臨床微生物實驗室規(guī)范操作草案

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1、臨床微生物實驗室規(guī)范操作草案第一部分標本采集和運送標本采集和運送是細菌培養(yǎng)成功的最重要的關鍵，但由于標本的采集和運送常有護士或醫(yī)生或病人自己完成，所以也是最不容易做好的事情，而且不知道問題所在之處，由此引發(fā)的最主要后果是陽性率下降，這也是臨床醫(yī)生最不能接受的問題，為此建議來一次革命，用輸送培養(yǎng)基代替?zhèn)鹘y(tǒng)的標本的容器。血液及骨髓標本采集運送的規(guī)范條例1、采血時間：盡可能在用抗生素前，心內(nèi)膜炎除外。2、采血量：采一次或采一瓶是錯誤的，至少應采一套2瓶，分需氧和厭氧。2瓶血量不少于16-20ml，先將10ml注入需氧瓶，再將剩余血注入?yún)捬跗?。兒童：?/p>

2、血量是總血量的1％。(兒童敗血癥含菌量是成人的10-100倍)體重Kg抽血量ml套（需氧+厭氧）<11-211.1-2422.1-12.76212.8-36.3202≥36.340-602-33、采血方法：不要與血氣和血沉標本一起采血；不推薦血入瓶前換針頭；不推薦靜脈血直接入瓶；不宜在靜脈導管或靜脈留置口采血。4、采血間隔：如第一次采集2套（4瓶）血培養(yǎng)標本，在以后的2-5天不必采血，但除外心內(nèi)膜炎和導管相關性敗血癥。5、遲延培養(yǎng)瓶處理：遲延培養(yǎng)瓶不要放冰箱或孵箱，放常溫，盡早送往臨床細菌室。注：皮膚消毒液推薦：建議先用70-80％異丙醇去酯，

3、再用葡萄糖酸氯乙定消毒。其他無菌體液的采集運送規(guī)范臨床常用于培養(yǎng)的無菌體液9包括腦脊液、膽汁、胸腹水等。由于無菌體液細菌培養(yǎng)的價值遠高于有菌部位標本。所以無菌部位的采集和運送應遵循以下準則：1、無菌采集是培養(yǎng)成功的首要因素2、采集的標本應立即送至臨床細菌室，胸膜炎球菌有自溶酶，離體后會迅速自溶。肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌等對溫度敏感的細菌在冰箱會很快死亡。泌尿標本采集的規(guī)范1、采集后的標本應立即送檢。2、采集時間：多數(shù)藥物從尿道排泄，所以不管用哪種方法都應在用藥前采集。應采集早晨第一次的尿。3、標本管不應含防腐劑和消毒劑。4、采集中段尿時要先用肥

4、皂清洗女性的外陰和男性的外生殖器包括包皮內(nèi)，然后用清水沖洗。5、長期留置導尿管的患者應在更換新管時留取尿標本。6、做厭氧培養(yǎng)時應膀胱穿刺采集尿。分泌物采集規(guī)范1、對開放性病灶的采集：如眼結膜膿性分泌物、扁桃體、外耳道、手術后切口、導管治療感染、瘺管內(nèi)膿液、生殖道分泌物等均屬于開放性病灶。應先用無菌生理鹽水沖洗表面污染菌，去除舊的分泌物，用滅菌拭子采集病灶深部的分泌物，也可去感染部位下的組織送檢。2、閉鎖性膿腫：如淋巴膿腫、肺膿腫、肝膿腫、腹腔膿腫、盆腔膿腫等，對封閉的膿腫常采用穿刺或引流的方法采樣，應在用藥前采集，應注意膿液的氣味、性狀、顏色注

5、意厭氧菌存在的可能。不能及時送檢應應用輸送培養(yǎng)基。便標本采集規(guī)范1、采集時間：腹瀉患者應在用藥前、急性期采集；沙門菌感染、腸熱癥應在2周內(nèi)采;厭氧菌出現(xiàn)癥狀即采集。2、采集方法：自然排便者可用小木棒挑取有膿血和黏液的部位的糞便2-3克，如液狀糞便取絮狀物盛于無菌的、密封的、不吸水的、容器內(nèi)或直接盛于增菌液或保存液中;對不易獲得糞便患者及幼兒，可用直腸拭子采集后置保存液或輸送培養(yǎng)基中送檢。3、注意事項：9（1）雖然糞便標本本身含很多細菌但也要用無菌容器。（2）在患者病情許可的條件下應在用藥前采集標本。（3）應床邊接種或置輸送培養(yǎng)基送檢。（4）厭氧

6、細菌（艱難梭菌）培養(yǎng)的標本應盡量減少與空氣接觸。痰標本的采集和運送條例1、標本采集時間：用抗生素前；晨痰;2、采集方法：（1）自然咳痰：用清水漱口3次，應包括咽喉部，用力咳出痰，與滅菌容器中或輸送培養(yǎng)基中。（2）幫助咳痰：不易獲得痰的患者可霧化吸入加溫的氯化鈉（45℃10％氯化鈉水溶液）（3）支氣管鏡或支氣管毛刷：由醫(yī)生采集，建議直接種入輸送培養(yǎng)基。（4）胃內(nèi)采集痰標本：嬰幼兒不會咳痰而且常把痰誤咽入胃中。可在清晨，用胃管插入胃內(nèi)，用注射器抽出胃液。（5）小兒采集痰標本：用壓舌板刺激咳嗽使肺部和器官的分泌物噴出，用拭子采取標本送檢，如不能立即送

7、檢應種入輸送培養(yǎng)基。厭氧培養(yǎng)標本采集規(guī)范條例1、痰標本的厭氧培養(yǎng)標本采集：必須用氣管穿刺法獲得痰液，從口腔吐出的痰標本不能用于厭氧培養(yǎng)。2、尿標本的厭氧培養(yǎng)標本采集：恥骨上膀胱穿刺獲得尿標本可用于厭氧菌培養(yǎng)3、便標本厭氧培養(yǎng)標本采集;可用排出的便作厭氧培養(yǎng)但也應少與空氣接觸。第二部分標本培養(yǎng)前規(guī)范草案合格的標本是培養(yǎng)成功的最重要的因素，實驗室有權利對不合格提出終止檢查或要求重送標本的要求，因此實驗室必須建立標本接種前的質(zhì)量控制和標本合格的檢測。要求對除血液外的標本均作涂片革蘭染色檢查，用于評價標本的質(zhì)量和區(qū)別分離細菌是定植菌或致病菌。血液培養(yǎng)疑

8、是感染患者首次血培養(yǎng)至少一套，包括一瓶需氧瓶及一瓶厭氧9瓶。采集后標本如不能及時送檢，應置常溫保存，不能放冰箱或35-37度培養(yǎng)箱。痰培養(yǎng)標本培養(yǎng)前規(guī)