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《柑橘潰瘍病生防菌株cqbs03鑒定和其培養(yǎng)特性研究》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、8期陳力等:柑橘潰瘍病生防菌株CQBS03的鑒定及其培養(yǎng)特性研究2545柑橘潰瘍病生防菌株CQBS03的鑒定及其培養(yǎng)特性研究陳力,王中康,黃冠軍,曹月青,夏玉先,殷幼平(重慶大學(xué)生物工程學(xué)院基因工程研究中心,重慶市基因功能及調(diào)控技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,重慶400030)摘要:【目的】篩選鑒定柑橘潰瘍病菌拮抗菌,研究其培養(yǎng)特性及拮抗物質(zhì)的初步性質(zhì),為柑橘潰瘍病的生物制劑研制奠定基礎(chǔ)?!痉椒ā坷脤?duì)峙培養(yǎng)法篩選對(duì)柑橘潰瘍病菌具有良好抑制作用的生防菌,并通過(guò)對(duì)菌株形態(tài)、生理生化特征以及16SrDNA序列分析鑒定其分類地位;以單因素試驗(yàn)和正交設(shè)計(jì)方法對(duì)影響CQ
2、BS03菌株抑菌活性物質(zhì)產(chǎn)生的各種培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化;利用硫酸銨沉淀獲得抑菌物質(zhì)粗提物并測(cè)定其對(duì)溫度、蛋白酶及氯仿的敏感性?!窘Y(jié)果】經(jīng)鑒定CQBS03為枯草芽孢桿菌Bacillussubtilis。CQBS03抑菌活性成分主要存在于培養(yǎng)液中,能被80%飽和度硫酸銨沉淀,最高可耐受的溫度范圍為60~70℃;活性成分在280nm處有最大吸收峰,分子量大于10kD,對(duì)蛋白酶K和胰蛋白酶穩(wěn)定,而對(duì)氯仿部分敏感。培養(yǎng)特性研究表明,CQBS03最適培養(yǎng)基為YPG液體培養(yǎng)基,抑菌物質(zhì)產(chǎn)生的最適培養(yǎng)條件為:pH8.0左右,28℃培養(yǎng)72h?!窘Y(jié)論】枯草芽孢桿菌C
3、QBS03所產(chǎn)生的抑菌物質(zhì)主要成分是蛋白質(zhì),且屬于外泌型蛋白;該抑菌蛋白對(duì)多種植物病原菌有抑菌作用,尤其對(duì)柑橘潰瘍病菌抑菌活性高,穩(wěn)定性好,是一株極具開(kāi)發(fā)潛力的生防菌株。關(guān)鍵詞:枯草芽孢桿菌;拮抗細(xì)菌;生物防治;柑橘潰瘍?。灰志鞍譋valuationofBacillussubtilisStrainCQBS03AgainstXanthomonasaxonopodispv.citriCHENLi,WANGZhong-kang,HUANGGuan-jun,CAOYue-qing,XIAYu-xian,YINYou-ping(TheKeyLabora
4、toryofGeneFunctionandRegulationofChongqingMunicipalEducationCommission,TheBioengineeringCollegeofChongqingUniversity,Chongqing400030)Abstract:【Objective】CitrusbacterialcankercausedbyXanthomonasaxonopodispv.citri(Xac.)isoneofthemostimportantplantdiseases.Theaimsoftheexperimen
5、tareatscreeninghigheractivitiesantibacterialstraintocontrolthisdisease,andstudingtheantibacterialsubstancecharacteristics.【Method】ThebacterialstrainCQBS03wasisolatedfrommicroorganismfloraofcitrusleafsurface.Thestrainwasidentifiedbasedonthebacteriologicalcharacteristicsandthe
6、16SrDNAsequence.ThecultureconditionsofCQBS03strainwereoptimizedbysinglefactorandorthogonalexperiment.CrudeantibacterialsubstancewasobtainedbyammoniumsulfatefromfermentedliquidoftheCQBS03strain,andthethermalstable,optimumreactivetemperatureandpHweretested.【Result】Thestrainwas
7、identifiedasBacillussubtilis.TheantibacterialactivitysubstancefromCQBS03coulddesignateasonekindofproteinbasedonthelargemolecularweight(morethan10kD),unstableathighertemperature(60℃to70℃),partlysensitivetochloroform,stabletoproteinaseKandtrypsin.Theoptimalcultureconditionsoft
8、hebacteriafortheantibacterialproteinproducingarepH8.0,28℃inyeast?peptone?gl