苦蘵多糖的提取及體外抗氧化活性的研究

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1、苦蘵多糖的提取及體外抗氧化活性的研究【摘要】目的研究苦蘵多糖的醇沉條件及其體外抗氧化活性。方法經(jīng)超聲提取，除脂，除蛋白等工藝得到苦蘵粗多糖，并考察了醇沉條件(醇沉比、溫度、pH、時(shí)間、濃縮比)對多糖沉淀的影響。采用體外實(shí)驗(yàn)研究了苦蘵多糖對·OH和DPPH的清除作用及對大鼠肝勻漿脂質(zhì)過氧化的抑制作用。結(jié)果在最佳的醇沉條件(濃縮比4∶1,溫度-20℃，醇沉?xí)r間1h，醇沉比為1∶4，pH為7)下，多糖提取率為%。多糖對大鼠肝勻漿脂質(zhì)過氧化的抑制率可達(dá)80%,對·OH和DPPH也都有很好的清除作用。結(jié)論苦蘵果實(shí)

2、中多糖有良好的體外抗氧化活性?！娟P(guān)鍵詞】苦蘵多糖抗氧化Abstract:ObjectiveTostudytheantioxidantactivitiesofpolysaccharideextractedfromPhysalispubescensL..MethodsPolysaccharidewasextractedfromPhysalispubescensL.fruitbyultrasonicmethod,thecontentwasdeterminedbyspectrophotometry,theinv

3、itroscavengingactivitiesofpolysaccharideonhydroxylradicalandDPPH,anditsprotectiveeffectsonlipidperoxidationofliverhomogenateinratswereinvestigatedinthishadstrongscavengingeffectonhydroxylradicalandDPPH,itseffectonsuperoxideradicalwasweek,anditshowedsigni

4、ficantprotectiveeffectonlipidperoxidationofliverhomogenateinTheseresultssuggestthatthepolysaccharideextractedfromPhysalispubescensL.hasgoodantioxidantactivitiesinvitro.Keywords:PhysalispubescensL.;Polysaccharide;Antioxidationproperty苦蘵,別名：蘵、黃蒢(《爾雅》)，小苦耽(

5、《本草拾遺》)，燈籠泡草(《廣東醫(yī)學(xué)》祖國醫(yī)學(xué)版(2)：)，響鈴草、響泡子(《湖南藥物志》)，綠燈、野綠燈(《上海常用中草藥》)。茄科酸漿屬植物，拉丁名：PhysalispubescensL.以果、根或全草入藥，性味苦、寒。功用主治：清熱解毒，利尿消腫，消腫散結(jié)，涼血止血?，F(xiàn)代研究報(bào)道，其化學(xué)成分為酸漿果紅素，即玉蜀黍黃素二棕櫚酸酯［1］。但對其多糖的研究國內(nèi)外未見報(bào)道，為深入開發(fā)這一豐富自然資源，本實(shí)驗(yàn)對其多糖進(jìn)行了提取、純化及抗氧化的研究，為苦蘵的中藥現(xiàn)代化奠定了一定的理論基礎(chǔ)?！?材料與方法試劑與

6、儀器DPPH試劑美國Sigma公司，2-硫代巴比妥酸上海國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，其他試劑均為國產(chǎn)分析純；5810R型冷凍離心機(jī)德國Eppendorf公司，723型可見分光光度計(jì)山東高密彩虹分析儀器有限公司，RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上海雅榮生化設(shè)備儀器有限公司，BP221S型電子天平德國賽多利斯。多糖的提取及初步分離純化稱取苦蘵鮮果1000g烘干，加一定量的水60W超聲min，000r/min離心min，上清液抽濾后濃縮，用醋酸乙酯加熱回流1h進(jìn)行除脂脫色［2］，再用Sevage法［3］去除蛋白得粗多

7、糖。醇沉條件的研究濃縮比將粗多糖溶液濃縮后，分別加入4倍體積95%的乙醇，4℃下醇沉1h。多糖用一定量的蒸餾水溶解后測定含量。溫度取3份粗糖溶液分別加入4倍體積的95%乙醇，然后置于-20℃，4℃，室溫進(jìn)行醇沉。溶解后分別測其多糖含量。醇沉比取5份粗糖液分別以1∶1,1∶2，1∶3，1∶4，1∶5比例加入乙醇。在4℃醇沉1h。溶解后測多糖含量。醇沉?xí)r間［4］分別選擇4，8，12，16，18，20，2h進(jìn)行多糖含量檢測，其他條件均按摸索的最佳條件設(shè)置。pH分別選擇pH為4，5，6，7，8，9,6個值進(jìn)行多

8、糖含量檢測，其他條件均按摸索的最佳條件設(shè)置。體外抗氧化的研究對·OH的抑制作用［5］采用亞鐵離子催化過氧化氫產(chǎn)生·OH，由于·OH可特異地使番紅褪色，根據(jù)褪色程度用比色法來測量·OH的含量。ml體系中包含150mmol/L,pH=的磷酸緩沖溶液，260μg/ml番紅花紅，/L乙二胺四乙酸二鈉(Fe2+﹣EDTA),1%，各濃度糖液。對肝脂質(zhì)過氧化的抑制［6］過氧化脂質(zhì)的二級分解產(chǎn)物丙二醛能與硫代巴比妥酸反應(yīng)生成紅色產(chǎn)物，在53nm處有最大吸