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《重組htgfβ1腺病毒轉(zhuǎn)染bmscs對(duì)其向軟骨分化的影響》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)重組hTGF．131腺病毒轉(zhuǎn)染BMSCs對(duì)其向軟骨分化的影響夏萬堯劉偉丁文龍鐘梅芳周廣東崔磊曾誼林【摘要】目的研究重組hTGF．131腺病毒(adeno．hTGF．81)轉(zhuǎn)染BMSCs對(duì)其向軟骨分化的作用。方法重組adeno．hTGF—B1轉(zhuǎn)染第一代豬BMSCs，對(duì)照組轉(zhuǎn)染adeno．LacZ，腺病毒的量以200pfu／細(xì)胞計(jì)算，轉(zhuǎn)染后ld，消化收集重組腺病毒轉(zhuǎn)染后的BMSCs．置于無菌15IIll聚丙烯試管中，體外細(xì)胞團(tuán)聚集連續(xù)誘導(dǎo)培養(yǎng)21d，然后分別從大體觀察、組織學(xué)和Ⅱ型膠原蛋白免疫組化的檢測對(duì)形成組織進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞團(tuán)收縮成近似小球形的組織塊，外觀成乳
2、白色，觸之有一定的彈性。蘇木素．伊紅染色觀察可見細(xì)胞團(tuán)外周為由數(shù)層扁平狀成纖維樣細(xì)胞組成的纖維軟骨膜，下層和中部區(qū)域有巢狀軟骨形成，軟骨陷窩明顯可見，軟骨細(xì)胞較均勻分布，包埋在軟骨陷窩內(nèi)。Safranin’O染色顯示．形成的軟骨組織區(qū)域有大量被染成桔紅色蛋白多糖類基質(zhì)分泌，Ⅱ型膠原免疫組化染色檢測顯示細(xì)胞團(tuán)中央出現(xiàn)較明顯的陽性染色區(qū)域?？梢娮攸S色的顆粒分布于胞漿內(nèi)。而對(duì)照組形成的組織塊略小，蘇木素．伊紅染色觀察見無軟骨樣組織形成，主要為較致密無結(jié)構(gòu)特征的纖維樣組織，Safranin’O染色也無被染成桔紅色蛋白多糖類基質(zhì)分泌。Ⅱ型膠原免疫組化染色檢測顯示也無明顯的陽性染色區(qū)。結(jié)
3、論應(yīng)用重組hTGF．B1腺病毒轉(zhuǎn)染的BMSCs進(jìn)行細(xì)胞團(tuán)聚集誘導(dǎo)培養(yǎng)，可誘導(dǎo)BMSCs向軟骨細(xì)胞表型分化而形成軟骨，為hTGF．131基因轉(zhuǎn)染的BMSCs在軟骨組織工程應(yīng)用中奠定了基礎(chǔ)?！娟P(guān)鍵詞】骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；基因轉(zhuǎn)染；腺病毒；轉(zhuǎn)化生長因子plEffectofadeno·hTGF-pltransfection011invitrochondrogenicdifferentiationofbonemalTowstromalcellsX／A形帆·yao，LIUWei，DINGWen—long，ZHONGMei-fang，ZHOUGuang-dD增，CUILei，CA0Yi-li
4、n．DepartmentofPlastic&ReconstructiveSurgery，ShanghaiKeyLaboratoryof咒ssueEngineering，TheNinthPeople’sHospital，SchoolofMedicine，鰳刪咖iJiaotongUniversity，舶喇200011．China—Correspondingauthor：CAOYi—lin【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheactionofchondmgenesisdifferentiationofbonenlalTowstromalceHs(BM
5、SCs)transfectedwithadeno-hTGF一131．MethodsIntheexperimentgroup，replication—deficientadenovirusescarryinghumanhTGF-BlcomplementaryDNA(adeno-hTGF-B1WaSconstructedandappliedtotransfecttothefirstgenerationBMSCs．Asacontrol，eachBMSCswastransducedwith200pfuofadeno．LacZgene．Onedayaftertransfer，BMSCs
6、weretrypsinized。counted，and5×105cellsaliuotswerespundownat500rpmperminutein15mlpolypropyleneconicaltubesandthenculturedinadefinedmediuminanincubatorat37℃for21days．neaggregateswereharvestedattimepointstO21daysandassessedbygrossobservation，histologicalanalysesandimmunohistochemicallocalizatio
7、noftypeIIcollagen．ResultsWhenharvestedat21days．eachpelletshrinkedtOspheroidtissuewithapearlyopalescenceingrossmorphologyandfoundtoberelativelyfirm．H．EstainingshowedelongatedliningceHsappearedasperichondrium．1ikecellsatthesurface．Somenestsofcartilagewereo
