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1、實驗二食品中淀粉的測定第一法?酶水解法 第二法?酸水解法第一法?酶水解法一、目的與要求：1、了解食品中淀粉含量的分析原理及分析方法。2、掌握用酶水解法和酸水解法測定淀粉的方法。二、實驗原理樣品經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類后，其中淀粉用淀粉酶水解成雙糖，再用鹽酸將雙糖水解成單糖，最后按還原糖測定，并折算成淀粉。三、試劑1、0.5％淀粉酶溶液2、碘溶液3、乙醚4、85％乙醇5、6N鹽酸6、甲基紅指示液7、20％氫氧化鈉溶液。8、堿性酒石酸銅甲液9、堿性酒石酸銅乙液10、0.1000N高錳酸鉀標準溶液11、硫酸鐵溶液四、操作方法1、樣品處理：稱取2-5克樣品，置于放有折疊濾紙的
2、漏斗內(nèi)，先用50毫升乙醚分5次洗除脂肪，再用約100毫升85％乙醇洗去可溶性糖類，將殘留物移入250毫升燒杯內(nèi)，并用50毫升水洗濾紙及漏斗，洗液并入燒杯內(nèi)，將燒杯置沸水浴上加熱15分鐘，使淀粉糊化，放冷至60℃以下，加20毫升淀粉酶溶液，在55-60℃保溫1小時，并時時攪拌。然后取1滴此液加1滴溶液，應(yīng)不顯現(xiàn)藍色，若顯藍色，再加熱糊化并加20毫升淀粉酶溶液，繼續(xù)保溫，直至加碘不顯藍色為止。加熱至沸，冷后移入250毫升容量瓶中，并加水至刻度，混勻，過濾，棄去初濾液。取50毫升濾液，置于250毫升錐形瓶中，并加水至刻度，沸水浴中回流1小時，冷后加2滴甲基紅指示液，用20
3、％氫氧化鈉溶液中和至中性，溶液轉(zhuǎn)入100毫升容量瓶中，洗滌錐形瓶，洗液并人100毫升容量瓶中，加水至刻度，混勻備用。2、測定：吸取50毫升處理后的樣品溶液，于400毫升燒杯內(nèi)，加入25毫升堿性酒石酸銅甲液及25毫升乙液，于燒杯上蓋一表面皿，加熱，控制，在4分鐘內(nèi)沸騰，再準確煮沸2分鐘，趁熱用鋪好石棉的古氏坩堝或c4垂融坩堝抽濾，并用60℃熱水洗滌燒杯及沉淀，至洗液不呈堿性為止。將古氏坩堝或垂融坩堝放回原400毫升燒杯中，加25毫升硫酸鐵溶液及25毫升水，用玻棒攪拌使氧化亞銅完全溶解，以0.1000N高錳酸鉀標準溶液滴定至微紅色為終點。同時量取50毫升水及與樣品處理時
4、相同量的淀粉酶溶液，按同一方法做試劑空白實驗。計算：X1=((A1-A2)×0.9)/(m1×50/250×V1/100×1000)×100X1：樣品中淀粉的含量，％；A1：測定用樣品中還原糖的含量，mg；A2：試劑空白中還原糖的含量，mg；0.9：還原糖(以葡萄糖計)換算成淀粉的換算系數(shù)；m1：稱取樣品質(zhì)量，g；V1：測定用樣品處理液的體積，毫升(m1)。第二法?酸水解法一、原理：樣品經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類后，其中淀粉用酸水解成具有還原性的單糖，然后按還原糖測定，并折算成淀粉。二、試劑：1、乙醚；2、85％乙醇溶液；3、6N鹽酸溶液；4、40％氫氧化鈉溶液；5、1
5、0％氫氧化鈉溶液；6、甲基紅指示液：0.2％乙醇溶液；7、精密PH試紙；8、20％乙酸鉛溶液；9、10％硫酸鈉溶液；10、乙醚；11、堿性酒石酸銅甲液；12、堿性酒石酸銅乙液；13、硫酸鐵；14、0.1000N高錳酸鉀標液三、儀器：1、水浴鍋2、高速組織搗碎機：1200r／min3、皂化裝置并附250毫升錐形瓶。四、操作方法：1、?樣品處理A、糧食，豆類、糕點、餅干等較干燥的樣品，稱取2.0-5.0克磨碎過40目篩的樣品，置于放有慢速濾紙的漏斗中，用30毫升乙醚分三次洗去樣品中的脂肪，棄去乙醚。再用150毫升85％乙醇溶液分數(shù)次洗滌殘渣，除去可溶性糖類物質(zhì)。并濾干乙
6、醇溶液，以100毫升水洗滌漏斗中殘渣并轉(zhuǎn)移至250毫升錐形瓶中，加入30毫升6N鹽酸，接好冷凝管，置沸水浴中回流2小時。回流完畢后，立即置流水中冷卻。待樣品水解液冷卻后，加入2滴甲基紅指示液，先以40％氫氧化鈉溶液調(diào)至黃色，再以6N鹽酸校正至水解液剛變紅色為宜。若水解液顏色較深，可用精密PH試紙測試，使樣品水解液的PH約為7。然后加20毫升20％乙酸鉛溶液，搖勻，放置10分鐘。再加20毫升10％硫酸鈉溶液，以除去過多的鉛。搖勻后將全部溶液及殘渣轉(zhuǎn)入500毫升容量瓶中，用水洗滌錐形瓶，洗液合并于容量瓶中，加水稀釋至刻度。過濾，棄去初濾液20毫升，濾液供測定用。四、操作
7、方法：1、?樣品處理B、蔬菜、水果、各種糧豆含水熟食制品：按1：1加水在組織搗碎機中搗成勻漿(蔬菜、水果需先洗凈、晾干、取可食部分)稱取5-10克勻漿(液體樣品可直接量取)，于250毫升錐形瓶中，加30毫升乙醚振搖提取(除去樣品中脂肪)，用濾紙過濾除去乙醚，再用30毫升乙醚淋洗兩次，棄去乙醚。以下按A自“再用150毫升85％乙醇溶液”起依法操作。2、測定：吸取50毫升處理后的樣品溶液，于400毫升燒杯內(nèi)，加25毫升堿性酒石酸銅甲液及25毫升乙液。于燒杯上蓋一表面皿加熱，控制在4分鐘沸騰再準確煮沸2分鐘，趁熱用鋪好石棉的古氏坩堝或G4垂融坩堝抽濾，并用60℃熱水洗
