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《hplc 測定復(fù)方丹參方中三七皂苷類成分的含量》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、HPLC測定復(fù)方丹參方中三七皂苷類成分的含量潘桂湘基金項(xiàng)目:國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究規(guī)劃項(xiàng)目(G199944054403)作者簡介:潘桂湘(1976-),男,碩士,研究方向?yàn)樗幬锓治?。Tel:022-23051076Email:guixiangp@163.com,高秀梅,張伯禮(天津中醫(yī)學(xué)院,天津300193)摘要:目的建立復(fù)方丹參方中三七皂苷類成分的含量測定方法,并初步考察復(fù)方丹參方溶液的穩(wěn)定性。方法采用高效液相色譜法,分別以乙腈-0.05%磷酸(19:81)為流動相,于203nm處檢測三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re;以乙腈-水(
2、33:67)為流動相,于203nm處檢測人參皂苷Rb1。結(jié)果三七皂苷R1進(jìn)樣量在0.24~3.6μg范圍時,相關(guān)系數(shù)r=0.9997;人參皂苷Rg1進(jìn)樣量在1.2~18μg范圍時,相關(guān)系數(shù)r=0.9994;人參皂苷Re進(jìn)樣量在0.08~1.2μg范圍時,相關(guān)系數(shù)r=0.9997;人參皂苷Rb1進(jìn)樣量在0.25~3.72μg范圍時,相關(guān)系數(shù)r=0.9998。復(fù)方丹參方溶液于4℃放置4個月后三七皂苷類成分的含量無明顯變化。結(jié)論本法簡便,快速,準(zhǔn)確,重現(xiàn)性好,可作為復(fù)方丹參方的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn);復(fù)方丹參方中三七皂苷類成分的穩(wěn)定性良好。關(guān)鍵詞三七;
3、三七皂苷R1;人參皂苷Rg1;人參皂苷Re;人參皂苷Rb1;HPLClocatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame2復(fù)方丹參方由丹參、三七及冰片組成,具有活血化瘀,理氣止痛之功效,是臨床治
4、療冠心病、心絞痛的常用中藥處方[1]?!吨袊幍洹?000年版收載的該方劑型為復(fù)方丹參片和復(fù)方丹參滴丸[2],在其含量測定項(xiàng)下,只對丹參中丹參酮ⅡA或丹參素作出要求,而對三七皂苷成分則沒有相應(yīng)的規(guī)定。為了較全面評價復(fù)方丹參方的質(zhì)量,我們同時制定復(fù)方中三大物質(zhì)群——丹參水溶性成分、丹參脂溶性成分和三七皂苷類成分的質(zhì)量控制方法。該文報道的是復(fù)方丹參方中三七皂苷類成分的HPLC測定方法。三七的主要成分是三七皂苷[3],有很多與人參皂苷相同(如人參皂苷Rg1、Rb1、Re),還有些是三七本身獨(dú)有的成分(如三七皂苷R1)?,F(xiàn)有大部分三七及其相關(guān)制
5、劑(如復(fù)方丹參片、復(fù)方丹參口服液)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[4~7]大多僅對三七中的1~2個成分進(jìn)行定量,《中國藥典》三七藥材的含量測定項(xiàng)下[2],也只采用TLC法測定人參皂苷Rg1和人參皂苷Rb1兩個成分。本文采用HPLC法,選擇20(S)-原人參二醇型人參皂苷Rb1、20(S)-原人參三醇型人參皂苷Rg1、人參皂苷Re,及三七獨(dú)有成分三七皂苷R1作為指標(biāo),建立了復(fù)方丹參方中三七皂苷類成分的含量測定方法。1實(shí)驗(yàn)部分1.1儀器與試藥HP1100高效液相色譜儀,G1311A-四元泵,G1322A-脫氣機(jī),G1316A-柱溫箱,1314A-UV可變波長檢
6、測器,HPRev.A.0501化學(xué)工作站;乙腈為色譜純,水為超純水,磷酸為分析純,三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re和人參皂苷Rb1對照品(中國藥品生物制品檢定所);丹參提取物和三七提取物(自制)。1.2色譜條件HypersilC18色譜柱(5μm,4.6mm×250mm),Sep-PakC18固相萃取小柱(60μm,6cc/500mg),三七皂苷R1、人參皂苷Rg1和人參皂苷Re以乙腈-0.05%磷酸(19:81)為流動相,流速為1.0mL/min,檢測波長為203nm,色譜圖見圖1;人參皂苷Rb1以乙腈-水(33:67)為流
7、動相,流速為1.0mL/min,檢測波長203nm,色譜圖見圖2。1.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制1.3.1標(biāo)準(zhǔn)貯備液配制精密稱取三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1和人參皂苷Re適量,用甲醇制成系列濃度的對照品混合溶液,進(jìn)樣10μL。locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whog
8、otAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame21.3.2線性關(guān)系考察以峰面積(Y)為縱坐標(biāo),進(jìn)樣量(X)為橫坐標(biāo)作圖,得三七皂苷R1的回歸方程為Y=92.054