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《米非司酮誘導(dǎo)人宮頸癌Hela細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、米非司酮誘導(dǎo)人宮頸癌Hela細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究【摘要】 目的探討米非司酮對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用及作用機(jī)制。方法體外培養(yǎng)人宮頸癌Hela細(xì)胞，流式細(xì)胞技術(shù)分析不同濃度米非司酮對(duì)Hela細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞周期分布的影響，用Westernblot法檢測(cè)米非司酮對(duì)Hela細(xì)胞中NF-κBp65蛋白表達(dá)水平的影響。結(jié)果、10、20μmol/L的米非司酮均能使Hela細(xì)胞凋亡率明顯增加，使S期、G2/M期細(xì)胞比例減少，G0/G1期細(xì)胞比例顯著增加，且作用呈劑量依賴性；隨著米非司酮濃度的增加，Hela細(xì)胞中NF-κBp65蛋白表
2、達(dá)水平逐漸下降。結(jié)論米非司酮可能通過NF-κB信號(hào)通路下調(diào)NF-κBp65蛋白表達(dá)，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞周期，誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡?！娟P(guān)鍵詞】人宮頸癌；Hela細(xì)胞株；米非司酮；凋亡；細(xì)胞周期；NF-κB；p65Abstract:ObjectiveToinvestigatetheregulatoryeffectofmifepristoneonthecellapoptosisofhumancervicalcancercelllineHelaandtheunderlyingmechanisms.MethodsHumancervicalcan
3、cercelllineHelawasculturedinvitro.Flowcytometryanalysistechniquewasusedtodeterminethechangesofcellcycledistributionandcellapoptosispercentageaftertreatmentwithdifferentconcentrationsofmifepristone.Westernblotwasperformedtoexaminetheeffectofmifepristoneontheexpression
4、ofNF-κBp6protEinofHelacellline.Results,10and0μmol/LmifepristonesignificantlyincreasedthecellapoptosispercentageandtheproportionofcellsinG0/G1phaseofHelacellsanddecreasedtheproportionofcellsinSandG2/Mphasesinadose-dependingmanner.Withtheincreaseofmifepristoneconcentra
5、tions,theexpressionofNF-κBp6wasgraduallydownregulatedinHelacells.ConclusionMifepristonecanregulatecellcycledistributionandacceleratecellapoptosisbydownregulatingtheexpressionofNF-κBp6protEInincelllineHelaviaNF-κBsignalingpathway. Keywords:humancervicalcancer;celllin
6、eHela;mifepristone;apoptosis;cellcycle;NF-κB;p65 米非司酮(mifepristone,MIF)是人工合成的抗孕激素藥物，目前在臨床上主要用于終止早孕、引產(chǎn)等。近年研究發(fā)現(xiàn)，米非司酮還具有抗腫瘤、增強(qiáng)抗癌藥物療效等其他臨床新用途。核因子－κB(nuclearfactorofkappabinding,NF-κB)是一種具有多向調(diào)節(jié)功能的核轉(zhuǎn)錄因子，參與細(xì)胞的增殖、凋亡和癌基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控的信號(hào)傳遞過程，并被證實(shí)和宮頸癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)［1-2］，NF-κBp65則是NF-κB在體內(nèi)發(fā)
7、揮生理功能的主要亞單位之一。本實(shí)驗(yàn)的目的是研究不同濃度的米非司酮對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞生長(zhǎng)及對(duì)NF-κBp65蛋白表達(dá)的影響，探討米非司酮對(duì)宮頸癌的治療作用及其可能的作用機(jī)制，為宮頸癌的防治尋找新途徑。 1材料和方法材料人宮頸癌Hela細(xì)胞株，米非司酮純粉劑，DMEM干粉，碘化丙啶(PI)、MTT，NF-κBp65抗體。方法細(xì)胞培養(yǎng)常規(guī)復(fù)蘇凍存的人宮頸癌Hela細(xì)胞，接種于盛有DMEM培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中，在37℃、5%CO2、飽和濕度培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，隔日更換新培養(yǎng)液一次。平均3～4天傳代一次。實(shí)驗(yàn)分組將培養(yǎng)的Hela細(xì)胞隨機(jī)分為用藥
8、組和對(duì)照組。用藥組：分為3組，分別含有濃度為5、10、20μmol/L的米非司酮，各組DMEM培養(yǎng)液中乙醇終濃度小于%，含有7%胎牛血清。對(duì)照組：培養(yǎng)液中不含米非司酮，只含與用藥組相同濃度的乙醇和胎牛血清。實(shí)驗(yàn)方法流式細(xì)胞技術(shù)(FCM)檢測(cè)細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡率取
