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《溫病濕熱證大鼠模型肝線粒體k+》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、溫病濕熱證大鼠模型肝線粒體K+【關(guān)鍵詞】溫??;肝;線粒體;酶活力;K+-Na+-ATP;濕熱證;大鼠 Abstract:[Objective]Toexploretheeffectsofthemodelestablishmentmethodsonenergymetabolismindicatorsofmodelrats.[Methods]Setupnormalgroup,modelgroup(highfatdiet+hightemperatureandhighhumidity+colonbacillus),contrarygroup(routinediet
2、+hightemperatureandhighhumidity+colonbacillus),theactivityoflivermitochondriaNa+-K+-ATPaseinesthecontentofphosphorus.[Results]TheNa+-K+-ATPaseactiveinmodelgrouparkablydecreased,andhadnosignificantlydifferencefromcontrarygroup.[Conclusion]ThelivermitochondriaNa+-K+-ATPasebeingremar
3、kablydecreasedisoneofpathologicalbasisofdamp-heatmodel,un-relateditochondria;enzymeactivity;K+-Na+-ATP;damp-heatsyndrome;rat濕熱既是中醫(yī)特有的致病原因,又是具有廣泛臨床基礎(chǔ)的中醫(yī)病證,涉及多系統(tǒng)、多器官、多組織的病變。為了進一步揭示濕熱證的本質(zhì),我們模擬濕熱發(fā)病原因,觀察環(huán)境、生物因素對模型大鼠肝線粒體Na+-K+-ATPase活性的影響?! ?實驗材料 1.1實驗動物 清潔級l,4℃冰箱保存。(2)高脂飼料:膽固醇、膽酸鈉,武漢
4、亞法生物技術(shù)有限公司提供。配方:普通飼料+膽固醇25g/kg+膽酸鈉2g/kg+蛋黃粉80g/kg+豬脂100g/kg。(3)ATP酶測試盒:南京建成生物工程研究所。 1.3實驗儀器 人工氣候箱SHH-500GS型,重慶市永生實驗儀器廠,電子體溫計上海醫(yī)用儀器廠,臺式低溫高速離心機TGL-16G-A,上海安亭科學(xué)儀器廠,721分光光度計16C14型,上海精密科學(xué)儀器有限公司。 2實驗方法 2.1動物分組 常規(guī)喂養(yǎng)3d,隨機將24只大鼠分為:正常組、濕熱模型組(高脂+高溫高濕+大腸桿菌)、模型對照組(普食+高溫高濕+大腸桿菌)?! ?.2造模方法
5、 正常組:在正常溫濕度(溫度24~28℃,相對濕度60%~75%)環(huán)境下,普通混合飼料喂養(yǎng)29d。濕熱模型組:在正常溫濕度環(huán)境下,高脂飼料喂養(yǎng)2周后,再放入人工氣候箱中(溫度35℃,相對濕度95%),每天造模時間(上午8~12時,下午13~17時),高脂飼料喂養(yǎng)。12d后,灌服大腸桿菌109/ml·200g-1(預(yù)實驗摸索劑量)。4h后,再加強灌服1次,繼續(xù)放入人工氣候箱造模觀察3d。模型對照組:過程同濕熱模型組,整個過程普食喂養(yǎng)?! ?.3標本采集 分別于濕熱模型組、模型對照組灌服大腸桿菌(濃度109ml·200g)后72h,脫椎處死大鼠。迅速剖腹取各
6、組肝組織置于4℃生理鹽水中,洗去表面的殘血,濾紙吸干,取大鼠肝臟6g,放入盛有10%福爾馬林的容器中,存-20℃冰箱中。取肝組織1g,剪碎,按重量體積比,加入分離介質(zhì)(內(nèi)含蔗糖0.3mol/L,HEPES5mmol/L,EDTA0.5mmol/L,PH7.4)制備成10%的組織勻漿,隨后以3000rpm離心10min,然后取組織勻漿上清液,再用分離介質(zhì)按1:9稀釋成1%組織勻漿。待測?! ?實驗結(jié)果 3.1癥狀體征 濕熱模型組:在灌服大腸桿菌前,飲水量、飲食量已有所減少,少數(shù)大便較軟,存在少許粘液。尿黃濁,灌服大腸桿菌后,全部大鼠體溫升高,3d后仍不退
7、。這些癥狀加重,大便次數(shù)增多,有些呈稀爛狀。全部大鼠蜷臥懶動,聳毛明顯,毛色暗黃無澤,與正常組比較普遍消瘦。模型對照組:體溫同濕熱模型組,維持時間稍短,飲水、飲食量較正常組少,大便有些變軟。余與濕熱模型組相同。正常組動物:在喂養(yǎng)四周期間,以上指征均無明顯變化。 3.2肝線粒體Na+-K+-ATPase水平變化 濕熱模型組、模型對照組肝線粒體Na+-K+-ATPase活性均較正常組非常顯著降低(P<0.01),濕熱模型組與模型對照組比較無顯著性差異(P>0.05)。見表1。表1各組大鼠肝線粒體Na+-K+-ATPase水平比較(略) 4討論
8、肝臟是能量代謝的重要器官,含有豐富的線粒體,而線粒體是細胞有氧呼吸