積雪草甙誘導(dǎo)人宮頸癌hela細(xì)胞凋亡及其機(jī)制探討

積雪草甙誘導(dǎo)人宮頸癌hela細(xì)胞凋亡及其機(jī)制探討

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1、學(xué)術(shù)誠(chéng)信承諾本人鄭重聲明:所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得研究成果。盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果,也不包含為獲得佳木斯大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書所使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中做了明確的說明并表示了謝意。簽名:盈皇且日期:皇翌6:生:蘭立關(guān)于論文使用授權(quán)的說明本人完全了解佳木斯大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件,允許論文被查閱和借閱;學(xué)??梢怨颊撐牡娜炕虿糠謨?nèi)容

2、,可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文。(保密的論文在解密后應(yīng)遵循此規(guī)定)簽名:塑必導(dǎo)師簽名:高魚:!羔日期:超6:絲放中太捷要佳本矩大學(xué)碩士研究生論文中文摘要目的:研究積雪草甙對(duì)體外培養(yǎng)的人宮頸癌Hela細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制和誘導(dǎo)凋亡的作用,并通過檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白Survivin和CaspaSe.3來分析其凋亡的分子機(jī)制。方法:應(yīng)用MTT比色法觀察積雪草甙對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用,應(yīng)用倒置顯微鏡和HE染色法觀察藥物作用后細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)改變。TuNEL法分析細(xì)胞凋亡情況。免疫組化sABc法檢測(cè)survivi

3、n和caspase-3蛋白在積雪草甙誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡中的作用。結(jié)果:積雪草甙可明顯抑制宮頸癌Hela細(xì)胞的生長(zhǎng)。MTT法顯示濃度為3pmol幾、6umol/L、12“mol/L、24umol/L、48umol/L和96umo兒的積雪草甙分別作用6h、24h和48h后,細(xì)胞的抑制率分別隨藥物濃度的升高和時(shí)間的延長(zhǎng)而升高,呈時(shí)間劑量依賴性。不同濃度積雪草甙作用后,倒置顯微鏡及HE染色法證實(shí)腫瘤細(xì)胞形態(tài)呈凋亡特征性改變。n烈EL法可檢測(cè)到細(xì)胞內(nèi)呈棕黃色顆粒的凋亡細(xì)胞。濃度為6pmol/L、12pmol/L、24umo

4、l/L和48u啪l/L的積雪草甙作用6h后,細(xì)胞凋亡率分別為(1.60土0.99)%、(2.07士O.16)%、(3.41士O.37)%和(5.70士0.28)%,作用24h后細(xì)胞凋亡率分別為(5.40土1.19)%、(14.68士1.41)%、(20.15士1.57)%和(31.01士1.38)%,作用48小時(shí)后凋亡率分別為(6.78士1.23)%、(21.77士1.64)%、(30.51士1.19)%和(38.77士1.28)%。積雪草甙作用Hela細(xì)胞6h一48h時(shí),隨著濃度增大,細(xì)胞凋亡率增大,相同濃度下4

5、8h細(xì)胞凋亡率高于24h和6h,即呈時(shí)間劑量依賴性。48pmol幾積雪草甙作用48h后免疫組化sABc檢測(cè)sllr“vill蛋白表達(dá)率為(44.24士3.28)%與對(duì)照組(82.15±5.51)%相比有顯著性差異(p<0.01)。Caspase-3蛋白表達(dá)率為(28.45士2.43)%與對(duì)照組(2.17±1.88)%相比有顯著性差異(p<0.叭)。結(jié)論:積雪草甙對(duì)體外培養(yǎng)的人宮頸癌Hela細(xì)胞的生長(zhǎng)有顯著的抑制作用和誘導(dǎo)凋亡作用。關(guān)鍵詞:積雪草細(xì)胞凋亡SurvivinCasDase.3A8sTRcT佳本斯大學(xué)碗士研

6、究生論文ABSTRCTObjective:Toinvestigate鋤tipr01iferation鯽di11ducingapoptosisofhumancenrixcancerhelacellsinducedbvasiaticoside.Themecl砌ismsofasiaticoside—reducedapoptosisbymeasuretheexpressionsofSuⅣivinalldCaSpase-3.Methods:Thea芏1tiproliferationactivitiesofasiaticosi

7、dewereeVahlatedonHelacellsbymeallsofMTTassay.ThcmoIphologyicalchaIlgesofaSiaticosideonHelacellswereobseⅣcd11nderlightmicroscopeaI]ldwithHEs詛imng.Apoptosisinducedbyasiaticoside、vaSdetectedbvTUNELmetllod.Theef佟ctofasiaticosideontheexpressionofSurvivina11dCaspase

8、-3proteins、張sdetectedbyuSingSABCmctl】od.Results:Asiaticosidewasef佟ctiveininhibidngt11epmliferationofHelacells.3umol,1、6um01/1、12l上mol,L、24pm01/L、48umol,L、96pmol/Lofasiaticosidecaus

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