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1、北京工商大學(xué)畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）編號(hào)：1002070109畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))題目：院（系）食品學(xué)院專業(yè)食品科學(xué)與工程學(xué)生姓名姜飛成績(jī)指導(dǎo)教師張嬋（職稱）講師2013年5月北京工商大學(xué)畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）誠(chéng)信聲明本人鄭重聲明：所呈交的畢業(yè)設(shè)計(jì)(論文)是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下,由我本人獨(dú)立完成。有關(guān)觀點(diǎn)、方法、數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)等的引用已在文中指出,并與參考文獻(xiàn)相對(duì)應(yīng)。據(jù)我查證，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表和撰寫的研究成果，也不包含為獲得其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。我承諾，論文中的所有內(nèi)容均真實(shí)、可信。如在文中涉及到抄襲
2、或剽竊行為，本人愿承擔(dān)由此而造成的一切后果及責(zé)任。畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))作者簽名：簽名日期：年月北京工商大學(xué)畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）摘要紅曲的藥用價(jià)值和保健功效日益引人關(guān)注，其中洛伐他汀作為紅曲主要的調(diào)脂因子成為科研熱點(diǎn)和紅曲產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重點(diǎn)。聚酮化合物MonacolinK是其中一種高效的降膽固醇藥物，由紅曲菌和土曲霉次級(jí)代謝產(chǎn)生，本實(shí)驗(yàn)研究紅曲霉的代謝產(chǎn)物MonacolinK，通過對(duì)紅曲霉次級(jí)代謝產(chǎn)物的測(cè)定，我們確定它產(chǎn)生MonacolinK最多的生長(zhǎng)期，然后我們對(duì)其菌液進(jìn)行RNA提取，通過對(duì)RNA的逆轉(zhuǎn)錄，我們得到cDNA，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，驗(yàn)證Mokf
3、和Mokh兩段目的基因的存在，以及它們對(duì)紅曲霉代謝產(chǎn)生MonacolinK的重要作用。對(duì)紅曲菌功能基因組的深入研究，以及相應(yīng)遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立與完善，我們還需更加努力。關(guān)鍵字：紅曲MonacolinKPCRRNA提取紅曲霉北京工商大學(xué)畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）AbstractThemedicinalvalueandhealthcarefunctionofredriceisbecomingmoreandmoreattractivetopeople,Lovastatinasredricemainlipidfactorbecomeresearchhotsp
4、otandfocusofredriceindustrydevelopment.MonacolinK,oneofpotentcholesterol-loweringpolyketidecompounds,couldbeproducedbyMonascussppandAspergillusterreus.weexperimentonMonacolinKwhichisoneofmonascusmetabolites.Accordingtothedeterminationofmonascussecondarymetabolites，Wedeterm
5、inedthegrowingperiodwhenitproduceMonacolinKfastest.ThenweextractRNAonitsmicrobial.BasedonthereversetranscriptionofRNA,weobtaincDNA,thenweamplifycDNAusingPCR.WevalidatetheexistenceoftwoaimgenesMokfandMokhandtheirimportancetomonascusproducingMonacolinK.WiththefurtherstudyonM
6、onascusfunctionalgenomics,aswellastheestablishmentandimprovementofthecorrespondinggenetictransformationsystem,wehavetoworkharder.Keywords：MonacolinKredricePCRextractRNAmonascus北京工商大學(xué)畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）第一章緒論71.1紅曲和紅曲霉71.1.1紅曲和紅曲霉的概述71.1.2紅曲和紅曲霉的發(fā)展前景71.2紅曲霉的生物學(xué)特征101.2.1紅曲霉的分類101.2.2紅曲霉
7、的形態(tài)學(xué)特征101.3紅曲霉的代謝產(chǎn)物111.3.1莫納克林K111.3.2紅曲紅素131.3.3桔霉素141.4紅曲霉的培養(yǎng)141.4.1固態(tài)發(fā)酵141.4.2液態(tài)發(fā)酵151.5洛伐他汀（Monacolink）151.5.1他汀化合物的簡(jiǎn)述151.5.2他汀類化合物的結(jié)構(gòu)161.5.3紅曲洛伐他汀161.6研究?jī)?nèi)容和意義17第二章實(shí)驗(yàn)材料與方法182.1實(shí)驗(yàn)材料182.1.1實(shí)驗(yàn)所用菌種182.1.2實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基182.1.3主要儀器和試劑藥品182.2實(shí)驗(yàn)方法202.2.1菌種培養(yǎng)202.2.2菌落觀察及菌落生長(zhǎng)情況及代謝產(chǎn)物測(cè)定21
8、2.2.3DNA的提取及檢測(cè)212.2.4RNA的提取22北京工商大學(xué)畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）2.2.5逆轉(zhuǎn)錄RNA成cDNA（建立20ul反應(yīng)體系）242.2.6PCR擴(kuò)增逆轉(zhuǎn)錄得到的
