肌氨酸氧化酶法檢測血清中肌酐含量的方法學(xué)評價

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1、肌氨酸氧化酶法檢測血清中肌酐含量的方法學(xué)評價關(guān)鍵詞：肌酐；酶學(xué)測定；苦味酸法；血清　　〔摘要〕目的：評價肌氨酸氧化酶法(簡稱酶法)檢測血清中肌酐含量的準(zhǔn)確度、特異性和精確度。方法：在設(shè)制好參數(shù)的前提下，取樣本，于日立7170全自動生化分析儀上，進(jìn)行重復(fù)、回收、干擾等一系列試驗，同時用苦味酸法(Jaffe法)進(jìn)行相同實驗，對比其結(jié)果。結(jié)果：酶法測定肌酐的批內(nèi)變異系數(shù)(CV)為0.67%，批間CV為0.83%，線性范圍0μmol/L～8840μmol/L，膽紅素(≥165.5μmol/L)和溶血(Hb1g/L)干擾接近零，回收率為1

2、01.7%。準(zhǔn)確度、精確度和特異性均較Jaffe法高。結(jié)論:酶法抗黃疸干擾力強，操作簡單、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可作為常規(guī)測定方法。　　〔關(guān)鍵詞〕肌酐；酶學(xué)測定；苦味酸法；血清　　ToevaluatetheEnzymaticMethodforAssayingCreatinineinSerum　　　　Abstract：ObjectiveToevaluatetheprecise、accurateandspecificofenzymaticmethodforassayingcreatinineinserum.MethodsBothEnzym

3、aticmethodandJaffe’smethodaticanalyzr.Aftertheparemeterofitparedthoseresults.ResultsThemethodaffordsasimple.Rapidandsensitiveassayuchbetterinclinicalneeds.ConclusionThemethodiseasilyautomatedandissuitableforroutineaticassay;Jaffe’sassay;Serum　　肌酐是肌酸代謝的最終產(chǎn)物，它是由磷酸肌酸通過脫

4、磷酸基并閉合成環(huán)而形成的內(nèi)脫水物。肌酐是肌肉組織代謝產(chǎn)物的廢物，它僅僅由腎小球排泄，不被腎小管重吸收。因此，測定血清肌酐濃度及根據(jù)血清肌酐與尿酐濃度計算所得的肌酐清除率，是既簡單又可靠的腎小球濾過功能的指標(biāo)，深受臨床重視。本實驗采用酶法進(jìn)行肌酐含量的檢測，并與苦味酸法(Jaffe法)比較，前者所受干擾較小，準(zhǔn)確性、重復(fù)性等較好。現(xiàn)將實驗結(jié)果報告如下。　　1　材料和方法　　1.1　材料　研究對象,本院住院及門診患者共100例，日立7170A全自動生化分析儀，膽紅素標(biāo)準(zhǔn)液8840μmol/L、肌酐酶法和Jaffe法試劑盒，由四川邁克

5、科技公司提供，按說明書操作?！　?.2　方法　　1.2.1　取血樣本　按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》中介紹的常規(guī)法制備好血清?！　?.2.2　酶法　按日立7170A儀器操作規(guī)程進(jìn)行，將試驗樣本放檢測盤，檢測參數(shù)：T37.0℃；分析方法：二點終止法；測定點：14~34；測定波長：(次/主)700nm/505nm；樣本量：10μl；稀釋液：水。完成后，結(jié)果直接由打印機(jī)輸出?！　?.2.3　Jaffe法　按日立7170A儀器操作規(guī)程進(jìn)行，將試驗樣本放檢測盤，檢測參數(shù)：T37.0℃；樣本量：20μl；試劑量：試劑1120μl；測定波長：(次

6、/主)700nm/520nm；測定方法：速率法；反應(yīng)斜率：“+”；反應(yīng)線性:30%；測定點：11~14；校正系數(shù)：1.0。完成后，結(jié)果直接由打印機(jī)輸出?！　?　結(jié)果　　2.1　重復(fù)實驗結(jié)果　見表1?！　”?　酶法與Jaffe法重復(fù)實驗結(jié)果（略）　　2.2　回收實驗　基礎(chǔ)物質(zhì)：1.8ml血清、0.2ml水，分析物質(zhì)1為1.8ml血清、0.2ml676.6μmol/L肌酐，分析物質(zhì)2為1.8ml血清、0.2ml233.3μmol/L肌酐，分別用酶法和Jaffe法檢測，其結(jié)果為：酶法總回收率101.7%，Jaffe法總回收率95.4%

7、。　　2.3　干擾實驗　　2.3.1　膽紅素干擾　基礎(chǔ)物質(zhì)S0.9ml血清、0.1ml水，分析物A1∶0.9ml血清、0.1ml862μmol/L總膽紅素，分析物A2∶0.9ml血清、0.1ml1308.μmol/L總膽紅素，分析物A3∶0.9ml血清、0.1ml1655.2μmol/L總膽紅素，分析物A4∶0.9ml血清、0.1ml2159.3μmol/L總膽紅素，分析物A5∶0.9ml血清、0.1ml2635.0μmol/L總膽紅素。檢測結(jié)果見表2?！　”?　酶法與Jaffe法干擾實驗測定結(jié)果（略）　　2.3.2　酮體干擾　

8、當(dāng)血清酮體效價1∶32稀釋陽性時，Jaffe法檢測肌酐值偏高27μmol/L～35μmol/L〔1〕，而酶法不受干擾?！　?.3.3　溶血干擾　標(biāo)本機(jī)械溶血前后肌酐檢測:中度溶血(Hb1g/L)對酶法無影響〔2〕?！　?.4　準(zhǔn)確度測定　取肌酐校標(biāo)液(132.4