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1、草酸促進(jìn)人參愈傷組織細(xì)胞生長和人參多糖與皂苷積累的研究作者：田鵬瑋，劉同祥，楊芳，孫穎，張宗申【摘要】目的研究草酸在光照和不同溫度條件下對人參愈傷組織細(xì)胞生長及次生代謝物質(zhì)積累的影響。方法利用人參懸浮細(xì)胞培養(yǎng)體系,通過改變培養(yǎng)條件和在培養(yǎng)基中添加草酸,通過一定時間的培養(yǎng)后檢測細(xì)胞增長和次生代謝成分的積累。結(jié)果光照和培養(yǎng)溫度對草酸的誘導(dǎo)效果有很大影響，其中在1h/d的光照下，～1mmol·L-1的草酸對細(xì)胞生長和皂苷積累都有促進(jìn)作用，而10mmol·L-1的草酸對多糖積累有促進(jìn)作用;在4個溫度(22，24，26和28℃)水平下，隨著培養(yǎng)溫度的升高，添加草酸對細(xì)胞生長
2、的抑制作用增強(qiáng)，但有利于多糖和皂苷的積累。結(jié)論在使用草酸作為誘導(dǎo)子時，選擇合適的培養(yǎng)溫度和光照條件有利于培養(yǎng)細(xì)胞的生長和次生代謝物質(zhì)積累?！娟P(guān)鍵詞】人參;草酸;愈傷組織;多糖;皂苷Abstract：ObjectiveTostudytheeffectsofoxalatetreatmentonboththegrowthandsecondarymetaboliteaccumulationofGinsengcalluscells.MethodsExaminethecellgrowthandaccumulationofsecondarymetabolitesofsuspen
3、sionGinsengcellsaftermodulationofcultureconditionsandadditionofoxalateintotheculturetemperatureandluminationbraughtaboutmanifesteffectontheinductionofcellgrowthandsecondarymetaboliteaccumulationbyoxalate.Ina1hcycleoflight/darkness,theoxalateattheconcentrationrangeofto1mmol·L-1improved
4、thecellgrowthandsaponinaccumulation,however,10mmol·L-1oxalatecouldexhibiteffectiveinductiononpolysaccharideaccumulation.Inthefourlevelsofculturetemperature(22,24,2and8℃),additionofoxalatecouldincreaseitsinhibitiononthecellgrowthwiththeelevationofculturetemperature,however,whichcouldin
5、creasetheaccumulationofbothpolysaccharidesandsaponin.ConclusionAdoptionofproperluminationperiodandculturetemperaturewillfavortheaccumulationofsecondarymetaboliesaccumulationandcellgrowthwhenoxalateisappliedtothecellcultureasanelicitor.Keywords：Ginseng;Callus;Oxalate;Polysaccharide;Sap
6、onin在培養(yǎng)基中添加誘導(dǎo)子是提高植物細(xì)胞次生代謝能力的有效手段，它們的誘導(dǎo)效果都得到了大量試驗(yàn)結(jié)果的驗(yàn)證[1]。在紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)時加入水楊酸,可以使紫杉醇最高含量達(dá)到/L,比對照提高約6倍[2]。Ketchum等[3]發(fā)現(xiàn)加入茉莉酮酸甲酯,也能促進(jìn)紫杉醇合成。國內(nèi)外均有報(bào)告認(rèn)為草酸是一種非常有效的非生物誘抗劑，張宗申等[4]和李玉紅等[5]發(fā)現(xiàn)草酸可以誘導(dǎo)黃瓜對炭疽病和霜霉病產(chǎn)生局部和系統(tǒng)的持久抗性。上述結(jié)果說明，使用誘導(dǎo)子可以改善培養(yǎng)細(xì)胞在逆境下的生長和次生代謝狀況。本研究以人參愈傷組織為材料，研究在不同溫度和光照條件下添加草酸對細(xì)胞生長和次生代謝的影響，找出
7、草酸作為誘導(dǎo)子的合適使用方法?！?材料本研究所用的新鮮4年生人參RadixGinsengGinseng.根均來源于吉林人參養(yǎng)殖場，取側(cè)根的根尖部分作外植體誘導(dǎo)人參愈傷組織?！》椒?1誘導(dǎo)子的添加草酸溶液在使用前均用微孔濾膜(μm)進(jìn)行過濾滅菌。取一定量的草酸溶液加入到培養(yǎng)基中使其終濃度為，，1，10mmol·L-1，分別在22，24，26，28℃和24，26℃下光照1h/d培養(yǎng)到2d收獲細(xì)胞，然后測定其干重、人參多糖和人參皂苷的含量。.細(xì)胞干重的測定收集愈傷組織在60℃恒溫箱中干燥至恒重,精確稱重、保存。.人參多糖的測定.提取[6]將愈傷組織在50℃下烘干至恒重，
8、粉碎，準(zhǔn)確
