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《一種壓縮感知測量矩陣優(yōu)化的混合方法》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、抗人CCR5多克隆抗體體外阻斷HIV-1假病毒的感染研究程林,唐嫻,趙方,何美云,王輝(深圳市第三人民醫(yī)院,廣東深圳518112)摘要:目的制備鼠抗人CC型趨化因子受體5(CCchemokinereceptor5,CCR5)特異性HIV-1中和抗體。方法用穩(wěn)定表達人CCR5的CHO-R5細胞腹腔免疫BALB/c小鼠;流式細胞術的方法分析免疫血清對GHOST-R5細胞的結合;純化免疫血清總IgG抗體,HIV-1假病毒中和試驗分析血清總IgG的中和活性。結果流式細胞術的結果顯示,CHO-R5細胞免疫組小鼠血清對GHOST-R5結合的平均熒光強度顯著高于對照
2、組(P<0.001);HIV-1假病毒中和試驗的結果發(fā)現(xiàn),純化的CHO-R5細胞組小鼠免疫血清總IgG,可抑制HIV-1假病毒在體外感染GHOST-R5細胞,抑制作用具有劑量依賴性,最高抑制率達到92%。結論成功誘導出具有中和HIV-1活性的鼠抗人CCR5的多克隆抗體。關鍵詞:CC型趨化因子受體5;中和抗體;艾滋病病毒1型中圖分類號:R373.9文獻標志碼:A文章編號:1672-5662(2015)11-0000-00PolyclonalantibodiestohumanCCR5blocktheinfectionofHIV-1pseudotypedvi
3、rusinvitroCHENGLin,TANGXian,ZHAOFang,etal.(ShenzhenThirdPeople’sHospital,Shenzhen518112,GuangdongChina)Abstract:ObjectiveToprepareCCR5-specificHIV-1neutralizingantibodies.MethodsBALB/cmicewereintraperitoneallyimmunizedwithhumanCCR5stable-expressingCHO-R5cells;Thebindingofserafor
4、mimmunizedmicewithGHOST-R5cellswasanalyzedbyflowcytometry;theneutralizingactivityofpurifiedtotalIgGfromimmunizedmicetoHIV-1infectionwasdeterminedbyHIV-1env-pseudotypedvirusneutralizingassay.ResultsThemeanfluorescenceintensityofthebindingofGHOST-R5cellswithserafrommiceofCHO-R5cel
5、lsimmunizedgroupwassignificantlyhigherthanthatofthecontrolgroup(P<0.001)byflowcytometry;andtheneutralizingassayshownthat,totalIgGpurifiedfrommiceofCHO-R5cellsimmunizedgroupeffectivelyinhibitedtheinfectionofGHOST-R5cellsbyHIV-1pseudotypedvirusinadose-dependentmanner,withthehighes
6、tinhibitionratioof92%.ConclusionsSuccessfullyinducedmouseantihumanCCR5polyclonalantibodieswithHIV-1neutralizingactivity.Keywords:CCR5;Neutralizingantibody;HIV-1近年來,全球新發(fā)感染艾滋病病毒1型(humanimmunodeficiencyvirustype-1,HIV-1),人數(shù)和艾滋病死亡人數(shù)總體呈現(xiàn)下降的趨勢。中國是疫情較為嚴重的國家之一,艾滋病仍是面臨的重大公共衛(wèi)生問題[1]。鼠抗人CC型
7、趨化因子受體5(CCchemokinereceptor5,CCR5)作為HIV-1主要的輔助受體,在病毒感染和傳播過程中起關鍵作用[2]。本研究以表達人CCR5的CHO-R5細胞為免疫原,成功在小鼠體內誘導出具有中和活性的CCR5多克隆抗體,為開發(fā)靶向CCR5的HIV-1中和抗體奠定基礎。1材料方法收稿日期:2015-05-28;修回日期:2015-08-19基金項目:國家“十二五”傳染病重大專項(2012ZX10001009-001-001)SupportedbytheNational“TwelfthFiveYearPlan”InfectiousDi
8、seasesMegaProject(2012ZX10001009-001-001)作者簡介:程