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《水、乙醇及微波輔助法提取咖啡中綠原酸的工藝研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、水、乙醇及微波輔助法提取咖啡中綠原酸的工藝研究-農(nóng)學(xué)論文水、乙醇及微波輔助法提取咖啡中綠原酸的工藝研究袁俊，阮鳴，周益倩，陳靜（南京曉莊學(xué)院生物化工與環(huán)境工程學(xué)院，南京２１１１７１）摘要：采用正交設(shè)計對水浸提法、水浸提＋微波輔助法、乙醇浸提法、乙醇浸提＋微波輔助法進行比較，以咖啡提取物中綠原酸的含量為評判指標(biāo)，考察時間、溫度、乙醇體積分?jǐn)?shù)、微波功率等對提取物有效成分綠原酸含量的影響。采用高效液相色譜法測定該成分的含量。結(jié)果表明，綠原酸最佳提取工藝為乙醇浸提＋微波輔助法，最佳提取條件為微波時間5min，功率３０
2、０Ｗ，乙醇體積分?jǐn)?shù)６０％，此條件下提取綠原酸的含量最高。影響提取的主次因素為：乙醇體積分?jǐn)?shù)＞功率＞微波時間。關(guān)鍵詞：咖啡；綠原酸；高效液相色譜法；正交設(shè)計中圖分類號：Ｓ５７１．２文獻標(biāo)識碼：A文章編號：0439－８114（２０15）05－1146-04DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.05.030收稿日期：２０１４－０７－１０基金項目：２０１３年度江蘇省高校自然科學(xué)研究面上項目（１３ＫＪＤ１８０００１）作者簡介：袁?。ǎ保梗罚玻?，女，江蘇南京人，副教授，博士，主要
3、從事分子生物學(xué)、生物化學(xué)的教學(xué)和科研工作，（電話）１３９５１９７９９９０（電子信箱）１４３９０３９＠ｑｑ．ｃｏｍ。綠原酸又名３－咖啡酰奎尼酸，是植物在有氧呼吸過程中經(jīng)磷酸戊糖途徑中間產(chǎn)物合成的一種苯丙素類物質(zhì)［１］。綠原酸具有抗菌、消炎、解毒、利膽、降壓等作用［２－４］，其在食品、醫(yī)藥和日用化工等領(lǐng)域中有著廣泛的應(yīng)用［５］。綠原酸作為一種具有多種生物活性的天然物質(zhì)，已引起國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注，其提取純化及檢測技術(shù)的研發(fā)已成為當(dāng)前研究的重點。但國內(nèi)有關(guān)從咖啡中提取綠原酸的報道較少，大多數(shù)是從金銀花、杜仲等材料中
4、提取［６－８］。咖啡是世界三大飲品之一，所含活性成分綠原酸在咖啡豆中的含量占２％～８％［９，１０］。本試驗主要采用正交分析的方法研究從咖啡中提取綠原酸，用高效液相色譜法測定該成分的含量，以期為從咖啡中有效提取綠原酸提供參考。１材料與方法１．１材料與儀器試驗所用咖啡豆為市售咖啡豆。綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品、甲醇、乙醇為色譜純；冰醋酸為分析純。Ａｇｉｌｅｎｔ１１００型高效液相色譜儀（配有紫外檢測器，美國安捷倫公司）；超聲波發(fā)生器（寧波新芝生物科技有限公司）；ＡＵＹ１２０型電子天平（日本島津公司）；５４１８Ｒ型冷凍離心機（德國
5、艾本德公司）；ＨＨ－４型數(shù)顯恒溫水浴鍋（國華電器有限公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）。１．２試驗方法１．２．１色譜條件色譜柱為漢邦ＨｅｄｅｒａＯＤＳ－２（４．６ｍｍ×２５０mm，５μｍ），流動相為甲醇∶０．１％冰醋酸＝３０∶７０（V/V），流速為１．０ｍＬ／ｍｉｎ，柱溫為３０℃，檢測波長為３３０ｎｍ，進樣量為５μＬ。１．２．２標(biāo)準(zhǔn)溶液配制精確稱取對照品綠原酸４．００ｍｇ，以甲醇溶解，并定容至５ｍＬ棕色容量瓶中，得到０．８０ｍｇ／ｍＬ的綠原酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，備用。１．２．３樣品溶液配制精確稱取咖啡豆粉末０．５
6、０ｇ，采用水浸提法、水浸提＋微波輔助法、乙醇浸提法、乙醇浸提＋微波輔助法４種方法進行綠原酸提取工藝的比較，并對其正交試驗影響因素和水平進行設(shè)定（表１～表４），以綠原酸含量為考察指標(biāo)，確定最佳提取工藝和條件。綠原酸含量＝Ｃ×Ｖ×Ｎ／Ｗ×１００％式中，Ｃ為測量液總綠原酸濃度（ｍｇ／ｍＬ）；Ｖ為粗提液體積（ｍＬ）；Ｎ為稀釋倍數(shù)；Ｗ為原料重量（ｍｇ）。２結(jié)果與分析２．１方法學(xué)考察２．１．１線性關(guān)系考察分別吸取綠原酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，用甲醇稀釋并在容量瓶中定容，使其濃度分別為０．０４、０．０８、０．２０、０．４０、０．６０、０
7、．８０ｍｇ／ｍＬ，按“１．２．１”的色譜條件測定綠原酸的峰面積，色譜圖見圖１ａ。以峰面積為縱坐標(biāo)，綠原酸濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到綠原酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Ｙ＝１４５２７Ｘ－３．３７７６（ｒ＝０．９９８７），表明在綠原酸濃度０．０４～０．８０ｍｇ／ｍＬ的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。以咖啡豆粉末為研究對象分析其綠原酸的含量，色譜分析結(jié)果見圖１ｂ。２．１．２精密度考察取綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液，連續(xù)進樣６次，綠原酸保留時間的ＲＳＤ＝０．９８６％，綠原酸峰面積的ＲＳＤ＝１．０５４％，表明該液相色譜儀的精密度良好。２．１．３穩(wěn)定性考
8、察按樣品溶液制備方法制樣，制得的樣品溶液在室溫下放置０、４、８、１２、１６、２０ｈ進行檢測。結(jié)果表明，綠原酸保留時間的ＲＳＤ＝０．９２１％，峰面積的ＲＳＤ＝１．２３６％，表明該樣品的穩(wěn)定性良好。２．１．４重復(fù)性考察取咖啡樣品，按供試樣品溶液的制備方法得到６份溶液，精確吸取５μＬ，注入高效液相色譜儀檢測。結(jié)果表明，綠原酸保留時間的ＲＳＤ＝０．７５３％，峰面積的ＲＳＤ＝１．５８９％，結(jié)果表明該方法的重復(fù)
