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《腸道病毒標(biāo)本的采集》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、腸道病毒標(biāo)本的采集、運(yùn)送、保存和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)?為及時(shí)、科學(xué)地采集和運(yùn)送手足口病標(biāo)本，規(guī)范實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)程序和檢測(cè)方法，提高檢測(cè)質(zhì)量，特制定本方案。1?采集對(duì)象1.1?腸道病毒感染者，多表現(xiàn)為手足口病、皰疹性咽峽炎、無(wú)菌性腦膜炎等，患者多見5歲以下兒童。1.2?因調(diào)查需要的密切接觸者。2?采樣液2.1?pH7.4～7.6?HANK氏平衡鹽（含0.5%的牛血清白蛋白）。2.2?pH7.4～7.6的Eagle’s?MEM培養(yǎng)液（含0.5%的牛血清白蛋白）。3?標(biāo)本種類及采集2.1?咽拭子：用聚丙烯纖維頭的塑料桿拭子同時(shí)擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將拭子頭浸入含3ml采樣液
2、的采樣管中。2.2?手足口病患者皰內(nèi)滲出液：用聚丙烯纖維頭的塑料桿拭子涂擦皰內(nèi)滲出液，將拭子頭浸入含3ml采樣液的采樣管中。2.3?患者糞便：采集5～10g糞便置于15ml空采樣管中。2.4?腦膜炎患者的腦脊液：采集好標(biāo)本后置于15ml空采樣管中。theprovisionsofelectricpowerconstructionengineeringqualitysupervisionandquality...2.4.1.1theunitworksacceptancerateof100%,thequalityevaluationofatotalscoreof9
3、5orabove;2.4.1.2regulatedWeldingNDTinspection100%,regulatedweldingapassingrateof>99%,andweldbeadappearance;2.4.1.3boilerhydraulic2.5?心包炎患者的心包積液：采集好標(biāo)本后置于15ml空采樣管中。2.6?血清標(biāo)本：須采集急性期、恢復(fù)期雙份血清。用真空負(fù)壓采血管采集血液標(biāo)本5ml，室溫靜置30分鐘，1500～2000rpm離心10分鐘，收集血清于2ml無(wú)菌螺口塑料管中。????標(biāo)本采集好后，應(yīng)在采樣管上做好標(biāo)記，并注明標(biāo)本的種類，同時(shí)
4、及時(shí)填寫采樣表，要求信息完整。4?標(biāo)本保存及運(yùn)送標(biāo)本應(yīng)在冷藏的條件下盡快進(jìn)行送實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，24小時(shí)內(nèi)能檢測(cè)的標(biāo)本可置于4℃保存，24小時(shí)內(nèi)無(wú)法檢測(cè)的標(biāo)本則應(yīng)置于-70℃或以下保存。如無(wú)－70℃保存條件，則于－20℃冰箱暫存。血清可在4℃存放3天、-20℃以下長(zhǎng)期保存。標(biāo)本運(yùn)送期間應(yīng)避免反復(fù)凍融。5?標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)5.1?核酸檢測(cè)：方法包括RT-PCR和Real-Time?RT-PCR，首先使用腸道病毒通用引物進(jìn)行快速篩查，得到陽(yáng)性結(jié)果后使用EV71、CoxA16等引物和探針進(jìn)行分型。5.2?病毒分離及鑒定：采用Vero、Hep2和RD細(xì)胞進(jìn)行病毒的分離，第
5、一代7日內(nèi)仍然為陰性的標(biāo)本需繼續(xù)盲傳一代。病毒的鑒定采用中和試驗(yàn)（NT）和間接免疫熒光（IFA）法。5.3?血清學(xué)檢測(cè)：采用組合血清進(jìn)行血清中和試驗(yàn)，雙份血清具4倍增長(zhǎng)才具有診斷意義。6腸道病毒感染病例采樣登記表theprovisionsofelectricpowerconstructionengineeringqualitysupervisionandquality...2.4.1.1theunitworksacceptancerateof100%,thequalityevaluationofatotalscoreof95orabove;2.4.1.2re
6、gulatedWeldingNDTinspection100%,regulatedweldingapassingrateof>99%,andweldbeadappearance;2.4.1.3boilerhydraulic腸道病毒感染病例采樣登記表編??號(hào)患者??姓名性??別出生年月發(fā)病日期就診日期采樣日期體溫℃臨???床???診???斷標(biāo)?本?種?類手足口病皰疹性咽峽炎無(wú)菌性腦膜炎腦干腦炎其??它咽?拭?子皰內(nèi)滲出液糞???便腦?脊?液心?包?液急性期血清恢復(fù)期血清??????????????????????????????????????????????
7、??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????填表說明：“臨床診斷”、“標(biāo)本種類”欄打“√”，其余欄目填寫相應(yīng)內(nèi)容。theprovisionsofelectricpowerconstructionengineeringqualitysupervisionandquality...2.4.1.1theunitworksacceptancerateof100%,thequalityevaluationofatotalsco
8、reof95orabove;2.4.1.2regul
