刺五加苷對d半乳糖致衰老模型大鼠免疫功能的影響

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1、刺五加苷對D半乳糖致衰老模型大鼠免疫功能的影響【摘要】目的研究刺五加苷對D半乳糖(Dgal)致衰老模型大鼠免疫功能的影響。方法以不同濃度刺五加苷作用Dgal致衰老模型大鼠后，計(jì)算臟器指數(shù)，MTT比色法測定T淋巴細(xì)胞增殖功能，ELISA法測定白介素2（IL2）、白介素6(IL6)、腫瘤壞死因子α（TNFα）濃度。結(jié)果刺五加苷改善Dgal致衰老大鼠免疫功能具有濃度依賴性。結(jié)論刺五加苷能改善衰老大鼠免疫功能，延緩免疫衰老?！娟P(guān)鍵詞】刺五加苷；衰老；白介素2；白介素6；腫瘤壞死因子α免疫功能下降已成為機(jī)體衰老的特征表現(xiàn)之一，引起衰老的因素都會導(dǎo)致免疫

2、系統(tǒng)功能下降，從而發(fā)生感染、癌癥及自身免疫性疾病等，使正常壽命明顯縮短。刺五加藥性溫和，自古就被視為具有抗衰老作用的良藥，漢代《神農(nóng)本草經(jīng)》已將它列為無毒、久服可以輕身、延年益壽而無害的上品，苷類是五加屬植物的有效生物活性成分。雖然現(xiàn)代研究證實(shí)，刺五加提取物能調(diào)節(jié)免疫功能〔1〕，糾正自由基代謝紊亂，抗動(dòng)脈硬化〔2〕、抗疲勞〔3〕，提高機(jī)體對有害剌激的抵抗能力等作用，但未見刺五加苷（CG）對免疫衰老影響方面的報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過建立D半乳糖(Dgal)致衰老大鼠模型，研究CG延緩衰老的作用，并從免疫學(xué)角度探究其延緩衰老的機(jī)制。9　　1材料與方法　　1.1材料　　CG由

3、湖南九匯現(xiàn)代中藥有限公司生產(chǎn)，Dgal由Sigma公司生產(chǎn)，噻唑藍(lán)（MTT）和二甲基亞砜（DMSO）由上海生工生物工程有限公司生產(chǎn)，白介素2(IL2)、IL6、腫瘤壞死因子α(TNFα)檢測試劑盒購于北京晶美生物技術(shù)有限公司，其他試劑為國產(chǎn)分析純?！　?.2儀器　　DS671型天平（上海寺岡電子有限公司）；紫外分光光度儀：Beckman640型；高速式離心機(jī)（上海醫(yī)學(xué)儀器廠TGL16G型）；恒溫水浴箱（上海天平儀器廠HWC52型）；電子天平（上海第二天平儀器廠MA型）；XW90型振蕩混合器（上海醫(yī)科大學(xué)儀器廠）；酶聯(lián)測定儀（美國Biotec公司E

4、LX800型）?！　?.3方法　　1.3.1衰老造模的建立9　　采用清潔級SD大鼠40只（實(shí)驗(yàn)中死亡1只）體重為200～300g，鼠齡3～4個(gè)月，雌雄各半，飲用清潔水，標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)，腹腔注射Dgal生理鹽水100mg·kg-1·d-1，連續(xù)給藥56d。開始注射2w后，將大鼠隨機(jī)分為5組，除中濃度組7只外，各組8只，每日按照10ml/kg灌胃。①對照組：注射生理鹽水，生理鹽水灌胃；②模型組：注射Dgal，生理鹽水灌胃；③低濃度組：注射Dgal，3.6g·kg-1·d-1CG灌胃；④中濃度組：注射Dgal，7.2g·kg-1·d-1CG灌胃；⑤高濃度組：注射D

5、gal，14.4g·kg-1·d-1CG灌胃。末次灌胃給藥后24h，處死動(dòng)物，測定各項(xiàng)指標(biāo)?！　?.3.2臟器指數(shù)的計(jì)算　　臟器指數(shù)(g/100g)=臟器重量(g)×100/大鼠體重(g)?！　?.3.3T淋巴細(xì)胞增殖功能的測定　　采用MTT比色法測定?！　?.3.4血清IL2、IL6、TNFα濃度的測定　　采用ELISA法。9　　1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理　　采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，數(shù)據(jù)以x±s表示，進(jìn)行單因素方差分析?！　?結(jié)果　　2.1CG對衰老大鼠臟器指數(shù)的影響　　與對照組相比，模型組胸腺指數(shù)存在非常顯著意義(P＜0.01)；與模型組相比，中、高濃度組胸

6、腺指數(shù)存在顯著意義(P＜0.05)；不同濃度組間比較，低、高濃度組胸腺指數(shù)存在非常顯著意義(P＜0.01)，中、高濃度組胸腺指數(shù)存在顯著意義(P＜0.05)；各組大鼠脾指數(shù)間不存在顯著意義(P＞0.05)，見表1。表1各組大鼠免疫器官指數(shù)的比較(略)　　2.2CG對大鼠T淋巴細(xì)胞增殖功能的影響　　對照組光密度值（OD值）為0.192±0.004，模型組OD值為0.134±0.003，低濃度組OD值為0.138±0.003，中濃度組OD值為0.143±0.003，高濃度組OD值為0.151±90.007。與對照組相比，模型組T淋巴細(xì)胞增殖功能濃度比較有非常顯著差異(P

7、＜0.01)；與模型組相比，低CG濃度組有顯著差異(P＜0.05)；不同濃度組間比較，高、中濃度組之間作用有非常顯著差異(P＜0.01)?！　?.3CG對衰老大鼠血清IL2、IL6、TNFα濃度的影響　　與對照組相比，模型組IL2、IL6、TNFα濃度具有非常顯著意義(P＜0.01)；與模型組相比，高濃度組IL2、IL6、TNFα濃度具有非常顯著意義(P＜0.01)，中濃度組IL2、TNFα濃度具有非常顯著意義(P＜0.01)，IL6濃度具有顯著意義(P＜0.05)，低濃度組IL2、IL6、TNFα濃度不具有顯著意義(P＞0.05)