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《微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范操作ppt課件》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范操作1世界衛(wèi)生組織（WHO）對臨床微生物實(shí)驗(yàn)室提出三項(xiàng)指導(dǎo)性方針：（1）臨床微生物實(shí)驗(yàn)室盡可能把目標(biāo)集中在快速診斷方面；（2）顯微鏡檢查對建立快速的初步診斷具有很大價(jià)值；（3）實(shí)驗(yàn)室人員必須主動(dòng)與臨床結(jié)合，將實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為臨床有用的信息。2嚴(yán)峻的感染形勢感染性疾病并沒有象人類曾經(jīng)所預(yù)料的那樣隨著抗感染化療時(shí)代的到來而逐一銷聲匿跡。多種原因造成的易感人群增加;多重耐藥菌如甲氧西林耐藥的金葡菌（MRSA）、產(chǎn)ESBL的肺炎克雷伯菌和大腸桿菌、泛耐藥的銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌等不斷涌現(xiàn)并持續(xù)蔓延，原先少
2、見的病原如曲霉菌、念珠菌等深部真菌越來越常見;新發(fā)感染病原如SARS、禽流感、手足口病、甲型H1N1流感等也此起彼伏，感染性疾病仍然是人類關(guān)注的熱點(diǎn)。3臨床微生物實(shí)驗(yàn)室在感染診療 中的地位改變感染性疾病的預(yù)后，關(guān)鍵是疾病的早期診斷和有效的抗感染治療。臨床微生物檢驗(yàn)在感染性疾病的診斷和治療中，具有決定性價(jià)值。感染主要是由病原微生物引起的，微生物正確檢驗(yàn)，是建立準(zhǔn)確的感染性疾病病原學(xué)診斷和針對性的給予抗感染治療的前提和基礎(chǔ)。良好的微生物檢驗(yàn)，可以縮短感染確診的時(shí)間，同時(shí)可以使抗感染治療準(zhǔn)確率提高，從而達(dá)到降低醫(yī)療費(fèi)用、改
3、善疾病預(yù)后。而錯(cuò)誤的微生物檢驗(yàn)，將導(dǎo)致錯(cuò)誤的病原學(xué)診斷和錯(cuò)誤的臨床用藥決策。4臨床微生物檢驗(yàn)的主要任務(wù)⑴對微生物標(biāo)本做出快速、準(zhǔn)確的鑒定報(bào)告，及時(shí)滿足臨床的需要；⑵進(jìn)行有關(guān)抗菌藥物耐藥性方面的各種試驗(yàn)，受理抗菌藥物合理應(yīng)用的咨詢；⑶密切結(jié)合臨床，與臨床醫(yī)師討論、研究及處理有關(guān)感染性疾病的問題；⑷參與抗菌藥物臨床合理應(yīng)用的管理和醫(yī)院感染監(jiān)測、控制和管理。5衛(wèi)生部國家中醫(yī)藥管理局總后衛(wèi)生部發(fā)布衛(wèi)醫(yī)發(fā)2004285號文件關(guān)于實(shí)施《抗菌藥物臨床應(yīng)用指導(dǎo)原則》的通知62009-01-9-11衛(wèi)生部關(guān)于合理應(yīng)用抗菌藥物的星火計(jì)劃
