超聲波提取木瓜葉總黃酮及其鑒別

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1、超聲波提取木瓜葉總黃酮及其鑒別黃鎖義，劉?；?，黎海妮，唐玉蓮，張婧萱【關(guān)鍵詞】超聲波提取；,,木瓜葉；,,總黃酮；,,鑒別　　摘要：目的為充分利用木瓜葉植物資源，避免資源的浪費，探討木瓜葉中總黃酮的提取及鑒別方法。方法采用超聲波乙醇浸提法從木瓜葉中提取黃酮類物質(zhì)，對所提取的黃酮類物質(zhì)進行驗證，并用紫外分光光度法測定含量。結(jié)果測得樣品中總黃酮的含量C=0.9880mg/ml，回收率為97.79%，其純度和產(chǎn)率均較高。結(jié)論該方法采用全物理過程，無任何污染，是提取木瓜葉黃酮類物質(zhì)的有效途徑?！　￡P(guān)鍵詞：超聲

2、波提??；木瓜葉；總黃酮；鑒別　　ExtractionandIdentificationofTotalFlavanonefromPapayaLeavesbyUltrasonicethodsTheflavonoidspapayaleavesetrytoextractandchecktheflavanoneofpapayaleaves.ResultsThedensityofthetotalflavanoneofpapayaleavesg/mlandtherateofrecoveryethodisapurel

3、yphysicalprocessandhasnotanypollution.Itisanidealpapayaleaves.　　Keyl95%乙醇，超聲波提取2.5h，抽濾。濾渣再加80ml95%乙醇，超聲波提取2.5h，抽濾，合并兩次濾液，減壓回收乙醇至濾液僅剩5~7ml為止，放置100ml容量瓶中，用60%乙醇稀釋至刻度，得樣品液。　　2.2測定方法依據(jù)以蘆丁為對照品測定木瓜葉中總黃酮的含量，加入鋁離子試劑，同時控制適宜pH值，使黃酮化合物與鋁鹽形成絡(luò)合物，在可見光區(qū)能獲得穩(wěn)定的特征吸收峰?！　?

4、.3定量實驗-總黃酮的含量測定　　2.3.1波長的選擇取樣品液適量，在0.30ml5%亞硝酸鈉溶液存在的堿性條件下，經(jīng)硝酸鋁顯色后，以試劑為空白參比液在420~700nm波長范圍測定絡(luò)合物的吸光度，絡(luò)合物于510nm波長處有最大吸收，故測定時選用此波長?！　?.3.2標準曲線的繪制分別精密吸取蘆丁對照液（0.10mg/ml）0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00ml于10.00ml容量瓶中，分別加入5%亞硝酸鈉溶液0.30ml，搖勻，靜置6min；再加10%硝酸鋁溶液0.

5、30ml，搖勻，靜置6min；再加4%氫氧化鈉溶液4.00ml，用60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，靜置12min，以試劑作空白參比液，于510nm處測定吸光度，結(jié)果見表1?！　”?紫外可見分光光度計測定蘆丁對照液吸光度（略）　　根據(jù)上表得回歸方程：A=-6.9671×103+8.4181C，r=0.9999　　2.3.3提取物含量的測定精密吸取樣品液0.50ml，置10.00ml容量瓶，按標準曲線的制備方法測定其吸光度A=0.409，根據(jù)回歸方程：A=-6.9671×103+8.4181C，計算樣品中總黃

6、酮的含量C=0.9880mg/ml。　　2.3.4回收實驗精密量取樣品液1.00ml，加入標準蘆丁對照品1.00ml（0.10mg/ml），同前樣品測定方法操作測定吸光度，求出回收率為97.79%?！　?.4定性實驗-總黃酮的鑒別　　2.4.1顏色反應(yīng)紫外光下呈色反應(yīng)：取該樣品溶液點在濾紙上，在可見光下呈灰黃色，在紫外光下呈灰褐色并有熒光斑點。濃氨水反應(yīng)：取該樣品溶液點在濾紙上，將濾紙在氨水上方熏0.5min，立即在紫外光下觀察，呈極明顯的黃褐色熒光斑點。三氯化鋁反應(yīng)：取樣品溶液點在濾紙上，滴加１％三

7、氯化鋁乙醇溶液，吹干。在可見光下呈灰黃色，在紫外光下呈黃色熒光斑點。乙酸鎂反應(yīng)：取樣品溶液點在濾紙上，滴加1%乙酸鎂甲醇溶液，吹干，紫外光下呈黃色斑點。鹽酸鎂粉反應(yīng)：取乙醇提取液1ml于試管中加鎂粉，再加入濃鹽酸數(shù)滴（1次加入），在泡沫處呈紫紅色?！　?.4.2紙層析取樣品溶液10μl點在濾紙上。用正丁醇∶醋酸∶水=4∶1∶5（體積比）為展開劑，上行展開5h，取出晾干。噴1%氯化鋁乙醇溶液。吹干后于紫外光下，可見熒光斑點。　　3討論　　3.1實驗結(jié)果表明，本實驗方法工藝簡單，回收率為97.79%，利用

8、本文所提供的超聲波提取、純化方法而得到的黃酮類物質(zhì)其純度較高。超聲波可以強化乙醇浸提法，達到省時、高效、節(jié)能的目的，此方法采用全物理過程，無任何污染，是一條理想的提取黃酮類物質(zhì)的途徑，具有廣闊的應(yīng)用前景?！　?.2黃酮類化合物是一大類天然產(chǎn)物，廣泛存在于植物界，是許多中草藥的有效成分。在自然界中最常見的是黃酮和黃酮醇，其它包括雙氫黃（醇）、異黃酮、雙黃酮、黃烷醇、查爾酮、橙酮、花色苷及新黃酮類等〔5〕。天然來源的生物黃酮分子量小，能被人體迅速吸收，能通過