半胱氨酸修飾金電極電化學(xué)發(fā)光法測定羅紅霉素

《半胱氨酸修飾金電極電化學(xué)發(fā)光法測定羅紅霉素》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、半胱氨酸修飾金電極電化學(xué)發(fā)光法測定羅紅霉素【摘要】在裸金電極上制備了L半胱氨酸自組裝膜修飾電極(LCysAu/SAM/CME)?？疾炝寺?lián)吡啶釕和羅紅霉素在此修飾電極上的電化學(xué)及其發(fā)光行為。結(jié)果表明，此修飾電極表現(xiàn)出了很好的電化學(xué)活性和電化學(xué)發(fā)光(ECL)響應(yīng)?；诹_紅霉素的存在可增大了聯(lián)吡啶釕的發(fā)光強(qiáng)度，建立了測定羅紅霉素片的電化學(xué)發(fā)光分析方法。在最佳實(shí)驗(yàn)條件下,羅紅霉素濃度在1.0×10-7～1.0×10-4mol/L范圍內(nèi)與其相對發(fā)光強(qiáng)度呈線性關(guān)系，其線性回歸方程為I=2×107C+384.02，r=0.9977;檢出限(S/N=3)為1.0×1

2、0-7mol/L。連續(xù)測定1.8×10-5mol/L羅紅霉素10次，發(fā)光強(qiáng)度的RSD為1.93%,表明此修飾電極具有較好的重現(xiàn)性,并將本方法用于羅紅霉素片劑的檢測?！娟P(guān)鍵詞】L半胱氨酸，化學(xué)修飾電極，羅紅霉素，聯(lián)吡啶釕，電致化學(xué)發(fā)光　　1引言11　　羅紅霉素為第3代紅霉素衍生物(結(jié)構(gòu)見圖1)，是紅霉素A的9位羰基以甲氧基乙氧基甲肟基取代的半合成紅霉素，屬大環(huán)內(nèi)酯類的抗生素[1]。其抗菌活性及抗菌譜與紅霉素相似，但對酸穩(wěn)定，血藥濃度高，因而具有用量小、口服吸收良好、作用時間長、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)。羅紅霉素直腸給藥可作為治療慢性細(xì)菌性和慢性非細(xì)菌性前列腺炎的主要

3、藥物[2]。目前，對羅紅霉素的測定方法主要有高效液相色譜法[3]和流動注射化學(xué)發(fā)光法[4]。中國藥典(2000年版)測定其含量采用微生物檢定法，但該方法操作繁瑣，檢驗(yàn)周期長，影響因素多、實(shí)驗(yàn)誤差大[5]。文獻(xiàn)[6]報(bào)道了參考中國藥典羅紅霉素膠囊的溶出度檢測法。文獻(xiàn)[7]采用紫外分光光度法測定羅紅霉素的含量。但用同一溶劑時，羅紅霉素與其分解產(chǎn)物顯同一顏色，此法測定羅紅霉素的含量可能產(chǎn)生很大的誤差，故需要選擇適宜的溶劑。因此,建立羅紅霉素分析新方法具有重要的意義?！　‰娭禄瘜W(xué)發(fā)光(ECL)是通過電極上直接或間接發(fā)生的電化學(xué)反應(yīng)而產(chǎn)生的一種化學(xué)發(fā)光。它是在化學(xué)發(fā)

4、光和電化學(xué)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種分析技術(shù)，不但保留了化學(xué)發(fā)光分析和電化學(xué)分析所固有的優(yōu)點(diǎn)，同時還具有其化學(xué)發(fā)光反應(yīng)易于控制、方法更靈敏、更具有選擇性、獲得更多的化學(xué)信息等優(yōu)點(diǎn)[8,9]。ECL作為一種靈敏度高、選擇性好的分析方法，近年來引起人們的廣泛關(guān)注。目前已報(bào)道的ECL物質(zhì)有聯(lián)吡啶釕類絡(luò)合物[10,11]、酰肼類藥物[12,13]及多環(huán)芳烴類物質(zhì)[14]。其中作為發(fā)光試劑的聯(lián)吡啶釕[Ru(bpy)3]2+具有水溶性好、試劑穩(wěn)定、氧化還原可逆、發(fā)光效率高、可電化學(xué)再生、可進(jìn)行可逆單電子轉(zhuǎn)移反應(yīng)及激發(fā)態(tài)壽命長等優(yōu)點(diǎn)，在ECL光藥物分析應(yīng)用研究中占有重要地位。

5、11　　目前，關(guān)于用電化學(xué)發(fā)光法測定羅紅霉素的報(bào)道較少。本實(shí)驗(yàn)研究了巰基化合物在金電極表面的自組裝及分析應(yīng)用。通過巰基化合物能夠在金電極等金屬表面形成SM鍵，且伸向溶液的有機(jī)鏈會形成有序排列的單分子層結(jié)構(gòu)，因此在結(jié)構(gòu)與功能上自組裝膜具有類似生物膜的特性，且穩(wěn)定性好，在界面化學(xué)和生命化學(xué)領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。利用L半胱氨酸(LCys)與金電極的強(qiáng)相互作用，通過SAu鍵使LCys自組裝到金電極的表面，形成LCysAu/SAM/CME，此電極對羅紅霉素的氧化具有明顯的催化作用。據(jù)此，成功地建立了一種羅紅霉素的ECL檢測新方法。在選定的最佳條件下，聯(lián)吡

6、啶釕與羅紅霉素體系的ECL強(qiáng)度與羅紅霉素濃度在1.0×10-7～1.0×10-4mol/L范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。本方法簡單、線性范圍寬、檢出限低，同時具有較高的選擇性，樣品處理簡單。本方法應(yīng)用于羅紅霉素片劑的分析，結(jié)果滿意?！　?實(shí)驗(yàn)部分　　2.1儀器與試劑　　MPIE型電致化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)(西安瑞邁電子科技有限公司);DL60D型超聲波清洗器(上海之信儀器有限公司)，CH660B電化學(xué)工作站(上海辰華儀器有限公司);電化學(xué)實(shí)驗(yàn)采用三電極系統(tǒng):LCysAu/SAM/CME電極為工作電極，11Pt絲為對電極，Ag/AgCl為參比電極(飽和KCl溶液

7、)?！　?.00×10-4mol/L羅紅霉素標(biāo)準(zhǔn)儲備液(用時現(xiàn)配)：準(zhǔn)確稱取0.0084g羅紅霉素(中國藥品生物制品檢定所)，用20mL無水乙醇溶解后，用水定容至100mL棕色容量瓶中，再用超聲脫氣后冷藏于冰箱中備用;1.00×10-3mol/L聯(lián)吡啶釕(Aldrich公司)儲備液：準(zhǔn)確稱取六水合三(2，2聯(lián)吡啶)氯化釕0.0374g，用水溶解并定容于50mL棕色容量瓶中，用超聲脫氣后放入冰箱中(4℃)保存。實(shí)驗(yàn)用水均為二次石英亞沸蒸餾水?！　?.2LCysAu/SAM/CME的制備　　將金電極首先用金相砂紙打磨，再依次用0.5和0.05μmαA1

8、2O3粉在平板玻璃上拋光至鏡面，分別于無水乙醇和水中超聲洗滌5mi