4、啟動(dòng)三年180個(gè)省市8個(gè)專業(yè)組,包括微生物實(shí)驗(yàn)室,藥房,呼吸,血液,兒科,ICU,感染科,30000-45000個(gè)醫(yī)生或?qū)嶒?yàn)室接受培訓(xùn).7萌芽計(jì)劃:2009年6月啟動(dòng)3年培訓(xùn)450名二級甲等醫(yī)院微生物實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員目的規(guī)范常規(guī)微生物檢驗(yàn)技術(shù)提高基層醫(yī)院微生物檢驗(yàn)人員的業(yè)務(wù)水平更新老的實(shí)驗(yàn)診斷理念和方法8微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)適應(yīng)臨床需要正確規(guī)范操作快速建立新的理念及時(shí)報(bào)告有效與臨床溝通把實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)變?yōu)橛杏玫男畔?1.標(biāo)本采集和運(yùn)輸棉花纖維+竹/木條抑菌區(qū)是因?yàn)椋褐参锓置诔鰜淼模褐舅?；樹脂；福爾馬林10氯氣，重金屬與膠水的影
5、響11美國與歐洲對實(shí)驗(yàn)室的新要求NCCLSM40標(biāo)準(zhǔn)DIN58942標(biāo)準(zhǔn)12推薦COPANAmies運(yùn)送培養(yǎng)基多用途運(yùn)送系統(tǒng)–需氧+厭氧低氧化的環(huán)境–不會對標(biāo)本的微生物造成損害拭子是深入培養(yǎng)基中來保護(hù)苛養(yǎng)菌與厭氧菌兩面是以塑料密封,不透水和漏氣–減少污染和維持缺氧環(huán)境13ASM2004流感嗜血桿菌在三種不同的運(yùn)送基的存活率142.血液及骨髓標(biāo)本的收集 美國和英國血液培養(yǎng)指南1.采血時(shí)間：盡可能在用抗生素前，心內(nèi)膜炎和導(dǎo)管相關(guān)性感染例外。2.采血量：采一次或采一瓶是錯(cuò)誤的，應(yīng)采２－３套，至少應(yīng)采一套2瓶，分需氧和厭氧。
6、2瓶血量不少于16-20ml，先將10ml注入需氧瓶，再將剩余血采血注入?yún)捬跗俊?.采血方法：不要與血?dú)夂脱翗?biāo)本一起采血；不推薦血入瓶前換針頭；不推薦靜脈血直接入瓶；不宜在靜脈導(dǎo)管或靜脈留置口采血。15血液及骨髓標(biāo)本4.采血間隔：如第一次采集2套（4瓶）血培養(yǎng)標(biāo)本，在以后的2-5天不必采血，但除外心內(nèi)膜炎和導(dǎo)管相關(guān)性敗血癥。5.兒童：采血量是總血量的1%。，不做厭氧培養(yǎng)．6.延遲培養(yǎng)瓶處理:延遲培養(yǎng)瓶不要放冰箱或孵箱,放常溫，盡早送往臨床細(xì)菌室。7.皮膚消毒液推薦：建議先用70-80%異丙醇去脂，再用葡萄糖酸氯乙定
7、消毒。16第一次多瓶血液培養(yǎng)的意義提高陽性率識別定植菌或致病菌多瓶采樣后的以后的2-5天不需采樣,可提前獲得病原學(xué)報(bào)告17為什么必須同時(shí)做厭氧細(xì)菌?16%鏈球菌17%腸桿菌科細(xì)菌僅厭氧瓶報(bào)告陽性BartlettJG,etal.Thecontroversyregardingroutineanaerobicbloodcultures.AmJMed,2000，108:505-506.18需氧菌兼性厭氧菌厭氧菌需氧瓶厭氧瓶病原菌培養(yǎng)更完整菌血癥病原菌種類構(gòu)成19抽血量和體重的關(guān)系體重Kg抽血量ml套（需氧+厭氧）<11-21
8、1.1-2422.1-12.76212.8-36.3202>=36.340-602-3203.趨向性鑒定試驗(yàn)革蘭陽性球菌:觸酶試驗(yàn):3%H2O2用30%的H2O2稀釋10倍后使用，避光4度保存；試驗(yàn)時(shí)設(shè)立陽性和陰性對照；1分鐘內(nèi)產(chǎn)生大量氣泡為陽性。凝固酶試驗(yàn)：采用商品試劑或EDTA抗凝的多個(gè)兔混合血漿；測定玻片法測定凝聚因子10秒鐘即可觀察結(jié)果
