反相高效液相色譜法測(cè)定濕生扁蕾中木犀草素和1,7

《反相高效液相色譜法測(cè)定濕生扁蕾中木犀草素和1,7》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。

1、反相高效液相色譜法測(cè)定濕生扁蕾中木犀草素和1,7.freelm×250mm,5μm)；流動(dòng)相為甲醇(A)-0.4%磷酸水溶液(B)梯度洗脫,0～15min,A∶B＝50∶50,15～60min,A∶B＝55∶45；檢測(cè)波長260nm；流速1mL/min；柱溫30℃。結(jié)果1,7-二羥基-3,8-二甲氧酮和木犀草素分別在0.084～0.84μg和0.184～1.84μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)分別為0.9994和0.9997；平均回收率分別為96.82%和97.19%,RSD均小于3%。結(jié)論該方法簡(jiǎn)便準(zhǔn)確,.freelinationofluteolinand1,7-dihyd

2、roxy-3,8-dimethoxyxanthoneinHerbalGentianopsispaludosa.MethodTheRP-HPLCm×4.6mm,5μm)lumethanol(A)-0.4%H3PO4(B)Gradientelutionin,A∶B＝50∶50,15～60min,A∶B＝55∶45.Detection.FloL/min.Temperatureofcolumnethoxyxanthoneandluteolinethoxyxanthoneandluteolinethodethoxyxanthone；luteolin；RP-HPLC濕生扁蕾Gentiano

3、psispaludosa(Mum.)Ma為龍膽科扁蕾屬一年生草本植物。具有清熱解毒、利濕消黃、健脾止瀉等功能,用于肝炎、膽囊炎、熱病發(fā)斑、目赤腫痛、消化不良、腸胃炎等1。由于受諸多因素的制約,致使目前藏藥材使用不規(guī)范,缺乏理化控制標(biāo)準(zhǔn),因此,加強(qiáng)藏藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)性研究,是保證和提高藏藥標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化,進(jìn)一步開發(fā)藏藥以及發(fā)展民族醫(yī)藥事業(yè)的重要課題。濕生扁蕾主要含有酮類、黃酮類、三萜類化合物2,酮類和黃酮類化合物具有抗氧化、抗菌、護(hù)肝等生物活性3-4,其中木犀草素是濕生扁蕾抗腹瀉活性成分,而1,7-二羥基-3,8-二甲氧基酮是濕生扁蕾抗菌活性成分5-6,所以,選擇這兩種成分

4、進(jìn)行含量測(cè)定,為濕生扁蕾藥材的質(zhì)量控制提供可行的方法。1儀器與試藥AgilentHP1100高效液相色譜儀(美國安捷倫公司)；AE-240電子天平(瑞士布奇)；KQ-100超聲波清洗器(昆山市超聲技術(shù)有限公司)；R-200旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(瑞士布奇)。木犀草素對(duì)照品(批號(hào)111520-200201)購自中國藥品生物制品檢定所；1,7-二羥基-3,8-二甲氧基酮對(duì)照品(自提,HPLC歸一化法測(cè)定純度達(dá)98%以上)；濕生扁蕾藥材經(jīng)甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)陳垣教授鑒定為GentianopsispaludosaMa。甲醇為色譜純,水為重蒸餾水,其它試劑均為分析純。2方法與結(jié)果2.1色譜條件色譜柱為ZO

5、RBAXSB-C18(250mm×4.6mm,5μm)；流動(dòng)相為甲醇(A)-0.4%磷酸水溶液(B)梯度洗脫,A∶B＝50∶50(0～15min),A∶B＝55∶45(15～60min)；檢測(cè)波長260nm；流速為1.0mL/min；柱溫30℃。理論塔板數(shù)均大于3000。色譜圖見圖1。2.2對(duì)照品溶液制備精密稱取木犀草素對(duì)照品2.1mg、1,7-二羥基-3,8-二甲氧基酮對(duì)照品4.6mg,置10mL量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,精密吸取1mL,用甲醇定容至5mL量瓶中,作為對(duì)照品溶液。2.3供試品溶液制備精密稱取濕生扁蕾藥材粉末1g,用50mL丙酮回流提取4h,提取水浴蒸干,殘

6、渣加甲醇溶解并定容至10mL,搖勻,用0.45μm微孔濾膜過濾,作為供試品溶液。2.4線性關(guān)系考察精密吸取混合對(duì)照品溶液2、4、8、10、12、16、18、20μL,進(jìn)樣測(cè)定,以對(duì)照品進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo),峰面積積分值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。木犀草素和1,7-二羥基-3,8-二甲氧基酮的回歸方程分別為：Y＝84.526X－49.163,r＝0.9994和Y＝112.431X－117.129,r＝0.9997。結(jié)果木犀草素和1,7-二羥基-3,8-二甲氧基酮分別在0.084～0.84μg和0.184～1.84μg范圍內(nèi)線性良好。2.5精密度試驗(yàn)精密吸取混合對(duì)照品溶液10μL

7、,按上述色譜條件,重復(fù)進(jìn)樣5次,結(jié)果木犀草素和1,7-二羥基-3,8-二甲氧基酮的RSD分別為1.63%和0.97%,表明儀器精密度良好。2.6穩(wěn)定性試驗(yàn)精密吸取同一樣品溶液,按上述色譜條件,分別于0、2、4、6、8、12h各進(jìn)樣10μL,木犀草素和1,7-二羥基-3,8-二甲氧基酮的RSD分別為2.71%和1.33%,表明樣品溶液在12h內(nèi)穩(wěn)定。2.7重復(fù)性試驗(yàn)精密稱取同一批濕生扁蕾藥材1g,共5份,分別按“2.3”項(xiàng)下方法制備樣品溶液,各取10μL進(jìn)樣測(cè)定,結(jié)果木犀草素和1,7-二羥