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1、廣西不同產(chǎn)地華南忍冬中綠原酸含量測定【關鍵詞】華南忍冬；綠原酸；高效液相色譜法；含量測定Abstract：ObjectiveTodeterminethecontentofchlorogenicacidinFructusLoniceraConfusaDC(FLCD)fromdifferentplacesinGuangxibyHPLC,andevaluateitsinternalquality.MethodsHPLCseparationedonaAgilentC18analyticalcolumn(4.6mm×150mm,5μm)bygradientelutingethanol-0.05%pho
2、sphoricacidatthefloL/min.Thecolumntemperature.ResultsThechlorogenicacidcontentofFLCDfromdifferentplacesinGuangxirangedfrom2.21%to3.94%.ConclusionThechlorogenicacidcontentsofFLCDfromdifferentplacesinGuangxiaredifferent,butallofthemareuptothestandardofPhamarcopoeiaofthePeople’sRepublicofChina.Keyinat
3、ion華南忍冬為山銀花的一種,系忍冬科忍冬屬植物華南忍冬LoniceraconfusaDC.的干燥花蕾,具有清熱解毒之功效,同時還是重要的化工原料和優(yōu)良飲品原料。2000年版及其之前的《中華人民共和國藥典》將華南忍冬當作山銀花使用,2005年版《中華人民共和國藥典》將華南忍冬定為山銀花3種植物之一[1]?！ ?儀器與試藥安捷倫Agilent1100高效液相色譜儀；CG-16illiporeSimplicity-185超純水儀(美國密里博公司)；BP211D電子分析天平(德國賽多利斯)；Agilent8453紫外分析儀(美國安捷倫科技公司)。綠原酸對照品(由中國藥品生物制品檢定所提供,批號11
4、0753-200413)；實驗用10批樣品均經(jīng)廣西中醫(yī)藥研究所副研究員方鼎鑒定為忍冬科植物華南忍冬LoniceraconfusaDC.的干燥花蕾或帶初開的花。甲醇、乙腈(天津四友生物醫(yī)學技術有限公司,色譜純)、乙醇(北京化工廠,分析純)、磷酸[中國醫(yī)藥(集團)上?；瘜W試劑公司,分析純],其他試劑均為分析純?！ ?方法與結果 2.1對照品溶液的制備取綠原酸對照品3mg,精密稱量,置10mL容量瓶中,加70%乙醇稀釋至刻度,搖勻,得到濃度為0.3mg/mL的溶液,備用?！ ?.2供試品溶液的制備精密稱定華南忍冬藥材粉末0.1g,精密加入70%乙醇50mL,超聲提取30min,所得溶液趁熱離心1
5、5min,取上清液即可?！ ?.3色譜條件色譜柱為AgilentC18柱(150mm×4.6mm,5μm)；流動相為乙腈-甲醇-0.05%磷酸,0～20min三相的比例為7∶5∶88,25min為13∶13∶74,體積流量為0.5mL/min；柱溫為30℃；檢測波長327nm；進樣10μL；理論塔板數(shù)以綠原酸計不低于1000?！ ?.5精密度試驗精密量取上述同一供試品溶液10μL,重復進樣6次,按上述色譜條件測定,綠原酸峰面積積分值的RSD＝0.50%?！ ?.6重復性試驗分別取同一批樣品各6份,按“2.2”項下方法制備并進行測定,結果綠原酸的平均含量為3.30%,RSD＝1.05%?！ ?
6、.7穩(wěn)定性試驗取同一供試品溶液,按上述色譜條件,分別在0、2、4、8、16、24h不同的時間點進行檢測,考察樣品溶液的穩(wěn)定性。結果表明,綠原酸的RSD＝1.06%,說明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。 2.8加樣回收率試驗 取已知含量的樣品0.05g,精密稱定,分別精密加入綠原酸對照品溶液(1.096mg/mL)1mL,按照“2.2”項下方法制備,依次測定,計算回收率。結果見表1。表1加樣回收率測定結果（略） 2.9樣品測定 取10批廣西不同產(chǎn)地的樣品,按上述測定方法進行測定,以外標峰面積法計算樣品的含量。結果見圖1、表2。表2廣西不同產(chǎn)地華南忍冬樣品中綠原酸含量測定結果（略） 3討論
7、 2005年版《中華人民共和國藥典》中,山銀花的含量測定使用乙腈-0.4%磷酸溶液(8∶92)作為流動相；而在試驗過程中,反復使用此條件都不能使樣品有很好的分離結果,后采用甲醇-乙腈-0.05%磷酸溶液三相作為流動相,采用梯度洗脫的方法,使樣品中綠原酸峰以及其它峰得到很好的分離。廣西華南忍冬的產(chǎn)地主要分布在廣西的上思縣、橫縣、邕寧縣等地,多為野生零散分布,但其主要有效成分綠原酸含量均已達到《中華人民共和國藥典
