多巴胺D1受體〔8〕，膠質(zhì)細(xì)胞的增生導(dǎo)致了該區(qū)域多巴胺D1受體的增多。此外，黑質(zhì)多巴胺D1受體表達(dá)的增加也可能與黑質(zhì)網(wǎng)狀部GABA能神經(jīng)纖維多巴胺D1受體含量增加有關(guān)；免疫細(xì)胞化學(xué)的研究顯示，黑質(zhì)網(wǎng)狀部也存在