肌氨酸氧化酶法檢測(cè)血清中肌酐含量的方法學(xué)評(píng)價(jià)

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1、肌氨酸氧化酶法檢測(cè)血清中肌酐含量的方法學(xué)評(píng)價(jià)關(guān)鍵詞:肌酐;酶學(xué)測(cè)定;苦味酸法;血清 ?。壅菽康模涸u(píng)價(jià)肌氨酸氧化酶法(簡(jiǎn)稱酶法)檢測(cè)血清中肌酐含量的準(zhǔn)確度、特異性和精確度。方法:在設(shè)制好參數(shù)的前提下,取樣本,于日立7170全自動(dòng)生化分析儀上,進(jìn)行重復(fù)、回收、干擾等一系列試驗(yàn),同時(shí)用苦味酸法(Jaffe法)進(jìn)行相同實(shí)驗(yàn),對(duì)比其結(jié)果。結(jié)果:酶法測(cè)定肌酐的批內(nèi)變異系數(shù)(CV)為0.67%,批間CV為0.83%,線性范圍0μmol/L~8840μmol/L,膽紅素(≥165.5μmol/L)和溶血(Hb<1g/L)干擾

2、接近零,回收率為101.7%。準(zhǔn)確度、精確度和特異性均較Jaffe法高。結(jié)論:酶法抗黃疸干擾力強(qiáng),操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、重復(fù)性好,可作為常規(guī)測(cè)定方法。 ?。坳P(guān)鍵詞]肌酐;酶學(xué)測(cè)定;苦味酸法;血清  ToEvaluatetheEnzymaticMethodforAssayingCreatinineinSerum    Abstract:ObjectiveToevaluatetheprecise、accurateandspecificofenzymaticmethodforassayingcreatinineinserum.Me

3、thodsBothEnzymaticmethodandJaffe’smethodaticanalyzr.Aftertheparemeterofitparedthoseresults.ResultsThemethodaffordsasimple.Rapidandsensitiveassayuchbetterinclinicalneeds.ConclusionThemethodiseasilyautomatedandissuitableforroutineaticassay;Jaffe’sassay;Serum  肌酐是肌

4、酸代謝的最終產(chǎn)物,它是由磷酸肌酸通過(guò)脫磷酸基并閉合成環(huán)而形成的內(nèi)脫水物。肌酐是肌肉組織代謝產(chǎn)物的廢物,它僅僅由腎小球排泄,不被腎小管重吸收。因此,測(cè)定血清肌酐濃度及根據(jù)血清肌酐與尿酐濃度計(jì)算所得的肌酐清除率,是既簡(jiǎn)單又可靠的腎小球?yàn)V過(guò)功能的指標(biāo),深受臨床重視。本實(shí)驗(yàn)采用酶法進(jìn)行肌酐含量的檢測(cè),并與苦味酸法(Jaffe法)比較,前者所受干擾較小,準(zhǔn)確性、重復(fù)性等較好?,F(xiàn)將實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下?! ? 材料和方法  1.1 材料 研究對(duì)象,本院住院及門診患者共100例,日立7170A全自動(dòng)生化分析儀,膽紅素標(biāo)準(zhǔn)液8840μmo

5、l/L、肌酐酶法和Jaffe法試劑盒,由四川邁克科技公司提供,按說(shuō)明書操作?! ?.2 方法  1.2.1 取血樣本 按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》中介紹的常規(guī)法制備好血清?! ?.2.2 酶法 按日立7170A儀器操作規(guī)程進(jìn)行,將試驗(yàn)樣本放檢測(cè)盤,檢測(cè)參數(shù):T37.0℃;分析方法:二點(diǎn)終止法;測(cè)定點(diǎn):14~34;測(cè)定波長(zhǎng):(次/主)700nm/505nm;樣本量:10μl;稀釋液:水。完成后,結(jié)果直接由打印機(jī)輸出?! ?.2.3 Jaffe法 按日立7170A儀器操作規(guī)程進(jìn)行,將試驗(yàn)樣本放檢測(cè)盤,檢測(cè)參數(shù):T37.0℃;

6、樣本量:20μl;試劑量:試劑1120μl;測(cè)定波長(zhǎng):(次/主)700nm/520nm;測(cè)定方法:速率法;反應(yīng)斜率:“+”;反應(yīng)線性:30%;測(cè)定點(diǎn):11~14;校正系數(shù):1.0。完成后,結(jié)果直接由打印機(jī)輸出?! ? 結(jié)果  2.1 重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果 見(jiàn)表1?! ”? 酶法與Jaffe法重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果(略)  2.2 回收實(shí)驗(yàn) 基礎(chǔ)物質(zhì):1.8ml血清、0.2ml水,分析物質(zhì)1為1.8ml血清、0.2ml676.6μmol/L肌酐,分析物質(zhì)2為1.8ml血清、0.2ml233.3μmol/L肌酐,分別用酶法和Jaffe法檢測(cè)

7、,其結(jié)果為:酶法總回收率101.7%,Jaffe法總回收率95.4%?! ?.3 干擾實(shí)驗(yàn)  2.3.1 膽紅素干擾 基礎(chǔ)物質(zhì)S0.9ml血清、0.1ml水,分析物A1∶0.9ml血清、0.1ml862μmol/L總膽紅素,分析物A2∶0.9ml血清、0.1ml1308.μmol/L總膽紅素,分析物A3∶0.9ml血清、0.1ml1655.2μmol/L總膽紅素,分析物A4∶0.9ml血清、0.1ml2159.3μmol/L總膽紅素,分析物A5∶0.9ml血清、0.1ml2635.0μmol/L總膽紅素。檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2

8、?! ”? 酶法與Jaffe法干擾實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果(略)  2.3.2 酮體干擾 當(dāng)血清酮體效價(jià)1∶32稀釋陽(yáng)性時(shí),Jaffe法檢測(cè)肌酐值偏高27μmol/L~35μmol/L[1],而酶法不受干擾?! ?.3.3 溶血干擾 標(biāo)本機(jī)械溶血前后肌酐檢測(cè):中度溶血(Hb<1g/L)對(duì)酶法無(wú)影響[2]?! ?.4 準(zhǔn)確度測(cè)定 取肌酐校

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