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《大花萱草‘奶油卷'花蕾愈傷組織誘導(dǎo)和植株再生》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、應(yīng)用技術(shù)OhinascienceandTeChnOlOgyReview●I大花萱草‘奶油卷'花蕾愈傷組織誘導(dǎo)和植株再生①何月秋胡仲義胡銀莉(寧波城市職業(yè)技術(shù)學(xué)院溪門校區(qū)浙江寧波315502)[摘要]以大花萱草“奶油卷”花蕾為外植體材料,MS為基本培養(yǎng)基添加不同濃度BA和NAA,誘導(dǎo)其愈傷組織的形成和不定芽的分化,并建立其再生體系。MS+BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L是大花萱草“奶油卷”愈傷組織較佳的誘導(dǎo)培養(yǎng)基;MS+BAI.5mg/L+NAA0.1mg/L是較好不定芽的分化與增殖培養(yǎng)基:而I/2MS+IBA0.5m
2、g/L則是組培苗較適合的生根培養(yǎng)基。生根小苗移栽至滅菌的基質(zhì)(泥炭土:蛭石=l:1)經(jīng)過一定時間的煉苗成活可達到96%,移栽到大田后均可成活。[關(guān)鍵詞]大花萱草“奶油卷”花蕾愈傷組織植株再生中圖分類號:Q949.742.2文獻標(biāo)識碼:A文章編號:1009914X(2009)32—029902大花螢草“奶油卷”系百合科萱草屬多年生草本植物,是從萱草中雜交愈傷組織誘導(dǎo):MS+BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L;MS+BAI.Omg/L+NAAO.2mg/選育出的優(yōu)良多倍體宿根花卉新品種,也是大花萱草中唯一重瓣品種。其株L:
3、MS+BAI.5m【g/L+NAAO.2mg/L:MS+BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L。高30~40cm,葉綠色,花金黃色,花朵碩大,直徑可達8~10cm,每株可著花6~不定芽誘導(dǎo)和增殖:MS+BAO.5mg/L+NAA0.1mg/L:MS+BAI.Omg/L+NAAO.1mg/8朵,花期6月中旬~8月中旬。該品種具有抗寒、抗旱、抗病蟲害、耐L:MS+BA1.5mg/L+NAAO.1mg/L。鹽堿、花期長和綠色期長等特點,是理想的觀花賞葉的地被植物和優(yōu)良的園根的誘導(dǎo):I/2MS+IBA0.2mg/L:1/2Ms+I
4、BAO.5mg/L:I/2MS+IBAI.Omg/L。林綠化新材料(1)。但其結(jié)實率低,種子繁殖變異大,而目前采用的分株繁殖,以上培養(yǎng)基蔗糖濃度為3%,瓊脂濃度為0.5%,pH為6.2~6.4。不僅需要大片的土地和栽培母體,而且繁殖系數(shù)低、周期長,一般一個植株每13培養(yǎng)室的環(huán)境要求年僅可繁殖34株,難以滿足市場需求。采用組織培養(yǎng)方法可以大大的提高培養(yǎng)室溫度25±2℃、光強l500~2O00Lx、光照14h/d。繁殖系數(shù),而且可以打破季節(jié)限制。程霖衍等(1)、(2)分別以花梗、花托為2結(jié)果與分析外植體對大花萱草“奶油卷”進行組
5、織培養(yǎng)的研究,本文則以花蕾為材料,2.1升汞不同處理時間對花蕾滅菌效果的影響誘導(dǎo)其愈傷組織和不定芽的形成,摸索出一套建立大花萱草“奶油卷”高效由(表一)可以看出,升汞處理不同時問對外植體滅菌效果有較大的影響。再生體系,為該植物的工廠化育苗提供技術(shù)參數(shù)。升汞處理時間越短,外植體污染率越高,升汞處理時間在lmin時,其污染率有1材料及方法85%:升汞處理13min時,污染率明顯下降,只有25%。不過實驗中觀察到隨著升1.1無菌材料的準(zhǔn)備汞處理時間的延長,外植體的枯死數(shù)量明顯升高。升汞處理13min時污染率雖選用寧波江東綠城園林綠
6、化有限公司從國外引進的大花萱草“奶油卷”明顯下降但外植體枯死嚴(yán)重,綜合考慮升汞處理10min為最適宜的滅菌時間。新品種,于6~8月份盛花期晴天采取未開放的小花蕾。用自來水沖洗,放入22愈傷組織的誘導(dǎo)及不定芽的分化燒杯然后再加入數(shù)滴洗潔精搖晃浸泡約1小時,用清水洗凈。在超凈工作臺在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)15d后,外植體開始增厚、膨大并有愈傷組織形用75%酒精表面浸泡30s,0.1%升汞消毒不同,同時要不斷地搖晃外植體,再用成。外植體在不同誘導(dǎo)培養(yǎng)基上所形成愈傷組織的時問和生長情況各不相同無菌水沖洗4~5次。切去花蕾的頂部至露出子房為
7、止,然后對半切開,接種(如表2)。在2、3、4號培養(yǎng)基上,15d就有愈傷組織出現(xiàn),而在1號培養(yǎng)在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。基上直到20d才出現(xiàn)愈傷組織。培養(yǎng)40d后,1、2、4號培養(yǎng)基上的外植體1.2培養(yǎng)基的設(shè)計誘導(dǎo)率不到50%,3號培養(yǎng)基誘導(dǎo)率達到60%。愈傷組織在分化過程中,除能形實驗中參照部分大花螢草組培資料”-“15)*“,以Ms為基本培養(yǎng)基附加成分化苗以外,在3號培養(yǎng)基上還會發(fā)生芽旁長芽的現(xiàn)象,有的在芽基部分化不同濃度的BA、NAA、IAA,設(shè)計大花萱草“奶油卷”各個階段的培養(yǎng)基:出根成為完整的植株。表1升汞不同處理時間對花蕾
8、滅菌效果的影響表3不同激素組合對不定芽分化和增殖的影響TablelThesterileeffectofHgcl2varioustreatmenttimeonTable3TheeffectofvariOUShormonecombinationoiltheflowerbudsadventiti