茯苓多糖發(fā)酵、提取工藝優(yōu)化及硫酸酯化改性研究

茯苓多糖發(fā)酵、提取工藝優(yōu)化及硫酸酯化改性研究

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1、河南大學(xué)碩士學(xué)位論文茯苓多糖發(fā)酵、提取工藝優(yōu)化及硫酸酯化改性研究姓名:姜輝申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):遺傳學(xué)指導(dǎo)教師:楊生玉20090501河南人學(xué)2009屆碩J:研究生學(xué)位論文摘要茯苓是一味珍貴的藥食兩用菌,茯苓多糖是茯苓中一類具有廣泛生理活性的物質(zhì),具有增強(qiáng)免疫力、抗腫瘤等{者多功效。隨著分子生物學(xué)等學(xué)科的高速發(fā)展,多糖的諸多生物學(xué)功能被不斷認(rèn)識并研究,引起了人們的關(guān)注。本文利用液體發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)茯苓多糖:對多糖的發(fā)酵、提取_T^藝進(jìn)行了優(yōu)化;以發(fā)酵多糖為原料合成茯苓硫酸酯多糖,并對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征。本研究對茯苓多糖的工業(yè)化生產(chǎn)、擴(kuò)大多糖及其衍生物的應(yīng)用范同具有

2、一定的現(xiàn)實意義。主要研究結(jié)果如下:1.以液體發(fā)酵獲得的菌體生物量和多糖產(chǎn)量為指標(biāo),通過單因素試驗,對碳氮源比例以及不同培養(yǎng)溫度、轉(zhuǎn)速、pH和接種量等條件進(jìn)行了研究。經(jīng)正交設(shè)計優(yōu)化,最終確定了茯苓液體發(fā)酵的最優(yōu)培養(yǎng)條件:碳源為葡萄糖、碳源濃度為4%、氮源為蛋白胨加硝酸鉀、氮源濃度為1.5%、pH5.5、裝液暈為80mL/250mL、轉(zhuǎn)速150rpm、溫度26℃、pH5.5、接種量6%。2.利用單因素試驗和響應(yīng)面法優(yōu)化了菌絲體多糖的提取工藝。結(jié)果表明:茯苓菌絲體多糖最佳提取條件為:提取時間為4.3h,提取溫度為73.8"0,水料比為29.8:l時,預(yù)測茯苓多糖提取

3、率理論值達(dá)到2.45%,提取效果顯著提高,R2--93.66%,模型與實際試驗擬合較好,自變量與響應(yīng)值之問線性關(guān)系顯蓑,可用于茯苓多糖提取試驗的理論預(yù)測。并對產(chǎn)物進(jìn)行了純化,獲得了組分單一的多糖。3.采用氯磺酸.毗啶法對提取的茯苓多糖進(jìn)行硫酸酯化。通過比較吡啶與氯磺酸體積比、反應(yīng)溫度和反應(yīng)時間等條件,優(yōu)選出茯苓硫酸酯化多糖的最佳合成條件,得到取代度為0.68的茯苓硫酸酯多糖,并對其進(jìn)行理化性質(zhì)的鑒定。利用紫外光譜法和紅外光譜法對茯苓硫酸酯多糖的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征,結(jié)果表明合成產(chǎn)物有硫酯鍵。經(jīng)柱層析和瓊脂糖凝膠電泳鑒定,硫酸酯化產(chǎn)物的分子量大約在:54x103Da。

4、本文合成的茯苓多糖硫酸酯,成分均一、分子量較小,可用于抗腫瘤、抗病毒、抗衰老、調(diào)節(jié)免疫等領(lǐng)域的研究。關(guān)鍵詞:茯苓多糖液體發(fā)酵提取優(yōu)化硫酸酯化茯苓多糖發(fā)酵、提取f:藝優(yōu)化及硫酸化改性研究AbstractPoriaCOCOSisonekindofvaluablemedicialandediblefungus,andthepolysaccharideformPoriaCOCOShasawidevarietyofmedicinalactivities,suchasenhancingbodyimmuneity,anti-tumor,andmanyothereffects

5、.、研ththerapiddevelopmentofbio-molecularscience,thefunctionofpolysaccharideinmanybiologyiscontinentlyfoundandrecognized.Thestudyofpolysaccharidedrewinterests,especiallyinchemicallymodificationsofpolysaccharide.Inthispaper,theexpedmentstudiedusingliquidfermentationwegotthepachyman.And

6、fmdtheliquidfermentationoptimumconditiosofpachyman;extractionoptimumconditionsofmycelium.AkindofsulfatedpolysaccharidesWasobtainedanditsstructurewasproved.Thereisagreatsignificancetostudyonindustrializationproductionofpachyman,expandthescopeofapplicationofpachymananditsderivatives.T

7、hemainresultsweredescribedasfollows:1.Theoptimalratioofcarbonsources,nitrogensources,wasidentifiedthroughasingfactorscreeningtest.Andstudiedtheculturetemperature,rotationspeed,pHandinoculumamount.BythemethodofOrthogonalexperiment,optimizethemedium.Theoptimalmediumratiooftheliquidfer

8、mentationwasasfollo

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