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《分析脂多糖對肺泡ⅱ型上皮細胞的損傷功能》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、分析脂多糖對肺泡Ⅱ型上皮細胞的損傷功能【脂多糖類;肺表面活性劑;急性病,肺/損傷【Abstract AIM:Tostudytheinjuringeffectoflipopolysaccharide(LPS)onalveolartypeⅡcells(ATⅡ)inacutelunginjury(ALI).METHODS:Sixteenratsizedinto2groups:controlgroupandLPSgroup.Controlgroupaleicdialdehyde(MDA)contentsintheBALFeas
2、ured;theactivitiesoflactatedehydrogenase(LDH)andalkalinephosphatase(AKP)inBALFicroscope.RESULTS:paredonaryedemainLPSgroupbythemicroscopy;TPLcouldbedecreased[(432±45)vs(342±59)μg/kg]andsu***cetensionbeincreased[(19.8±2.6)vs(23.3±2.9)mN/m]byLPS(P%26lt;0.05);LPScou
3、ldincreasesignificantlytheactivityofAKP[(100±80)vs(360±100)nkat/L](P%26lt;0.05).CONCLUSION:LPScaninjuretheATⅡandsuppressthesecretionofpulmonarysu***ctantsinacutelunginjury.【Keyonarysu***ctants;acutelung/injuries【 目的:探究急性肺損傷時脂多糖(LPS)對肺泡Ⅱ型上皮細胞(ATⅡ)的損傷功能.方法:將16只SD大
4、鼠隨機等分為生理鹽水對照組、LPS模型組.通過頸外靜脈給藥4h后正法動物,收集肺泡灌洗液(BALF),測定BALF表面張力、總磷脂含量(TPL)、乳酸脫氫酶(LDH)、堿性磷酸酶(AKP)、丙二醛(MDA)及總蛋白(TP)含量;取右肺下葉,行HE染色光鏡觀察.結(jié)果:和對照組相比,LPS可進步BALF中LDH活性[(8.4±1.9)vs(4.8±1.9)μkat/L,P%26lt;0.05]和增加TP含量[(100±32)vs(28±17)g/L,P%26lt;0.05],使BALF中MDA含量升高;光鏡下可見,LPS組
5、呈典型間質(zhì)性肺水腫表現(xiàn);LPS可降低BALF中TPL含量[(342±59)vs(432±45)μg/kg,P%26lt;0.05]、增加表面張力[(23.3±2.9)vs(19.8±2.6)mN/m,P%26lt;0.05],LPS組AKP活性較對照組明顯升高[(360±100)vs(100±80)nkat/L,P%26lt;0.05].結(jié)論:LPS可以引起ATⅡ的損傷,并抑制其合成、分泌肺表面活性物質(zhì).【脂多糖類;肺表面活性劑;急性病,肺/損傷急性肺損傷(ALI)由各種肺內(nèi)外致病因素所致.發(fā)病機制復雜、治療手段有限,
6、尤其是在急性呼吸窘迫綜合征階段,死亡率高達50%以上.肺泡Ⅱ型上皮細胞(ATⅡ)不僅可合成、分泌肺表面活性物質(zhì)(PS),還具有修復肺泡上皮、肺水轉(zhuǎn)運、局部免疫等多種重要生理功能[1-3],該細胞損傷是ALI發(fā)病過程中的重要環(huán)節(jié)之一.脂多糖(LPS)是內(nèi)毒素的主要生物活性成分,具有極強的生物活性,且肺是內(nèi)毒素的主要靶器官之一.現(xiàn)已明確革蘭陰性菌感染、內(nèi)毒素血癥是ALI主要致病原因之一.但是LPS是否對ATⅡ有損傷功能還存在較大爭議,我們擬通過動物實驗證實LPS對ATⅡ的損傷功能,進一步揭示ALI的發(fā)病機制.1材料和方法1
7、.1材料成年SD大鼠16只,體質(zhì)量200~250g,雌雄各半(第四軍醫(yī)大學實驗動物中心);LPS(美國Sigma公司);堿性磷酸酶(AKP),乳酸脫氫酶(LDH),丙二醛(MDA)試劑盒(南京建成生物工程探究所);磷標準溶液由第四軍醫(yī)大學預防系營養(yǎng)和食品衛(wèi)生學教研室高雙斌高級實驗師惠贈;725C型紫外可見分光光度計(上海第三分析儀器廠).1.2方法1.2.1動物分組將動物隨機分為2組:①對照組(n=8),經(jīng)頸外靜脈導管注進和LPS組等容積生理鹽水;②模型組(n=8),經(jīng)頸外靜脈導管注射2mg/kgLPS,以復制ALI動
8、物模型.1.2.2手術(shù)及標本采集將大鼠腹腔注射200g/L烏拉坦5mL/kg,麻醉后固定于鼠板;沿頸部正中切開皮膚,分離一側(cè)頸外靜脈,插進導管給藥,給藥后4h行頸椎脫臼正法并行氣管插管術(shù),以20mL/kg生理鹽水進行支氣管肺泡灌洗,連續(xù)3次,取第1次灌洗所得肺泡灌洗液(BALF)0.2mL用于表面張力的丈量,收集所有BALF并記錄