廣西三七皂苷類成分含量的分析

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1、廣西三七皂苷類成分含量的分析楊海菊孔德鑫黃萬清馮秀芳黃榮韶【摘要】　　目的研究廣西三七不同產(chǎn)地、不同部位的皂苷含量特征。方法利用香草醛-高氯酸比色法測(cè)定三七中總皂苷含量，以高效液相色譜（HPLC）法測(cè)定三七中人參皂苷Rg1，Rb1，Re和三七皂苷R1含量。結(jié)果廣西靖西縣不同產(chǎn)地三七樣品的總皂苷及單體皂苷含量存在差異；不同部位間皂苷含量的差異達(dá)到極顯著水平，以根莖的最高，主根次之；同一樣品中，各單體皂苷含量以人參皂苷Rg1最高，人參皂苷Re最低，不同樣品中各單體皂苷間比值存在差異。結(jié)論廣西靖西縣各地三七質(zhì)

2、量存在差異，藥材中人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1和三七皂苷R1三者含量之和符合2005版《中國藥典》規(guī)定。【關(guān)鍵詞】三七總皂苷人參皂苷三七皂苷　　三七Panaxnotoginseng（Burk）F.H.Chen為五加科植物，是我國傳統(tǒng)名貴中藥材，含皂苷、黃酮、氨基酸、多糖、三七素等多種活性成分，有散淤止血、消腫定痛之功效，用于咯血、吐血、衄血、便血、崩漏、外傷出血、胸腹刺痛、跌撲腫痛等〔1〕。目前市場(chǎng)上三七主要來源于云南，并且國外也具有十分巨大的市場(chǎng)潛力。隨著人們生活水平的提高，對(duì)三七的需求量不斷增加〔

3、2〕。在保證三七穩(wěn)產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的條件下，開辟新的種植區(qū)域是滿足三七需求的重要途徑。廣西作為三七的原產(chǎn)地，曾經(jīng)也是主產(chǎn)地〔3〕。憑借優(yōu)越地理?xiàng)l件和長(zhǎng)期累積的經(jīng)驗(yàn)，在廣西擴(kuò)大三七的種植面積是可行的。劉華鋼等〔4〕也報(bào)道了廣西三七含有較高人參皂苷Rg1，Rb1，Re和三七皂苷R1含量。廣西政府已將三七納入廣西靖西等縣鼓勵(lì)種植的中藥材之一。　　三七不同部位皂苷含量不同，三七主根、根莖和支根中總皂苷含量差異明顯〔5〕，廣西三七莖基和須根的主要單體皂苷含量具有差異，且同一部位不同單體皂苷含量差異較大〔6〕。藥理研究〔7〕

4、表明，各單體皂苷的藥理作用不同，相互間的含量比值的差異對(duì)三七藥材質(zhì)量有重要影響。因此，本文在前人研究的基礎(chǔ)上，探索廣西三七不同產(chǎn)地、不同入藥部位的皂苷含量變化規(guī)律以及各單體皂苷在藥材中的變化,為進(jìn)一步研究廣西三七質(zhì)量奠定基礎(chǔ)?！　?器材　　1.1儀器FZ102型微型植物粉碎機(jī)（天津市泰斯特儀器有限公司），KQ-250DE型數(shù)顯超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司），Ｕ-1206紫外可見分光光度計(jì)（日本島津公司），U3000高效液相色譜儀（美國戴安公司）。　　1.2試劑人參皂苷Rg1(供含量測(cè)定用，批號(hào)1

5、10703-200424)、人參皂苷Re(供含量測(cè)定用，批號(hào)110754-200421)、人參皂苷Rb1(供含量測(cè)定用，批號(hào)110704-200420)、三七皂苷R1(供含量測(cè)定用，批號(hào)110745-200415)，均由中國藥品生物制品檢定所提供?！　∫译婧图状迹绹鳩iser公司，色譜純），去離子重蒸水?！　?.3材料本研究中實(shí)驗(yàn)材料于2007-09采集靖西縣新甲鄉(xiāng)（JX1），武平鎮(zhèn)（JX2），南坡鄉(xiāng)（JX3）等地的三年生三七，經(jīng)廣西大學(xué)農(nóng)學(xué)院植物科學(xué)系黃榮韶研究員鑒定為五加科植物三七Panaxnot

6、oginseng(Burk.)F.H.Chen?！　?方法　　2.1三七總皂苷含量測(cè)定　　2.1.1三七總皂苷的提取參照馬銀海等〔8〕的提取法，采用超聲波提取，提取溫度45℃，以70％乙醇40ml為提取溶劑，超聲時(shí)間30min，提取次數(shù)2次。合并提取液，70℃水浴濃縮至干，用15ml蒸餾水溶解，以1ml/min速度過預(yù)處理的AB-8大孔樹脂柱，水洗至Molish反應(yīng)陰性，用100ml70％乙醇以1.5ml/min速度洗脫，至醋酸酐-濃硫酸反應(yīng)陰性，收集洗脫液作為待測(cè)液。本實(shí)驗(yàn)在廣西大學(xué)農(nóng)學(xué)院植物生理實(shí)驗(yàn)

7、室內(nèi)進(jìn)行?！　?.1.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作參照采用香草醛－高氯酸比色法〔9〕進(jìn)行準(zhǔn)確稱定干燥至恒重的人參皂苷Rg1對(duì)照品4.9mg，用甲醇溶解定溶于10ml，精確量取0，40，80，160，200，300，400μl置10ml具塞試管中，水浴揮干溶劑，各加入新配制的5％的香草醛-冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml于60℃水浴恒溫15min，立即置于冰水中冷卻5min，加入冰醋酸5ml搖勻，放置10min，以試劑空白做參比于550nm處測(cè)定吸光度，以吸光度(A)為橫坐標(biāo)，以對(duì)照品溶液加入的體積數(shù)(μg)為

8、縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為Y=0.0049X-0.0084(r=0.9996)，對(duì)照品在19.6～196μg范圍內(nèi)線性良好?！　?.1.3樣品總皂苷含量測(cè)定按照標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下方法進(jìn)行比色，測(cè)定吸光度，根據(jù)回歸方程計(jì)算總皂苷含量?！　?.2三七單體的HPLC定量分析　　2.2.1色譜條件本文參照《中國藥典》2005版Ⅰ部〔10〕收錄的三七有效成分含量測(cè)定的色譜條件，根據(jù)具體使用的儀器略加修改，最終確定色譜條件為：色譜柱：C18(250mm