實驗四食品中淀粉的測定方法

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1、實驗四食品中淀粉的測定方法Methodfordeterminationofstarchinfoods(一)目的掌握酶水解法測定各類食品中淀粉含量，了解酸水解法。(二)原理（酶水解法）樣品經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類后，其中淀粉用淀粉酶水解成雙糖，再用鹽酸將雙糖水解成單糖，最后按還原糖測定，并折算成淀粉。(三)儀器與試劑1.0.5%淀粉酶溶液：稱取淀粉酶0.5g，加100ml水溶解，加入數(shù)滴甲苯或三氯甲烷，防止長霉，貯于冰箱中。2.碘溶液：稱取3.6g碘化鉀溶于20ml水中，加入1.3g碘，溶解后加水稀釋至10

2、0ml。3.乙醚。4.85%乙醇。其余試劑同GB5009.8—85《食品中蔗糖的測定方法》。(四)操作步驟1.樣品處理稱取2～5g樣品，置于放有折疊濾紙的漏斗內(nèi)，先用50ml乙醚分5次洗除脂肪，再用約100ml85%乙醇洗去可溶性糖類，將殘留物移入250ml燒杯內(nèi)，并用50ml水洗濾紙及漏斗，洗液并入燒杯內(nèi)，將燒杯置沸水浴上加熱15min，使淀粉糊化，放冷至60℃以下，加20m1淀粉酶溶液，在55～60℃保溫1h，并時時攪拌。然后取1滴此液加1滴碘溶液，應(yīng)不顯現(xiàn)藍(lán)色，若顯藍(lán)色，再加熱糊化并加20ml淀粉

3、酶溶液，繼續(xù)保溫，直至加碘不顯藍(lán)色為止。加熱至沸，冷后移入250ml容量瓶中，并加水至刻度，混勻，過濾，棄去初濾液。取50ml濾液，置于250ml錐形瓶中，加5ml6N鹽酸，裝上回流冷凝器，在沸水浴中回流1h，冷后加2滴甲基紅指示液，用20%氫氧化鈉溶液中和至中性，溶液轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中，洗滌錐形瓶，洗液并入100ml容量瓶中，加水至刻度，混勻備用。2.測定按GB5009.7—85《食品中還原糖的測定方法》。同時量取50ml水及與樣品處理時相同量的淀粉酶溶液，按同一方法做試劑空白試驗。3.計算?式中

4、：X1——樣品中淀粉的含量，%；A1——測定用樣品中還原糖的含量，mg；A2——試劑空白中還原糖的含量，mg；0.9——還原糖(以葡萄糖計)換算成淀粉的換算系數(shù)；m1——稱取樣品質(zhì)量，g；V1——測定用樣品處理液的體積，ml。附：第二法酸水解法1.原理樣品經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類后，其中淀粉用酸水解成具有還原性的單糖，然后按還原糖測定，并折算成淀粉。2.試劑2.1乙醚。2.285%乙醇溶液。2.36N鹽酸溶液。2.440%氫氧化鈉溶液。2.510%氫氧化鈉溶液。2.6甲基紅指示液：0.2%乙醇溶液。2.7

5、精密pH試紙。2.820%乙酸鉛溶液。2.910%硫酸鈉溶液。其余試劑同GB5009.7—85。3.儀器3.1水浴鍋。3.2高速組織搗碎機(jī)：1200r/min。3.3皂化裝置并附250ml錐形瓶。4.操作方法4.1樣品處理4.1.1糧食、豆類、糕點、餅干等較干燥的樣品：稱取2.0～5.0g磨碎過40目篩的樣品，置于放有慢速濾紙的漏斗中，用30ml乙醚分三次洗去樣品中脂肪，棄去乙醚。再用150ml85%乙醇溶液分?jǐn)?shù)次洗滌殘渣，除去可溶性糖類物質(zhì)。并濾干乙醇溶液，以100ml水洗滌漏斗中殘渣并轉(zhuǎn)移至250m

6、l錐形瓶中，加入30ml6N鹽酸，接好冷凝管，置沸水浴中回流2h?；亓魍戤吅螅⒓粗昧魉欣鋮s。待樣品水解液冷卻后，加入2滴甲基紅指示液，先以40%氫氧化鈉溶液調(diào)至黃色，再以6N鹽酸校正至水解液剛變紅色為宜。若水解液顏色較深，可用精密pH試紙測試，使樣品水解液的pH約為7。然后加20ml20%乙酸鉛溶液，搖勻，放置10min。再加20ml10%硫酸鈉溶液，以除去過多的鉛。搖勻后將全部溶液及殘渣轉(zhuǎn)入500ml容量瓶中，用水洗滌錐形瓶，洗液合并于容量瓶中，加水稀釋至刻度。過濾，棄去初濾液20ml，濾液供測定

7、用。4.1.2蔬菜、水果、各種糧豆含水熟食制品：按1∶1加水在組織搗碎機(jī)中搗成勻漿(蔬菜、水果需先洗凈、晾干，取可食部分)。稱取5～10g勻漿(液體樣品可直接量取)，于250ml錐形瓶中，加30ml乙醚振搖提取(除去樣品中脂肪)，用濾紙過濾除去乙醚，再用30ml乙醚淋洗兩次，棄去乙醚。以下按4.1.1自“再用150ml85%乙醇溶液”起依法操作。4.2測定按GB5009.7—85中4.2或7操作。5.計算?式中：X2——樣品中淀粉含量，%；A3——測定用樣品中水解液中還原糖含量，mg；A4——試劑空白中

8、還原糖的含量，mg；m2——樣品質(zhì)量，g；V2——測定用樣品水解液體積，ml；500——樣品液總體積，ml；0.9——還原糖折算成淀粉的換算系數(shù)。