資源描述：
《蜂膠抗衰老機制探討》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、蜂膠抗衰老機制探討王偉1宋淑霞1王輝2劉福英I河北醫(yī)科大學實驗動物學部，2．保定職工醫(yī)學院免疫室摘要目的：隨著年齡的增長，老年機體患感染性疾病、自身免疫病、腫瘤等疾病的機率明顯增加。因此降低老年機體患病的機率，增強抵抗力，研究延緩衰老的方法，積極地預防疾病、延長壽命、提高生存質(zhì)量具有重要的意義。本實驗用高齡小鼠和損傷的血管內(nèi)皮細胞分別作為實驗模型，分別給模型小鼠灌胃蜂膠、給體外培養(yǎng)的損傷的血管內(nèi)皮細胞加人適量蜂膠，以小鼠的NK細胞殺傷活性、M中細胞吞噬功能、脾臟淋巴細胞增殖活性、IL一1和IL一2的活性、腦組織中丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD
2、)的活性作為體內(nèi)實驗檢測指標；以損傷的血管內(nèi)皮細胞的細胞存活數(shù)和DNA的合成、以及LPS致血管內(nèi)皮細胞表達的細胞聞黏附分子一1(ICAM一1)作為體外實驗的檢測指標，目的在于觀察蜂膠拮抗老年機體免疫力低下和對損傷細胞的保護作用，并對其作用機理進行研究和探討．為蜂膠產(chǎn)品的臨床應用及其抗衰老的保健作用提供了實驗依據(jù)。方法：實驗分為體內(nèi)實驗和體外實驗兩部分。體內(nèi)實驗：將高齡(20月齡)Balb／c小鼠隨機分為4組，每緝10只：高齡對照組(蒸餾水灌胃0．3ml／只)；低劑量實驗組(蜂膠灌胃20m∥Ks體重)；中劑量實驗組(蜂膠灌胃33mr,／l(g體重)；高劑量實驗
3、組(蜂膠灌胃80rag／埯體重)；5月齡BALB／c小鼠作為低齡對照組(蒸餾水灌胃03ml／只)，每天一次，連續(xù)4周后，用乳酸脫氫酶法分別測小鼠脾臟NK細胞活性、腹腔M巾細胞吞噬活性，，四甲基偶氮唑藍(MTr)法測定脾臟淋巴細胞轉化率及蜂膠對經(jīng)過過氧化氫損傷后的脾細胞的淋巴細胞增殖活性。小鼠胸腺細胞增殖法測腹腔M中細胞IL一1和脾臟淋巴細胞IL一2的活性，比色法測小鼠腦組織中MDA含量和SOD活性。體外實驗：將血管內(nèi)皮細胞(VEC)接種于96孔的細胞培養(yǎng)板，接種密度為1x104個／孔，每孔設3個復孔。分以下二部分進行實驗。第一部分：蜂膠對過氧化氫損傷的血管內(nèi)
4、皮細胞(VEC)的保護作用：實驗分4組，每組8例：對照組(10％NCS的DMEM細胞培養(yǎng)液培養(yǎng))；各濃度蜂膠組(蜂膠濃度分別為4x10“m∥ml、4x10～Illg／ml、4x10～me／ml培養(yǎng)24小時)；過氧化氧組(過氧化氫濃度為100¨,mol／L)；蜂膠保護組(蜂膠濃度為4×10一mg／ml、4x10。mg／1Id、4x10～mg／“培養(yǎng)24小時后用100lunol／L的過氧化氫刺激4小時)。MTT比色法檢測細胞存活數(shù)量，免疫組化法檢測細胞DNA合成。第二部分：蜂膠對LPS致VEC表達ICAM一1的影響實驗分4組，每組8例：對照組(10％NCS的DM
5、EM細胞培養(yǎng)漬培養(yǎng)”小時)；蜂膠組(蜂膠濃度為4x10一nIg／ml培養(yǎng)”小時)；各濃度LPS組(LPS濃度分別為1txg／ml、2p．g／nil、3p．g／ml、4眥／nil和51zg／ml的刺激12小時)；蜂膠+各濃度LPS組(加入濃度為4×10旬mg／ml蜂膠培養(yǎng)24小時后，分別以1Izg／ml、2p．g／ml、3懈／ml、4峙／ml和5p,g／ml的LPS刺激12小時)。免疫組化法檢測細胞間黏附分子一1(ICAM一1)的表達。結果：1．NK細胞殺靶試驗比較用乳酸脫氫酶(LDH)釋放法測定NK細胞活性。低齡對照組為52．03％±0．316．高齡對照組為
6、35．82％±0．112，明顯低于低齡對照組(P(0．01)。低劑量組為43．86％±0．063，中劑量組為50．74％±0．020，高劑量組為48．46％±0．020。經(jīng)統(tǒng)計學分析三130·個劑量組NK細胞恬性均高于高faX'J,,f[}l蘭ll，其中，中劑量組NK細胞活性明顯高于高齡對照組(P<0．01)，低、高劑量組與高齡對照組相比無明顯統(tǒng)計學差異(P>0．05)。2·淋巴細胞增殖試驗用MTr法檢測淋巴細胞增殖活性，用sI(刺激指數(shù))表示。低齡對照組為2．176±o．499，高齡對照組為1．287±o．186，高齡對照組淋巴細胞增殖活性明顯低于低齡對照
7、組(P(0．們)。低劑量組為2．193±0157，中劑量組為1．72±0．211，高劑量組為2．207±0．416。三個劑量組sI均明顯高于高齡對照組(P<0．01)。3蜂膠對脾臟淋巴細胞的氧化損傷的保護作用用blTr法檢測H202對脾臟淋巴細胞的氧化損傷后淋巴細胞增殖活性，用SI(刺激指數(shù))表示。低齡、高齡對照組分別為為2．176±0499、1．2874-0．186，高齡對照組淋巴細胞增殖活性明顯低于低齡對照紐(P<0．01)。經(jīng)100mmol／Lm02處理的低齡、高齡損傷組分別為1．865±0．448、0．947±O．158，低齡損傷組低于低齡對照組，但
8、無明顯統(tǒng)計學意義(P>0．05)，高齡損傷組明顯低于
