廣藿香愈傷組織誘導(dǎo)和分化再生植株的研究

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1、廣藿香愈傷組織誘導(dǎo)和分化再生植株的研究作者：林小樺，賀紅，吳立蓉，張燕玲，劉星【摘要】　　【目的】開展廣藿香愈傷組織的誘導(dǎo)及分化再生植株的研究，建立高效的組織培養(yǎng)再生系統(tǒng)?！痉椒ā恳詮V藿香葉片、帶節(jié)莖、不帶節(jié)莖及根尖為材料進(jìn)行離體培養(yǎng)，篩選影響愈傷組織誘導(dǎo)、增殖及分化的因素?！窘Y(jié)果】6芐氨基嘌呤(BA)或N苯基N123噻二唑5脲(TDZ)與α萘乙酸(NAA)配合有利于愈傷組織的誘導(dǎo)，BA的適宜濃度為02～05mg/L；4種外植體中，帶節(jié)莖及不帶節(jié)莖較易誘導(dǎo)出愈傷組織。BA和NAA配合使用能較好地促進(jìn)愈傷組織的增殖；培養(yǎng)30d的愈傷組織較60d的具有更強(qiáng)的增殖

2、和分化能力。BA有利于愈傷組織的分化；葉片誘導(dǎo)的愈傷組織分化能力較強(qiáng)?！窘Y(jié)論】建立了高效的廣藿香愈傷組織誘導(dǎo)及分化再生植株的離體再生體系?！娟P(guān)鍵詞】廣藿香/生長和發(fā)育；離體培養(yǎng)；愈傷組織　　Abstract:ObjectiveCallusinductionandplantletsregenerationofPogostemoncablin(Blanco)Benth.arestudiedtoestablishahighefficiencyregenerationsystemfortissueculture.MethodsTheleafsegments,nodularstemsegme

3、nts,stemsegmentsandroottipsfromPogostemoncablin(Blanco)Benth.ultiplicationanddifferentiationofcallusinopurine(BA)orthidiazuron(TDZ)binedalconcentrationsofBAg/L.Nodularstemsegmentsandstemsegmentsostsuitableexplantsforcallusinduction.ThemediumcontainingBAandNAApromotedthemultiplicationofcallus.Th

4、emultiplicationrateanddifferentiationrateof30daycallusuchhigherthanthoseof60daycallus.BAleafsegmentsexertedahigherdifferentiationrate.ConclusionAhighefficiencyregenerationsystemofcallusinductionandplantregenerationfromPogostemoncablin(Blanco)Benth.hasbeenestablished.　　Keyp;development;INVIT

5、ROCULTURE;CALLUS　　廣藿香［Pogostemoncablin(Blanco)Benth.］為唇形科刺蕊草屬植物，以干燥地上部分入藥，其性辛、微溫。具有芳香化濕，開胃止嘔，發(fā)表解暑的功效［1］。廣藿香為廣東道地藥材，“十大廣藥”之一，是多種著名中成藥“藿香正氣丸”、“藿膽丸”等以及現(xiàn)代中藥制劑“抗病毒口服液”的主要原料。廣藿香原產(chǎn)于菲律賓、馬來西亞等國，最早自宋代引入我國，栽培歷史悠久。廣藿香生產(chǎn)中面臨青枯病的危害，該病由青枯菌（RalstoniaSolanacearum）侵染所致，為典型的維管束病害［2~3］。在我國產(chǎn)區(qū)栽培的廣藿香，罕見開花結(jié)實［4］，長期以來，生產(chǎn)

6、上采用扦插繁殖，病原體通過無性繁殖傳遞，且逐代積累，危害越來越嚴(yán)重，迫切需要進(jìn)行抗病品種的選育。近年來，基因轉(zhuǎn)移及人工誘變等改良藥用植物農(nóng)藝性狀的技術(shù)，為廣藿香抗病育種提供了可能，而要開展相關(guān)的研究，首先要建立高效的組織培養(yǎng)再生系統(tǒng)。本文以廣藿香多種外植體為材料，篩選影響廣藿香愈傷組織誘導(dǎo)、增殖及分化的多種因素，以期建立高效的愈傷組織誘導(dǎo)及分化再生植株的離體再生系統(tǒng)，為遺傳轉(zhuǎn)化及人工誘變育種奠定基礎(chǔ)，現(xiàn)報道如下?！　?材料和方法　　11材料試驗　　材料采自廣州中醫(yī)藥大學(xué)藥圃，選擇生長健壯、無病蟲害的廣藿香單株，取其頂芽、帶節(jié)莖及葉片；經(jīng)蒸餾水沖洗干凈后，用體積分?jǐn)?shù)為70%乙醇浸泡3

7、0s，轉(zhuǎn)入1g/L的HgCl2溶液浸泡消毒10min，再用無菌水漂洗5～8次，把殘留HgCl2漂洗干凈，接種于MurashgeandTucker（MT）+02mg/L6芐氨基嘌呤(BA)培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)叢芽的生成，待叢芽長出后將其移至MT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，試管苗長至5～7cm時即可作材料使用。　　12方法　　121外植體培養(yǎng)　　取廣藿香試管苗的葉片、帶節(jié)莖、不帶節(jié)莖及根尖為外植體進(jìn)行培養(yǎng)。外植體在培養(yǎng)基中的放置方式為：葉片及根尖平放，帶節(jié)莖及不帶節(jié)莖為